
常用培养基的制备.docx
4页本文格式为Word版,下载可任意编辑常用培养基的制备 常用培养基的制备 技能训练3 常用培养基的制备 常用培养基的制备 实训目标熟谙培养基制备的根本程序 会制备常用的培养基 常用培养基的制备 仪器材料高压蒸气灭菌器、电热枯燥箱、电炉、天平、 量筒、漏斗、试管、培养皿、烧杯、三角烧瓶、 养分琼脂培养基(或伊红美兰琼脂培养基、三 糖铁琼脂培养基、SS琼脂培养基、麦康凯琼脂 培养基)等 常用培养基的制备 方法步骤 (一)养分琼脂培养基 (二)血液琼脂培养基 (三)肉汤培养基 (四)半固体培养基 常用培养基的制备 (一)养分琼脂培养基计算 称量 溶化 倒平板或倒试管 灭菌 无菌检验 备用 常用培养基的制备 1.计算:根据养分琼脂培养基的说明书了解养分琼脂粉与水的比 例,一般是1000 ml蒸馏水中应加养分琼脂粉31.3g,再根据 培养基的需要量确定养分琼脂粉的用量 养分琼脂粉的量=31.315n/1000 (g) 其中: 15代表一个平板需要养分琼脂约15 ml; n代表要做的培养基平板的数量 常用培养基的制备 2.称量:用普遍天平切实称量出养分琼脂粉的量,用量筒量出相 应的 蒸馏水的量,要尽量切实。
常用培养基的制备 3.溶化:将养分琼脂粉和蒸馏水倒入搪瓷缸中,于电炉上加热溶 化,边加热边搅拌,沸腾时立刻从电炉上拿下,等泡沫 消散后再放在电炉上加热,留神不能让琼脂溢出,煮沸 2—3次 常用培养基的制备 4.倒平板或倒试管分装:若做平板培养基应倒于培养皿中,每板约15ml左右, 以刚好笼罩平皿底为易 若做斜面培养基应倒入试管中,量为试管的1/3 常用培养基的制备 5.灭菌:用高压灭菌器灭菌将平板培养基整齐地平放入 高压灭菌器的内筒中,将试 管口盖上棉塞或橡胶塞,用 纸包扎好,直立放入内筒中, 在121.3℃灭菌20-30min 灭菌完毕后,将平板培养基 拿出平放于桌面,凝固前勿 动;将试管培养基摆成斜面, 凝固前勿动 常用培养基的制备 6.无菌检验: 随机抽取几个平板或试管培养基于温箱中培养24小 时,若无菌 生长那么为合格 常用培养基的制备 7.备用:中 保 存 备 用 冰 箱 , 在 基 和 0 试 4 管 养 培 板 入 平 放 的 基 格 养 合 培 将 ℃ 常用培养基的制备 (二)血液琼脂培养基将灭菌的养分琼脂冷至45~50℃,以无菌操 作,参与5%~10%的无菌血液(或脱纤维 血),然后倾注平皿或分装试管制成斜面。
常用培养基的制备 (三)肉汤培养基1.成分 牛肉膏3~5g,蛋白胨10g,氯化钠5g,蒸馏水 1000ml 2.制法 将牛肉膏、蛋白胨、氯化钠加蒸馏水后,加热 溶解矫正pH至7.4~7.6,过滤分装置高压蒸气灭 菌器内,121.3℃灭菌20min即成 3.用途 可供一般细菌生长,同时也是制作一般培养基 的根基原料供养分要求较高的细菌分开培养,亦可 供溶血性的查看和保存菌种 常用培养基的制备 (四)半固体培养基 肉汤培养基中参与0.3%~0.5%琼脂粉制成, 用于菌种的保存或查看细菌的运动性 常用培养基的制备 课后作 业1.写出实习报告; 2.掌管普遍养分琼脂培养基的制备过程 — 4 —。
