
间接血凝试验实验报告间接血凝试验实验报告精选八篇.docx
22页间接血凝试验实验报告间接血凝试验实验报告精选八篇 篇一 :间接血凝试验间接血凝试验血凝试验(hemagglutinationtest)是红细胞凝集试验的简称间接血凝试验是以红细胞作为载体的间接凝集试验,在临床检验中应用广泛,下面简述其操作过程间接血凝试验示意图(一)载体红细胞是大小均一的载体颗粒,最常用的为绵羊、家兔、鸡的红细胞及O型人红细胞新鲜红细胞能吸附多糖类抗原,但吸附蛋白质抗原或抗体的能力较差致敏的新鲜红细胞保存时间短,且易变脆、溶血和污染,只能使用2~3天为此一般在致敏前先将红细胞醛化,可长期保存而不溶血常用的醛类有甲醛、戊二醛、丙酮醛等红细胞经醛化后体积略有增大,两面突起呈圆盘状醛化红细胞具有较强的吸附蛋白质抗原或抗体的能力,血凝反应的效果基本上与新鲜红细胞相似如用两种不同醛类处理效果更佳也可先用戊二醛,再用鞣酸处理醛化红细胞能耐60℃加热,并可反复冻融不破碎,在4~C可保存3~6个月,在—20℃可保存1年以上二)致敏致敏用的抗原或抗体要求纯度高,并保持良好的免疫活性用蛋白质致敏红细胞的方法有直接法和间接法直接法只需在低pH,低离子浓度下,用醛化红细胞直接吸附即可。
间接法则需用偶联剂将蛋白质结合到红细胞上常用偶联剂为双偶氮联苯胺(bidiazotizedbenzidine,BDB)和氯化铬前者通过共价键,后者通过金属阳离子静电作用使蛋白质与红细胞表面结合而达到致敏的目的三)血凝试验血凝试验可在微量滴定板或试管中进行,将标本倍比稀释,一般为1:64,同时设不含标本的稀释液为对照孔在含稀释标本1滴的板孔(或试管)中,加入0.5%致敏红细胞悬液l滴,充分混匀,置室温1~2h,即可观察结果凡红细胞沉积于孔底,集中呈一圆点的为不凝集(一)如红细胞凝集,则分布于孔底周围根据红细胞凝集的程度判断阳性反应的强弱,以+十凝集的孔为滴度终点血凝反应强度示意图…… …… 篇二 :口蹄疫正向间接血凝试验操作要点口蹄疫正向间接血凝试验操作要点免疫抗体检测是科学掌握动物免疫接种疫苗后抗体产生和消长变化的有效方法之一口蹄疫正向间接血凝试验就是用口蹄疫抗原检测未知血清中是否含有口蹄疫抗体的血清学检测方法之一近年来,此方法经常用于牲畜接种口蹄疫疫苗后能否产生抗体或抗体滴度能否达到免疫保护,以利于指导畜牧业生产一、原理用已知血凝抗原检测未知血清抗体的试验,称为正向间接血凝试验,亦称间接血凝。
抗原与其对应的抗体相遇,在一定条件下形成抗原—抗体复合物但这种复合物的分子团很小,肉眼看不见将抗原吸附(致敏)在红血球表面,再与抗体结合,红血球便出现凝集现象,不仅肉眼能看见,而且反应的敏感性大大提高口蹄疫正向间接血凝试验就是将口蹄疫纯化病毒致敏到绵羊红血球表面,制成口蹄疫血凝抗原,用于检测动物血清中的口蹄疫抗体水平二、适用范围主要用于检测口蹄疫疫苗接种动物后血清抗体效价三、器材1、 96孔110~120度V型医用血凝板,与血凝板大小相同的玻板2、 微量移液器与吸头3、 口蹄疫血凝抗原(口蹄疫正向血凝诊断液)4、 口蹄疫对照阴性血清5、 口蹄疫对照阳性血清6、 稀释液7、 待检血清(被检血清)四、试验方法1、加稀释液在血凝板上1~6排的1~9孔;第7排的1~4孔;第8排的1~12孔各加稀释液50微升2、稀释待检血清取1号待检血清50微升加入第1排第1孔,混匀(避免产生过多的气泡),取出50微升移入第2孔,混匀后取出50微升移入第3孔??直到第9孔混匀后取出50微升丢弃此时第1排1~9孔待检血清的稀释度(稀释倍数)依次为:1:2,1:4,1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256,1:512。
