常用培养基配方.doc

1．营养肉汤4 V5 i9 c |# r9 b+ p! o成分：蛋白胨 10g，牛肉膏 3g，氯化钠 5g，蒸馏水 1000mL，pH7.4 I- s- H) D2 Y! o: s8 W: e! r0 y制法：按上述成分混合，溶解后校正 pH，121℃高压灭菌 15min8 n$ v8 ?% ^- {3 W% {2 s7 ~. _1 s3 m8 v; u1 O2 N' ^8 w2．营养琼脂培养基成分：蛋白胨 10g，牛肉膏 3g，氯化钠 5g，琼脂 17g，蒸馏水 1000mL，pH7.2制法：将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正 pH，加入琼脂，分装于烧瓶内，121℃，15min 高压灭菌备用4 }: a. K4 A3 y( e4 }: v5 D+ ^# ^8 g0 L# H" q0 ]3．MRS 培养基 2 p4 J2 N, R9 U8 ~# }& V2 I8 F$ d( K+ O成分：蛋白胨 10g，牛肉膏 10g，酵母粉 5g，K2HPO4 2g，柠檬酸二铵 2g，乙酸钠 5g，葡萄糖 20g，吐温 80 1mL，MgSO4 .7H2O 0.58g，MnSO4 4H2O 0.25g， （琼脂 15~20g） ，蒸馏水 1000mL。

L9 M7 x2 b2 a* B, h制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调 pH 至 6.2~6.4，分装于三角瓶中，121℃,灭菌 15min0 E* `* h9 r7 H5 f8 Z V0 c5 e4．脱脂乳培养基成分：牛奶，蒸馏水制法：将适量的牛奶加热煮沸 20~30min，过夜冷却，脂肪即可上浮除去上层乳脂即得脱脂乳将脱脂乳盛在试管及三角瓶中，封口后置于灭菌锅中在 108℃条件下蒸汽灭菌10~15min，即得脱脂乳培养基5．培养基 A! ~4 F% X$ T8 Z1 J* c: n3 y3 V* @# C+ s成分：蛋白胨 10.0g，酵母提取物 1.0g，葡萄糖 10.0g，NaCL5.0g，琼脂 15.0g，水1000mL制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调 pH 至 7.0~7.2，分装于三角瓶中，121℃，灭菌 15min6．PTYG 培养基 3 O5 V/ t: N! s! ^! W, J! W1 h [9 W0 {+ I成分：胰胨 Tryptone（Oxoid）5g，大豆蛋白胨 5g，酵母粉（Oxoid）10g，葡萄糖 10g，吐温 80 0 1mL，琼脂 15~20g，L-半胱氨酸盐酸盐 0.05g，盐溶液 4mL。

制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调 pH 至 6.8~7.0，分装于三角瓶中，115℃灭菌 30min) M: O' g1 m( w+ _/ M6 X# ~9 W, _3 z7 ~' |盐溶液制备：无水氯化钙 0.2g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，MgSO4 7H2O 0.48g，NaCO3 10g，NaCL 2g，蒸馏水 1000mL，溶解后备用7．豆芽汁液体培养基& }# A9 G, {) X% ]* G$ {成分：豆芽汁 10mL，磷酸氢二铵 1g，KCL 0.2g，MgSO4.7H2O 0.2g，琼脂 20g制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调 pH 至 6.2~6.4，分装于三角瓶中，0.04%的溴甲酚紫酒精溶液（黄色 5.2~6.8 紫色）作为指示剂， 115℃灭菌 20min" `: X8 h( _ a豆芽汁制备：将黄豆芽或绿豆芽 200g 洗净，在 1000mL 中煮沸 30 min，纱布过滤得豆芽汁、补足水分至 1000mL l" J/ U( E8 N' e" l J, I1 j8．麦芽汁琼脂培养基: {- H/ s% X, N6 L1 A# k成分：优质大麦或小麦，蒸馏水，碘液。

