康欣口服液质量标准的改进.doc

康欣口服液质量标准的改良　　【关键词】康欣口服液；,,丹参；,,地骨皮；,,高效液相法；,,淫羊藿苷　　摘要：目的建立改良康欣口服液标准的方法方法采用薄层色谱〔TL〕法对康欣口服液中的丹参、地骨皮进展定性鉴别；采用高效液相色谱〔HPL〕法测定淫羊藿苷的含量结果定性鉴别方法专属性强在5.36~26.8μg范围内淫羊藿苷峰面积与浓度线性关系良好，r=0.9998；样品平均加样回收率为100.4%(n=9)，RSD为1.84%结论该法简便、快速、结果准确，可有效控制康欣口服液的质量　　关键词：康欣口服液；丹参；地骨皮；高效液相法；淫羊藿苷　　IprveentftheQualityStandardfKangxinralLiquid　　Abstrat：bjetiveTiprvethestandardfrqualityfKangxinralLiquid.ethdsThinlayerhratgraphy(TL)asusedfrqualitiveidentifiatinfSalviailtirrrhizaandLyiuhinese.TheiariinasdeterinedbyHPL.ResultsTheTLidentifiatinashighlyspeifi.Theiariinareaandntentshedagdlinearrelatinshipattherangef5.36~26.8μgandrrelatineffientas0.9998.Theaveragereveryftheaddedsapleas100.4%(n=9),RSDas1.84%.nlusinTheethdissiple,quik,auratefrthequalityntrlfKangxinralLiquid.　　Keyrds：Kangxinral;Salviailtirrhiza;Lyiuhinensis;HPL;Iariin康欣口服液由何首乌、淫羊藿、丹参、地骨皮、黄芪等13味中药组成，具有补肾填精、健脾益气、养血活血、抗老防衰的功能。

用于脾肾虚衰，气血缺乏，早衰神疲，腰膝酸软，失眠健忘等症其疗效确切为了进步产品的内在质量，保证其临床疗效，在原质量标准的根底上增加了对方中丹参、地骨皮的TL鉴别，原定量指标是测定何首乌中大黄素，我们根据本品作用和用处，现改为测定淫羊藿中的淫羊藿苷作为定量指标，采用HPL法，并优选了提娶测定条件，建立了本品的含量测定方法1仪器与试药　　1.1仪器aters-600高效液相色谱仪；aters2996DAD检测器；atersillennu32色谱工作站；SartriusBP211D型电子天平〔北京赛多利斯仪器系统〕；电热恒温枯燥箱〔上海市实验仪器厂〕；KQ-500DE型医用数控超声清洗仪〔昆明市超声仪器〕；TDL-408型台式离心机〔上海安亭科学仪器厂〕　　1.2试药薄层色谱用硅胶G、硅胶H、羧甲基纤维素钠〔青岛海洋化工厂〕；原儿茶醛对照品〔中国药品生物制品鉴定所〕；淫羊藿苷对照品〔中国药品生物制品检定所〕；康欣口服液〔福州屏山制药厂提供〕；乙腈〔色谱纯erk〕；水为重蒸馏水；其它试剂均为分析纯　　2方法与结果　　2.1薄层色谱鉴别　　2.1.1丹参取康欣口服液50l置分液漏斗中，加乙醚萃取3次，20l/次，合并乙醚取液，水浴蒸干，残渣用少量甲醇溶解作为供试品溶液。

取缺丹参的阴性制剂同法制备阴性对照液，再取原儿茶醛对照品，加甲醇适量制成每毫升含1g的对照品溶液照薄层色谱法实验［1］，汲取供试品溶液和阴性对照液各10μl，对照品溶液2μl分别点于同一硅胶G薄层板上以苯醋酸乙酯甲酸〔12∶5∶0.8〕为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3%Fel3乙醇液，于105℃下加热至斑点明晰置日光下检视，供试品色谱中在与对照品色谱相应位置上，显一样颜色斑点，阴性对照无干扰结果见图1　　2.1.2地骨皮取康欣口服液50l分液漏斗中，加乙醚萃取3次，50l/次，合并乙醚萃取液，水浴蒸干，残渣用少量甲醇溶解作为为供试品溶液取缺地骨皮的阴性制剂同法制备阴性对照液，再取地骨皮对照药材2g，加甲醇50l提取，制成对照药材溶液，照薄层色谱法实验［1］，汲取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶H薄层板上以苯-醋酸乙酯-冰醋酸〔12∶7∶2〕为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯〔UV365〕下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显一样着色斑点，阴性对照无干扰结果见图2　　1.康欣口服液〔批号031011〕2.康欣口服液〔批号031012〕3.康欣口服液〔批号031013〕4.原儿茶醛对照品5.缺丹参阴性样品图1康欣口服液中丹参的TL〔日光〕〔略〕　　1.康欣口服液〔批号031011〕2.康欣口服液〔批号031012〕3.康欣口服液〔批号031013〕4.地骨皮对照药材5.缺地骨皮的阴性样品　　图2康欣口服液中地骨皮的TL〔荧光〕〔略〕　　2.2含量测定　　2.2.1对照品溶液的制备精细称取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每毫升含0.0268g的溶液，作为对照品溶液。