取2号待检血清加入第2排;取3号待检血清加入第3排??均按上法稀释,注意!每取一份血清时,必须更换吸头一个…… …… 篇三 :猪瘟正向间接血凝试验猪瘟、口蹄疫间接血凝操作方法猪瘟、口蹄疫间接血凝操作方法猪瘟间接血凝操作方法一、 试验材料1、 6孔110°-120°微量血凝板2、 10-100微升可调微量移液器3、 塑料咀4、 猪瘟间接血凝抗原(猪瘟正向血凝诊断液),每瓶5毫升,可检测血清25-30头份5、 阳性对照血清,每瓶2毫升;阴性对照血清每瓶2毫升6、 稀释液每瓶10毫升7、 待检血清每份0.2-0.5毫升(56℃水浴灭活30分钟)二、 操作步骤1、 检测前,应将冻干诊断液每瓶加稀释液5毫升浸泡7-10天后方可应用2、 稀释待检血清:在血凝板上的第一孔――第六孔各加稀释液50ul加入第一孔,混匀后从中取出50ul加入第二孔,依此类推直至第六孔混匀后丢弃50ul,从第一孔――第六孔的血清稀释度依次为1:2、1:4、1:8、1:16、1:32、1:643、 稀释阴性血清和阳性血清:在血凝板上的第11排第1孔加稀释液60ul,取阴性血清20ul混匀后取出30ul丢弃此孔即为阴性血清对照孔。
在血凝板上的第12排第1孔加稀释液70ul,第2孔――第7孔各加稀释液50ul 吸取阳性血清10ul,加入第1孔混匀并从中取出50ul加入第2孔……直到第7孔混匀并丢弃50ul该孔的阳性血清稀释度则为1:5124、 在血凝板上的第1排第8孔加稀释液50ul即为稀释液对照孔5、 滴加抗原:第1排1-8孔和对照孔各加血凝抗原25ul立即置微量震荡器上震荡1分钟,或用手摇匀室温下静置1.5-2小时6、 判定方法和标准:先观察阴性血清对照好和稀释液对照孔,红血球应全部沉入孔底,无凝集现象(-)或呈阳性(+)的轻度凝集为合格;阳性血清对照应呈(+++)凝集为合格在以上3孔对照合格的情况下,观察待检血清各孔的凝集程度,以呈“++”凝集的待检血清最大稀释度…… …… 篇四 :动物寄生虫实验1动物寄生虫病学实验》课程教学大纲课程编号:021638 学时:30学时一、课程的性质、地位和任务动物寄生虫病学是研究寄生于家畜、家禽及特种经济动物的各种病原性寄生虫及其所引起的疾病的一门学科,它是高等农业院校动物医学等专业的必修、主干专业课程之一动物寄生虫病学实验是动物寄生虫病学的配套课程,是动物医学、动物检疫检验等专业的专业课。
本课程的主要先修课为动物学、动物解剖与组织学、动物生理学、动物病理学、兽医药理学、兽医临床诊断学实验等实验课程 本课程的主要教学目标是让学生掌握寄生虫的形态构造、病理特征及动物寄生虫病学实验室诊断操作技术等二、课程教学基本要求通过本课程的学习,学生应掌握的知识与技能:1、熟悉各类寄生虫的形态构造及常见虫种的形态特征 7 -2、能识别常见寄生虫的中间宿主3、掌握畜、禽主要寄生虫病的病理特征4、掌握动物寄生虫病学实验室诊断方法的基本操作技术及应用等 三、课程考核本课程的考核包括平时每次实验操作和实验报告以及期末考核期末考核有笔试及实验操作组成,综合评定成绩不和格者必须重修本课四、实验纲要1、动物蠕虫病粪便检查法(一) (3学时)实验目的及要求:掌握粪便中蠕虫虫体和虫卵检查法的操作技术2、动物蠕虫病粪便检查法(二) (3学时)- 8 -实验目的及要求:掌握虫卵计数法及幼虫检查法的技术操作3、动物吸虫及其中间宿主的形态观察(一) (3学时)实验目的及要求:熟悉吸虫的基本构造、吸虫的形态构造特点4、动物吸虫及其中间宿主的形态观察(二) (3学时)实验目的及要求:掌握寄生于家畜、家禽的形态构造特点。