\ n1 D: q0 A7 N7 S7 X1 ]6 i) M3 a w制法：取优质大麦或小麦若干，浸泡 6~12h，置于深约 2cm 的木盘上摊平，上盖纱布，每日早、中、晚各淋水一次，麦根伸长至麦粒两倍时，停止发芽晾干或烘干 ?- q2 r A1 b( I, I/ Z称取 300g 麦芽磨碎，加 1000mL 水，38℃保温 2h，再升温至 45℃，30min ，再提高到50℃，30min，再升至 60℃，糖化 1~1.5h取糖化液少许，加碘液 1~2 滴，如不为蓝色，说明糖化完毕，用文火煮半小时，四层纱布过滤如滤液不清，可用一个鸡蛋清加水约 20mL 调匀，打至起沫，倒入糖化液中搅拌煮沸再过滤，即可得澄清麦芽汁用波美计检测糖化液浓度，加水稀释至 10 倍，调 pH5~6，用于酵母菌培养；稀释至 5~6 倍，调 pH7.2，可用于培养细菌，121℃灭菌 20min6 d) F- u7 W1 b7 R$ ~( a j4 x2 z) w9．查（察）氏培养基成分：NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4. 7H2O 0.5g，KCL 0.5g，FeSO4.7H2O 0.01g，蔗糖30g，琼脂 15~20g，蒸馏水 1000mL，pH 值自然。

F$ M1 A/ k+ P! w" h8 D" {* F制法：加热溶解，分装后 121℃灭菌 20min ^2 L; W$ r" v. j10．马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）5 a9 G' @0 l/ G9 a0 Y0 L& m成分：马铃薯（去皮）200g，葡萄糖（或蔗糖）20g，琼脂 20g，水 1000mL { s1 J3 T+ z* s制法：pH 值自然将马铃薯去皮、洗净、切成小块，称取 200g 加入 1000mL 蒸馏水，煮沸 20min，用纱布过滤，滤液补足水至 1000mL，再加入糖和琼脂，溶化后分装， 121℃灭菌 20min另外，用少量乙醇溶解 0.1g 氯霉素，加入 1000mL 培养基中，分装灭菌后可用于食品中霉菌和酵母菌计数、分离11．PY 基础培养基! V- O- P- C) I6 `* K! f成分：蛋白胨 0.5g，酵母提取物 1.0g，胰酶解酪胨 (Trypticase) 0.5g，盐溶液Ⅱ 4.0mL，蒸馏水 1000mL0 p+ G* z* D8 t; T" [1 X3 h$ t" G' }3 F+ X+ Y盐溶液Ⅱ成分：CaCL2 0.2g，MgSO4.7H2O 0.48g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，NaHCO3 10.0g，NaCL 2.0g，蒸馏水 1000mL。

3 B3 Q# W p; ?8 V9 ]制法：加热溶解，分装后 121℃灭菌 20min12．甘露醇琼脂培养基（MSA）1 i! ?- X5 M3 ^: Z# Z# P" q3 q0 `5 l8 {& \成分：牛肉浸膏 1g，月示胨 NO.3（Difco）10g，D-甘露醇 10g，NaCL 75g，琼脂约 13g，酚红 0.025g，水 1000mL，pH7.2~7.6! w! y. l4 c8 p4 E" X% B% K ^( D3 Z9 j- R8 F5 C, ~' [制法：按量将各成分（酚红除外）混合，加热使完全溶解，调 pH 至 7.4±0.2加 1%的酚红溶液 2.5mL，混匀121℃高压灭菌 15min( {# K p$ X4 o& N# d. S13．高氏一号（淀粉琼脂）培养基（主用于放线菌、霉菌培养）5 g& u& S2 _ R! l可溶性淀粉 20g，KNO3 1g，NaCL 0.5g，K2HPO4 0.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，FeSO4.7H2O 0.01g，琼脂 20g，蒸馏水 1000mL，pH7.2~7.4，121℃灭菌 20min。

