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测定黄芩中黄芩苷的定性和定量方法 测定黄芩中黄芩苷的定性和定量方法 1.薄层色谱法定性鉴别 薄层色谱法是将相宜的吸附剂或载体涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一匀称薄层,待点样、 绽开后,与相宜的参照物按同法在同板上所得的色谱图比照,用于中药制剂的鉴别该法是黄芩苷常用的定性分析方法,一般采纳吸附薄层鉴定,常用硅胶和聚酞胺作为吸附剂 1.1样品处理适当有效的样品处理可将被测成分黄芩苷从制剂中溶出,还可分别精制纯化样品,必须程度上幸免共存成分的干扰,使定性鉴别过程中显色反响更加清晰明白常用甲醇、乙醇进展提取或萃取 1.2固定相固定相通常用硅胶和聚酞胺在硅胶薄层色谱中,硅胶除对黄芩苷产生物理吸附外,还与黄芩苷的游离酚轻基产生氢键吸附,故易出现拖尾现象,采纳氢氧化钠或醋酸钠制备的硅胶G板可有效改善拖尾现象聚酞胺薄层色谱法利用聚酞胺与黄答普的酚轻基产生氢键吸附的原理进展分别 1.3绽开剂用硅胶薄层色谱鉴定时，依据黄芩苷的极性,绽开剂常含酸或水聚酞胺对黄芩苷的吸附实力较大，需用具有较强极性的绽开剂，常用醋酸 1.4显色剂黄芩苷具有游离的邻二酚轻基，可与金属离子如铝离子、铁离子等发生络合反响而显色，故可用三氯化铝、三氯化铁或通用显色剂硫酸进展显色。

显色反响可采纳在紫外光下视察斑点和喷显色剂相协作的方法2.高效液相色谱法定量分析高效液相色谱法与紫外分光光度法和薄层扫描法相比，具有高效的分别,灵敏的检测和快速的分析的特点，既能用于微量组分的分析测定，又能用于大量的制备分别，是中药成分探究中一种特别重要的分析手段，此时此刻HPLC已成为测定黄芩及其制剂中黄芩苷的主要方法 2.1样品处理黄芩本身含有多种成分，含黄芩的复方制剂化学成分更加困难，进展样品处理可以将黄答首从样品中释放出来，并制成便于分析测定的稳定试样，还可除去杂质、纯化样品,提高含量测定的重现性和精确度，也起到了爱护色谱柱的作用通常用甲醇或乙醇作提取或萃取液，经过一系列分别、纯化，最终用0.45um微孔滤膜滤过如在小儿清肺口服液的质量标准探究，精细吸取样品溶液5.0ml，加甲醇稀释至50ml,混匀，过滤，续滤液作为供试品溶液用HPLC法测定小儿感冒片中黄芩苷的含量样品用70%乙醇超声提取,滤过,滤液置50ml容量瓶中，加70%乙醇至刻度作为供试品 2,2固定相黄芩苷具有羟基，在硅胶柱上干脆进展高效液相色谱分别效果不太好，而用RP一HPLC法分别效果较好现常用固定相是烷基键合相如C8,Cl8键合相,其中又以Cl8最常用。

2.3流淌相流淌相通常以水为根底溶剂，参加必须量的能与水互溶的极性调整剂，常用甲醇、乙腈，因黄芩苷呈弱酸性,为抑制解离在流淌相参加少量的酸如磷酸、醋酸等,能改善峰形更加锋利利于分析亦有将离子对试剂参加含水的流淌相中,用反相离子对色谱法来分析 2.4检测方法黄芩苷有紫外汲取，常用紫外检测器，又以光电二极阵列检测器最常用因黄芩苷在280nm处有最大汲取,通常在280nm左右进展检测 3.药典方法取黄芩苷粉末(通过三号筛)约0.5g,精细称定,置锥形瓶中,加乙醇85ml，加热回流1.5h，放冷，连同沉淀一并移至101ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀用枯燥滤纸滤过，弃去初滤液，精细量取续滤液5ml，置50ml量瓶中，加乙醇至刻度，再精细吸取5ml，置25ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀照分光光度法(药典附录31页)，在275士1nm的波特长测定汲取度，按的汲取系数为673计算,即得所含黄酮以黄芩苷计算 4.微波提取法测定黄芩中黄芩苷的含量4. 1 供试品溶液的制备 取黄芩饮片样品，粉碎( 过 40 目筛) ，精细称定约 0. 15 g，置微波提取罐中，精细参加 30% 乙醇 20 mL，称定质量，微波帮助萃取，5 min 内升温至 120 ℃ ，保温 10 min，取出，冷却至室温，再精细称定，用 30% 乙醇补足减失的质量，过滤，取续滤液 1 mL 置 10 mL 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。

4. 2 参照品溶液的制备 取黄芩苷参照品适量，精细称定，加甲醇制成每 1 mL 含 60 μg 的溶液，摇匀，即得4. 3 色谱条件 Dikma Diamonsil C18色谱柱( 4. 6mm × 150 mm，5 μm) ，流淌相甲醇-水-磷酸 ( 47 ∶ 53 ∶0. 2 ) ， 检 测 波 长 280 nm， 柱 温 30 ℃ ，流速 1 mL·min－ 1 4. 4 样品测定 取黄芩样品，按 2. 1 供试品溶液的制备项下制备，按 2. 3 色谱条件进展测定，计算黄芩苷的含量 体会和疑问：微波提取法比药典法大幅度缩短了提取时间，由加热3h缩短为微波提取15 min，微波法比药典法提取时间缩短了 94. 4% ，因此微波提取法可用于黄芩中黄芩苷的含量测定为什么药典中不选用微波提取法进展推广？ 本文来源：网络收集与整理，如有侵权，请联系作者删除，谢谢！第4页 共4页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页第 4 页 共 4 页。