5、 动物绦虫蚴及其成虫的形态观察 (3学时)实验目的及要求:通过实习熟悉绦虫蚴的基本构造…… …… 篇五 :溶菌酶的提纯结晶和活力测定.实验报告doc溶菌酶的提纯结晶和活力测定姓名: 学号:班级: 指导老师:一、实验前言1.实验背景溶菌酶(lysozyme)是一种能够水解细胞壁成分中N- 乙酰胞壁酸与N- 乙酰葡萄糖胺之间的β- 1,4 糖苷键的酶,被广泛应用于医药、食品工业、生物工程等方面,现从鸡蛋蛋清中提取溶菌酶已达到工业化生产水平蛋清中的溶菌酶含量越高,酶活力越强,越有利于鸡蛋的保存,因此测定鸡蛋蛋清中的溶菌酶对我国溶菌酶生产、禽蛋产品加工有重要的指导作用,也为蛋品质评定提供了一个重要参数活力测定的基本原理是用一种细菌悬液作为基质,加入待测标本后保持一定时间,如样品中含有溶菌酶则细菌被溶解,即其细胞壁不溶性多糖变成可溶性粘肤测定方法很多:如平皿测定法、光电比浊法、粘度测定法、分解产物测定法(因为底物往往过量,通常不用底物)、化学滴定法、分光光度法及同位素技术,其中以平皿测定法和比浊法最为常用溶菌酶分布很广,而且不是单独存在的,往往是和许多因子共同作用、相互协调同时,可以直接或间接地通过酶的分解产物而起作用。
在这里许多问题正处于摸索阶段,有些方面通过特定的实验,预测其应用而这些特定的实验往往对某种或某一个动物而言,还有其局限性未定论的问题很多,许多应用尚未大面积使于临床,但是溶菌酶必将越来越引起人们的重视,特别是其广布于人体,在医药、科研方面的作用尤为重要.(l)抗菌溶菌酶不但作用于革兰氏阳性细菌,而且它作为一种非特异性免疫,即对所有的病原微生物都有一定程度的抵抗力,没有特殊的选择性,对身体的自然防御起很大作用.如鼻粘膜,口腔中含有一些溶菌酶,临床用于治疗副鼻窦炎和龋齿;眼泪和白血球中溶菌酶含量最高,因此在干燥综合症诊断上,认为泪液溶菌酶值的下降可以提供敏感可靠的指标,并能反映泪腺受损程度;在白血病患者的尿中,含有大量溶菌酶,临床上可有效地诊断白血病白血球中的溶菌酶在脱颗粒过程中被排列到噬菌体内,噬菌体感染宿主(抗原)后,诱导产生溶菌酶(抗体),这种溶菌酶是噬菌体染色体组,通过细胞壁分解酶和膜多糖分解酶的作用而表现,其主要功能一是使噬菌体产生吸附作用,二是使噬菌体向宿主菌体内注入DNA,溶菌酶在噬菌体侵入宿主菌细胞和溶菌的整个过程中都起着重要作用,此溶菌酶(抗体)和补体共同作用,使某些微生物敏感,因此,溶菌酶可能和噬菌体内其他抗微生物系统有协同作用,主要作用是消化细菌,而不是杀死细菌。
普遍认为,这种白细胞具有抗肿瘤作用和治疗由细菌、病毒引起的炎症以上这种抗原—抗体反应也可以在体外进行溶菌反应,即血清学反应,可解析细菌表层结构和作为研究分子生物学的材料,通过它寻找新酶类,也可用做病毒性传染病的诊断…… …… 篇六 :配血实验输血能够迅速的补充血容量,纠正休克,增强机体供氧能力,增强抗病力,对抢救动物的生命有重要意义然而,输血不当时,往往会引起不良反应,甚至危及动物生命因此只有切实掌握了输血的规律,正确实施才能够达到预期的效果随着社会的发展,宠物已经成为家庭中不可或缺的部分,为了更好的拯救他们于危难之中,作为从业人员必须掌握配血与输血输血的适应症1、输血疗法可适用于各种原因引起的贫血;2、车祸、手术、外伤等引发的大失血;3、剧烈呕吐、腹泻引起的血容量降低;4、各种原因引起的休克;5、血小板和凝血因子缺乏引起的凝血不良;6、白细胞减少症和低蛋白血症等病症7、烧伤时,输血可有效预防休克;输血的作用1、输血可以起到迅速补充循环血量、维持一定的血压、增加血液的凝固性和血红蛋白的浓度、增加血液运输氧的能力以及刺激机体的造血机能、防止休克等作用2、另外对供血者采取相应的免疫后,其血制品对犬细小病毒、犬瘟热可产生特异性的抗病力。
配血试验在临床上,输血前为了保证安全,应做配血试验,根据要求和实验室条件以。












