细胞工程复习题(新版).docx

《细胞工程》复习题一、选择题：1. 在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的选项是(B)结果是相同的A. 杂种细胞的形成过程基本相同操作过程中酶的作用相同0.诱导融合的手段相同单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是(C)① 淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞② B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞③ 杂交瘤细胞A. ②④B.①③⑤C.①②③④D.②③动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的有体温相似⑤需要02,不需要C02⑥C02能调节培养液PHA、①②③④⑤⑥B、①②③④C、①③④⑤⑥D、①②③④⑥39. 在动物细胞培养的有关表达中正确的选项是：（B）A、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞分泌蛋白B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C、细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡过程中D、培养至50代后传代细胞遗传物质没有发生改变40. 动物细胞工程技术的基础是A.动物细胞融合B.单克隆抗体二、是非题植物体细胞杂交能够在一定程度上克服远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。

V)1. 秋海棠的叶、马铃薯的块茎'成熟的花粉、木质部中的导管细胞都能作为植物组织培养的材料(X)细胞的全能性是指生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能但是不是生物体的每一个细胞都要包含有该物种所特有的全套遗传物质〔X)2. 愈伤组织的形成是离体植物细胞分裂的结果〔")组织的形成是离体植物细胞愈伤脱分化的结果(X)11. 细胞工程操作主要对象是细胞(v)细胞工程研究的目的是改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品V)12. 细胞工程理论基础是细胞的全能性(J)单克降抗体技术是植物细胞工程技术X)13. 细胞融合技术是指把两个或多个不同的细胞在融合剂的作用卜，其细胞膜发生分子重排，导致细胞合并，染色体等遗传物质重组融合成一个细胞的技术J)14. 单克隆抗体有产虽高，特异性强，灵敏度高的优势，主要应用在临床诊断和作为药物载体治疗肿瘤.(V)细胞核移植是指将一种细胞的细胞核转移到另一种去掉了细胞核的细胞质内，然后将不同来源的细胞核和细胞质融合组成新的细胞J)三、填空题：1. 由A、B两种细胞人工融合成C细胞的过程中，常用PEG(聚乙二醇）（或灭活的病毒）作为诱导剂融合过程包括膜融合和核融合两方面,D细胞称为细胞。

2. 假设由D细胞培育成植株，可用一植物细胞培养—技术，这一培养过程要经过脱分化和再分化两个阶段目前，植物体细胞杂交还有许多理论和技术问题没有解决，如杂种植物还不能按照人们的需要表现出亲代的优良性状，从遗传学角度分析，其内在因素很可能是o如需制备单克隆抗体，骨髓瘤细胞还应满足两个独特的性质:① 为了防止杂交瘤细胞分泌的抗体不纯,骨髓瘤细胞系自身不能具有产生抗体的能力;②用于融合的骨髓瘤细胞体内喋吟核昔酸合成的补救途径必须丧失，即磷酸核糖转移酶或嗜喋核昔酸激酶的活力丧失3. 细胞融合的方法有化学法，如〔PEG诱导融合）,物理法，如脉冲）,生物法，如（仙台病毒诱导细胞融合法）人工种子的结构包括人工种皮外层、人工胚乳、胚状体或芽4. 干细胞的来源分为胚胎干细胞）和成体干细胞两大类糖在植物组织培养中是不可缺少的，作用表达在碳源、能源、维持渗透压5. 常用的生长素有_NAA、IAA、2,4-D、__等，常用的细胞分裂素—6-BA、KT、ZT植物细胞表现出全能性的必要条件是细胞离体、一定的营养物质、激素和其他外界条件植物单细胞培养的方法有：平板培养；看护培养；微室培养；双层滤纸培养动物细胞的融合方法主要有以下几种6. 植物体内的细胞为什么没有表现出全能性，而是分化成不同的组织器官，原因是基因在特定时间和空间条件下选择性表达的结果。

19. 细胞工程的技术手段包括细胞融合技术、细胞拆合技术、染色体导入技术、基因转移技术、细胞器移也技术、胚胎移梢技术、细胞与组织培养技术20. 细胞工程的基本操作有无菌技术、细胞培养技术、细胞融合技术四、名词解释：1.细胞的全能性：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能，细胞的这种特性2. 人工种子：任何一种经人工种皮包被或裸露的，具有形成完整植株能力的繁殖体均可称之为人工种子3. 细胞融合：也称体细胞杂交，又叫无性杂交，是指利用现代科学技术，分别取出两种生物的单个细胞，然后使这两种不同的生物细胞在同一培养器中，用无性的人工方法促使两者互相凝集并发生细胞之间的融合，进而导致基因重组，产生能同时表达两个亲本细胞有益性状的细胞杂交技术4. 花粉培养：是将花粉从花药中别离出来，接种到人工培养基上进行培养，以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的过程5. 花药培养：是将花粉发育至一定阶段的花药接种到人工培养基上进行培养，以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的技术6. 原生质体培养：是将植物的体细胞经过纤维素酶等处理后去掉细胞壁，获得的原生质体在无菌培养基上上长、分裂，最终长成植株7. 无血清培养基由基础培养基和替代血清的补充成分组成。