　　2.2.2供试品溶液的制备精细汲取本品10.0l，置蒸发皿中，水浴蒸干，加稀乙醇超声提取3次，20in/次，乙醇参加量分别为10，10，5l，滤过，滤液定容至25l量瓶中，摇匀，用微孔滤膜〔0.45μ〕滤过，即得转贴于论文联盟.ll.　　2.2.2.1提取时间的考察精细汲取本品10.0l，置蒸发皿中，水浴蒸干，加稀乙醇超声提取不同时间，放冷后滤过，滤注定容至25l量瓶中，摇匀，用微孔滤膜〔0.45μ〕滤过，注入高效液相色谱仪测定其含量结果见表1　　表1不同时间超声处理的比拟〔略〕　　以上结果说明，超声20in含量不再增加，为提取完全，故确定超声处理时间为20in　　2.2.2.2提取方法考察精细汲取本品10.0l，置蒸发皿中，水浴蒸干，加稀乙醇分别用不同的提取方法提取20in，放冷后滤过，滤液定容至25l量瓶中，摇匀，用微孔滤膜〔0.45μ〕滤过，注入高效液相色谱仪测定其含量结果见表2　　表2不同提取方法的比拟〔略〕　　以上结果说明，超声提取含量的同时超声简便，故确定提取方法为超声提龋　　2.2.2.3提取溶剂的考察精细汲取本品10.0l，置蒸发皿中，加不同溶剂20l，用超声提取3次，20in/次，放冷后滤过，滤液定容至25l量瓶中，摇匀，用微孔滤膜〔0.45μ〕滤过，注入高效液相色谱仪测定其含量。

结果见表3　　表3不同溶剂提取的比拟〔略〕　　以上结果说明，50%乙醇提取最完全，故确定提取溶剂为50%乙醇〔即稀乙醇〕　　2.3空白对照溶液的制备取按处方量及制法工艺要求制成的不含羊藿的阴性对照品，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液　　2.4色谱条件色谱柱为Diansil18(4.6×250,5.0μ)柱；检测波长270n；流动相为乙腈-水〔30∶70〕；流速1.0l/in；进样量20μl按上述条件，汲取供试品溶液、对照品溶液、空白对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪测定，测定结果见图3、图4、图5从色谱图可见，其他成分对淫羊藿苷的测定无干扰，符合测定要求　　2.5标准曲线制备分别精细汲取对照品溶液0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0置10l量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀各进样20μl，以峰面积Y与浓度X〔μg/l〕进展线性回归，得回归方程：Y=98857.5X-11467.8，r=0.9998以上结果说明：在5.36~26.8μg/l范围内淫羊藿苷峰面积与进样量有良好的线性关系结果见表4　　图3淫羊藿苷对照品色谱图〔略〕　　图4康欣口服液样品色谱图〔略〕　　图5空白对照色谱图〔略〕　　表4淫羊藿苷对照品测定结果〔略〕　　2.6精细度实验精细汲取上述对照品溶液20μl，重复进样5次，淫羊藿苷峰面积的RSD为0.459%。

　　2.7稳定性实验取供试品溶液在0，4，8，12，16h，分别进样20μl，测得样品中淫羊藿苷峰面积的RSD为0.726%　　2.8重现性实验按拟定的含量测定方法，对同一批样品〔批号031011〕分别制备5份供试品溶液，测得峰面积并计算含量，RSD为1.59%　　2.9回收率实验采用加样回收法，取同一批号样品9份，每份10.0l，分别按样品中淫羊藿苷含量的80%，100%，120%参加淫羊藿苷对照品，按供试品溶液的制备方法制备，按上述色谱条件测定结果见表5　　表5回收率实验结果〔略〕　　n=6，实验结果说明，此方法可靠性良好　　2.10样品测定分别精细汲取对照品溶液与供试品溶液各20μl，按上述色谱条件测定(n=3)结果见表6　　表6样品测定结果〔略〕　　3讨论　　3.1在鉴别丹参时，供试液的制备方法，曾比拟了加醋酸乙酯和乙醚萃取，相比拟乙醚萃取提取效率较高；在选择展开剂时，比拟了文献报道的十几种展开系统并改变相应的比例［2，3］，发现以苯-醋酸乙酯-甲酸〔12：5：0.8〕为展开系统合适本方鉴别　　3.2在鉴别地骨皮时，曾用环已烷醋酸乙酯冰醋酸〔10∶8∶2〕、环已烷醋酸乙酯冰醋酸〔12∶8∶2〕、苯-醋酸乙酯冰醋酸〔12∶7∶2〕、环已烷丙酮〔10∶3〕、环已烷氯仿醋酸乙酯甲酸〔12.5∶1.5∶7∶2〕为展开剂［3］，别离效果不理想，且阴性有干扰；经不断调整后改为以环已烷醋酸乙酯甲酸〔12∶7∶2〕为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯365n下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显一样颜色斑点，阴性对照色谱中无此斑点。

别离结果较理想　　3.3原标准中含量测定以何首乌中的2，3，5，4’四羟基二苯乙烯2βD葡萄糖苷作为定量指标控制制剂的质量，但2，3，4，5，4’四羟基二苯乙烯2βD葡萄苷在水溶液中的稳定性不好，故改测淫羊藿中的淫羊藿苷含量为制剂的质量控制指标，以淫羊藿苷为定量指标较原标准方法准确性、稳定性及重现性均更好，可更有效控制康欣口服液的质量　　3.4目前，中成药中淫羊藿含量测定多以数是采用HPL法测定淫羊藿苷在流动相的选择方面，曾采用甲醇0.025l/L磷酸二氢钠、乙腈水〔7∶3〕、乙腈水〔3∶2〕［4］，最终确定乙腈水〔7∶3〕为本品含量测定的流动相　　参考文献：　　［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2000：37，附录VIB.　　［2］国家药典委员会.丹参片质量标准修订草案［S］.中国药品标准，2002，3〔2〕：26.　　［3］南京药学院?中草药学?编写组.中草药学［］.南京：江苏人民出版社，1976：161.　　［4］赵陆华.高效液相色谱法分析中药成分手册［］.北京：中国医药科技出版社，1994：376.转贴于论文联盟.ll.。