山楂叶中黄酮类提取工艺与质量标准的研究.doc

山楂叶中黄酮类提取工艺与质量标准的研究山楂属(Crataegus L)为蔷薇科(Rosaceae)苹果亚科(Maloideae)植物 全球共有250多种，我国约有16种，其中以山里红｛Crataegus pinnatifida Bge. var. major N. E. Br.)、山楂(Crataegus pinnatifida Bge.) 和野山楂｛Crataegus cuneata Sieb.&Zucc.)最为多见山楂叶主要化学 成分黄酮类有降压、增加冠脉血流量、降血脂、耐缺氧、强心、改善 血液流变学、抗心肌缺血、抗心律失常等作用,临床主要用于治疗冠 心病、心绞痛等经查阅相关文献所知，多以芦丁的含量作为山楂叶 质量评价标准本实验以山楂叶中总黄酮为研究指标，以芦丁为对照 品，对山楂叶总黄酮的提取工艺及质量控制方法进行了研究1仪器与材料1.1仪器紫外分光光度计、干燥箱、电子分析天平、抽滤装置、冷凝管、铁架 台、旋转蒸发仪、层析缸1.2材料山楂叶、芦丁标准品、聚酰胺板、乙醇、NaOH、NaNCh、Al( NO3)3、A1C132山楂叶中总黄酮的提取2.1正交试验方案采用正交实验设计对乙醇提取工艺进行筛选和优化，考察乙醇浓 度、浸提温度、浸提时间以及料液比(山楂叶质量与加入乙醇体积之 比)四个因素对工艺的影响，以山楂叶总黄酮量为指标，建立L9(34)iE水平A乙醇浓度 B浸提温度C浸提时间/hD料液比 g/ml/%/%1505011:10260601.51:153707021:20表2正交试验方案实验号ABCD总黄酮量/g111112122231333421235223162312731328321393321K1K2K3因素水平设计交试验表。

表12.2山楂叶总黄酮提取实验准确称取5.0g山楂叶粉末置于圆底烧瓶中，按正交试验表加入相 应浓度和体积的乙醇，回流提取相应时■间，趁热减压抽滤,滤渣加50% 乙醇洗涤，过滤，合并清液后减压浓缩至滤液低于80ml,加60%乙醇定 容于100ml容量瓶中，作为待测液3山楂叶总黄酮含量测定3.1标准曲线的制备将芦丁于120C干燥至恒重，精密称取芦丁标准品9.28mg,用60% 乙醇溶解，定容于50ml,得浓度为0.186mg/ml芦丁标准液准确吸取芦丁标准液0, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0ml于25ml容量瓶中, 每瓶加去离子水至6ml,加5% NaNO2溶液1ml,摇匀，放置6min 后加入10% A1(NO3)3溶液ImL摇匀，放置6min后加入4%NaOH溶 液10ml,去离子水定容，摇匀，15min后于500nm处测定吸光度A, 得芦丁体积与A之间的回归方程3.2山楂叶总黄酮的测定准确吸取待测液0.4ml于25ml容量瓶中，步骤同上，测定其在 500nm处吸光度，计算每组山楂叶中总黄酮含量算出正交试验中的 K和R值，从而得出最佳工艺4验证实验根据最佳工艺，做验证实验，提取、含量测定方法如上。

5 TLC鉴定吸附剂：聚酰胺板展开剂：乙醇-甲酸-水(4:0.01:1 v/v/v)以最佳工艺提取出的溶液为供试品溶液，另取配好的芦丁对照品溶 液各2-3 U1,分别点于同一聚酰胺板上，以乙醇-甲酸-水(4:0.01:1 v/v/v)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，热风吹干, 置紫外光灯(365nm)下检视参考文献】1国家药典委员会.中华人民共和国药典(2010版)一部[M].中 国医药科技出版社,20102周巧霞，顾明，等.不同方法提取的山楂叶总黄酮含量的测定[J]. SU ZHOU UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCE, 2002, 22(2)3李宏伟，张守勤，等.不同生长期山楂叶中黄酮类化合物的含量 测定[J].时珍国医国药,2007, 18(4)4王威，王春利.从山磕叶中提取黄酮类物质及其鉴定方法[J].食 品科学，1994, 35郭永学，李楠.大孔吸附树脂纯化山楂叶总黄酮工艺研究[J]・中 成药,2006, 28(1)6张文莉，高敏，等.分光光度法测定山楂叶提取物中总黄酮的含量[J],中华中医药学刊,2011,29(5)7张兰杰，辛广，等.三波长-分光光度法测定山楂叶、果总黄酮的含量[J].食品与生物技术学报,2009,28(4)8山楂叶和山楂果中总黄酮的提取与检测方法[J]・职业与健康,2007,23(10)9张元富，刘志辉，等.山楂叶中黄酮类化合物的提取工艺研究[J]. 制剂技术,2009, 18(8)10刘荣华，邵峰，等.山楂叶中总黄酮的含量测定方法研究[J]・江 西中医学院学报,2007, 19 (6)11王孟歌，田宝娟，等.山楂叶中总黄酮含量的测定[J]・光谱实验 室,2006, 23(4)12张黎明，杨鑫，等.山楂叶总黄酮的水浸提和纯化工艺研究[J]. 食品研究与开发,2010,31(1)13李冬菊，林阳.山楂叶总黄酮的提取及其鉴别[J]・辽宁中医杂志, 2003,7(30)14李志霞，吕德国，等.山楂叶总黄酮提取的主要影响因素研究[J]. 北方园艺,2010(5):24〜2615付起凤，康毅华，等.正交法优化山楂总黄酮的提取工艺研究[J]. 中医药信息,2010, 27(3)16邹凤玉，于晶，等.正交实验法优选山楂叶醇提工艺[J].时珍国 医国药,2006, 17(8)17李冶姗，安彩贤.正交试验法优选葛根与山楂叶中总黄酮的提取 工艺[J].中国药师,2004,7 (2)18何改.山磕叶黄酮类化合物最佳提取工艺研究[J].食品研究与开 发，2002, 23 (1)19邵峰，刘荣华，等.山楂叶总黄酮提取纯化工艺研究[J].中成药,2008, 30(9)。