r W! o0 g$ Q$ {" C# N14．淀粉铵盐培养基 （主要用于霉菌、放线菌培养）. C o4 W- V! e3 l6 c* j6 @1 c3 L4 z可溶性淀粉 10g， （NH4）2SO4 2g，K2HPO4 lg，MgSO4.H2O lg，NaCL 1g，CaCO3 3g，蒸馏水 1000mL，pH7.2~7.4，121℃灭菌 20min若加入 15~20g 琼脂即成固体培养基@4 J4 O# I( |7 B z/ ?7 h15．麦氏培养基（醋酸钠琼脂培养基）9 p3 m" l- s; p1 c( G/ w, ~; P! |% N+ e葡萄糖 1.0g，KCL 1.8g，酵母汁 2.5g，醋酸钠 8.2g，琼脂 15g，蒸馏水 1000mL，pH 自然，0.7kg/cm2 灭菌 30min/ z# G8 n' n9 V4 C# c/ T. ^" u/ Y! v& [16．高盐察氏培养基(用于霉菌和酵母菌计数、分离用 )硝酸钠 2g，磷酸二氢钾 1g，硫酸镁（MgSO4 7H2O）0.5g，氯化钾 0.5g，硫酸亚铁0.01g，氯化钠 60g，蔗糖 30g，琼脂 20g，蒸馏水 1000mL，115℃灭菌 30min。

2 a3 A: f$ S" b5 g注：①分离食品和饮料中的霉菌和酵母可选用马铃薯-葡萄糖- 琼脂培养基和/ 或孟加拉红培养基②分离粮食中的霉菌可用高盐察氏培养基 N1 @# l" u' A2 n& V' g" H2 X0 H. D4 `; J& c& h# i17．糖、醇类发酵基础培养基 0 u# b% l; [: ?& A I' P0 Q' C6 N（1）一般细菌常以休和利夫森二氏培养基: b; d! p1 C- ?% [2 }5 }蛋白胨 5g，NaCL 5g，K2HPO4 0.2g，糖醇(葡萄糖或其它糖、醇)10g ，琼脂 5~6g，1％溴甲酚紫（溴百里香草酚蓝）3mL，蒸馏水 1000mL，pH7.0~7.2，分装试管，培养基高度约4.5cm，115℃灭菌 20min6 r2 `3 H; x {! Z0 e（2）芽孢菌培养基(NH4)2HPO4 1.0g，KCL 0.2g，MgSO4.7H2O 0.2g，酵母膏 0.2g，琼脂 5~6g，糖或醇类10.0g，蒸馏水 1000mL，溴甲酚紫（0.04％）15mL ，pH7.0~7.2，分装试管，培养基高度约4~5cm，112℃ 灭菌 30min。

6 Q7 b( B/ X& K' @( U9 |% y0 P- I* N- u5 {, B! i（3）乳酸菌培养基* i. S+ m0 z! x4 [3 `- r. ~5 v) f% K4 l. L$ b% d7 `# m/ ?蛋白胨 5g，牛肉膏 5g，酵母膏 5g，吐温 80（Tween 80）0.5mL，糖或醇 10g，琼脂 5~6 g，蒸馏水（自来水）1000mL，加入 1.6％溴甲酚紫溶液约 1.4mL以上调 pH6.8~7.0，分装试管，112℃灭菌 30min K$ q- |6 _: y, ~! {9 Y18．硝酸盐培养基（硝酸盐还原试验用）' E, |0 R, Z/ o* u) W蛋白胨 5.0g，KNO3 0.2g, 蒸馏水 1000 mL，pH7.4，每管分装 4~5mL，121℃灭菌15~20min F2 ~" N1 X4 c* P8 W$ I" M" c. m* k: C' v" r, J吲哚实验培养基：1％胰蛋白胨，调 pH7.2～7.6，分装 1/3~1/4 试管，115℃灭菌 30min19．硫化氢试验（纸条法）培养基蛋白胨 10g，NaCL 5g，牛肉膏 10g，半胱氨酸 0.5g，蒸馏水 1000mL，pH7.0 ～7.4，分装试管，每管液层高度 4~5cm，112℃灭菌 20~30min。

另外将普通滤纸剪成 0.5~1cm 宽的纸条，长度根据试管与培养基高度而定用 5％~10％的醋酸铅将纸条浸透，然后用烘箱烘干，放于培养皿中灭菌备用 l$ @: N& s( 。