即：在基础培养基中补充各种必需因子，如激素、生长因子、结合蛋白、贴壁和扩展因子等8. 单克隆抗体：如果把能分泌某种特异抗体的一个B型淋巴细胞别离出来，通过纯种培养，所产生的抗体则只有一种，可以特异地和体内一种抗原结合，这种单一的特异性抗体即为单一B细胞克隆抗体，即单克隆抗体，简称单抗9.9. 接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止,数量不再增加五、问答题：1. 什么是细胞的全能性?为什么？什么细胞的全能性最强？细胞的全能性是指生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能原因是生物体的每一个细胞都要包含有该物种所特有的全套遗传物质受精卵的全能性最强其次是生殖细胞，再次是体细胞为什么运用植物组织培养技术能把植物离体器官、组织或细胞培养成完整植物体？科学研究说明，当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株科学家用植物组织培养的方法，己经把许多种植物的离体的器官、组织或细胞，培养成了完整的植物体2. 表现全能性的基础和条件基础：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传信息，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。

条件：①离体提供营养物质② 激素其他适宜条件〔如温度等）3. 萝卜根细胞培养产生出完整植株，克隆羊“多莉”的诞生说明了什么？高度分化的植物细胞仍然有发育成完整植株的能力；高度特化的动物细胞的细胞核仍然有全能性受精卵的全能性最高；卵细胞仍具有较高的潜在全能性；体细胞的全能性比生殖细胞低的多4. 决定植物细胞脱分化、再分化的关键因素是什么？影响脱分化的一个重要因素是植物激素当细胞分裂素与生长素共同使用时，能强烈促进愈伤组织的形成，而两者不同的浓度配比在再分化过程中，分别对诱导根或芽的产生起关键作用当细胞分裂素与生长素浓度比高时，有利于芽的发生；浓度比低时，有利于根的发生5. 胚状体是怎样形成的？培养胚状体有何意义？愈伤组织的形态发生主要有不定芽方式和胚状体方式两种而后者需要在愈伤组织形成后，对其进行处理，形成分散的单个细胞，再诱导其分化出具有胚芽、胚轴、胚根的胚状体，进而发育成完整植株诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构，包裹上人造种皮.制成人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题6. 如何大量生产单克隆抗体？利用B淋巴细胞产生抗体的功能；利用肿瘤细胞无限增殖的特性；利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有B淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞；利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞。

7. 制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巳细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？哺乳动物感染抗原后，其体内会形成相应的B淋巴细胞，B淋巴细胞能分泌相应的抗体凝聚或杀死这些抗原动物在免疫反应的过程中，每一种B淋巴细胞能分泌一种特异性抗体，要想获得大量的特异性抗体，必须使能分泌该单一抗体的B淋巴细胞大量增殖B淋巴细胞具有产生单一抗体的能力，但不能在体外增殖；骨髓瘤细胞是一种癌细胞，它能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体因此，把一种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，产生杂交瘤细胞，它会兼有两个亲本细胞的特性——在体外培养条件下能不断增殖，同时能产生出某种特异性的抗体8. 一个成功的悬浮细胞培养体系应满足什么样的条件？(1) 悬浮培养物分散性良好，细胞团较小(2) 均一性好，细胞形状和细胞团大小大致相同3) 细胞生长迅速，悬浮细胞的生长量一般2〜3天甚至更短时间便可增加一倍9. 什么是HAT培养基？单克隆抗体制备过程中利用HAT培养基选择杂交瘤细胞的原理是什么？IIAT是含一定浓度次黄噂吟〔II)、氨基喋吟(A)及胸腺嚅嚏核甘〔T)的一种选择性培养基DNA合成途径有两种：从头合成和补救途径。

免疫牌细胞没有培养特性，不能存活，瘤细胞从头途径被A阻断，自身是HPRT-或(TK-),补救途径被阻断，杂交瘤细胞可以通过融合的脾细胞弥补瘤细胞缺陷，从而在HAT培养基上存活10. 动物细胞培养有什么特点?动物细胞无细胞壁，多数动物细胞需附着在固体或半固体外表才能生长；动物细胞培养除了需要与微生物、植物细胞一样的培养基成分外,还需要血清成分，特别需要动物激素的存在；动物细胞培养对环境更敏感，培养条件的控制更为严格；反应器要适应无菌状态高密度、长时间培养7、何谓细胞工程？简述细胞工程的技术细胞工程操作的主要对象有哪两大类细胞？•细胞工程：是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过某种工程技术手段，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术细胞工程的技术包括：细胞融合技术、细胞拆合技术、基因转移技术、细胞器移植技术、胚胎移植技术、细胞与组织培养技术、染色体导入技术，从细胞结构的不同层次对细胞进行遗传操作细胞工程操作的主要对象有原核细胞如细菌、放射菌等细胞和真核细胞如酵母、动植物等细胞两大类简述植物细胞的培养特性〔1)植物细胞较微生物细胞大得多，具有纤维素细胞壁。

2)培养过程生K速度缓慢，易受微生物污染、需要用抗生素〔3)在细胞生长的中期和对数期容易凝聚成直径达350-4(X)um的团块，悬浮培养比较困难4) 培养时需要供氧，培养液粘度较大，不能耐受强力通风搅拌5) 细胞具有群体效应、无锚地依赖性和接触抑制性6) 细胞培养产物多数滞留于细胞内，产量较低7) 培养过程具有结构、功能上的全能性A. 诱导融合的方法完全相同B.所用的技术手段完全相同C.所采用的原理完全相同D.都能形成杂种细胞2. 单克隆抗体是指〔C)单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体A. 单个B淋巴细胞增殖产生的抗体单个杂交瘤细胞增殖产生的抗体B. 单个抗体通过克隆化，产生大量抗体将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是(多项选择)(AC)B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖A. B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体B. 骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖，形成细胞群其原因是(D)。