细菌培养鉴定和抗生素敏感性试验.docx

临床微生物实验室以细菌培养鉴定和抗生素敏感性试验为主，为临床提供各种体 液、分泌物的细菌培养鉴定与抗生素敏感性试验、支原体检测与抗生素敏感性试 验、肥达氏、外斐氏试验等项目的检测服务并承担医院的院内感染监控工作 细菌培养样本的收集方法总则：用于细菌培养的样本收集时应注意无菌操作，特别是无菌部位的样本病 人在采集样本做细菌培养项目时，如果怀疑细菌感染，应在使用抗生素前，并采 样进行送检；如果患者已使用抗生素进行治疗，至少停用抗生素一周以上采样 时，如果使用干燥的棉拭子，可在采集前先将棉拭子沾少许营养肉汤或无菌生理 盐水以保持标本湿度，让细菌能存活更长的时间所有的标本要保证储存容器的 密闭性，以防止污染，导致检测结果不准1、 粪便：取有粘液、脓血部分粪便置无菌塑料盒中，如为稀水便可直接收集于无菌塑料 盒中，置2〜8°C冰箱待检2、 眼、耳、鼻、咽拭子：将棉拭子沾取少许无菌生理盐水（如沾取的太多，可在无菌生理盐水瓶壁上挤去 多余的水份），然后采取可疑部位的分泌物，倒悬于无菌试管内放2〜8C冰箱内 待检3、 脓液组织或液体优于拭子标本，尽可能在用药前采集标本标本采集前先用无菌生理 盐水冲洗表面污染菌，用拭子采取脓液及病灶深部的分泌物。

为防止拭子干燥， 可在采集前先将棉拭子沾少许营养肉汤或无菌生理盐水以保持标本湿度脓性分 泌物较多时，先用无菌棉拭子擦拭，再取流出分泌物置无菌管内送检4、 血液:A、 凡怀疑菌血症和败血病的患者，采血培养时，应尽量在未使用抗菌素前采血，如已使用抗菌素，应尽量选择抗菌素在体内浓度最低时采血，假如病人每天静脉 滴注抗菌素时，应该在病人第二天使用抗菌素之前采血培养如果病人每8小时 用药一次，应该在病人第二次用药之前采血，尽量避过抗菌素在体内浓度的高峰 期一 _B、 成人每次采血5-10ml，小儿采血2-3mlC、 常规消毒病人采血部位：抽一定量血液后，另换一无菌针头，消毒接种瓶口 后将血接种在瓶内，轻轻摇匀D、 从抽血到接种入瓶，动作要快，防止血液凝固5、 穿刺液：胸腹水、心包液、关节腔液、鞘膜积液：无菌手续抽取后，注入含肝素的无菌试管中，轻轻颠倒试管10余次，使肝素与 穿刺液混匀达到抗凝的目的放2〜8C冰箱保存6、 胆汁:由专科医生以无菌方法取胆汁10ml注入无菌试管7、 脑脊液：无菌方法取脑脊液3-5mI，置无菌试管内保温送检8、 生殖器官标本：阴道、子宫颈及前列腺等分泌物应由医师采集，收集于无菌试管内送检。

怀疑淋 病奈瑟菌检查时，不论男女尿道及宫颈均需用拭子插入尿道及子宫颈3cm深取 样送检，要避免阴道分泌物污染拭子9、 注射剂、生物制品和敷料等标本：一般应以在同一次高压蒸汽锅内灭菌的注射剂，生物制品和敷料为一批或同一批 制品为一批，每批一般采取6份标本，即自高压锅内靠近锅壁、锅中央锅面或锅 盖处各取2份，而立式高压蒸汽灭菌器内物品则应取上、中、下各2份10、 烧伤标本：组织或液体优于拭子标本，尽可能在用药前采集标本标本采集前先用无菌生理 盐水冲洗表面污染菌，用拭子采取脓液及病灶深部的分泌物为防止拭子干燥， 可在采集前先将棉拭子沾少许营养肉汤或无菌生理盐水以保持标本湿度脓性分 泌物较多时，先用无菌棉拭子擦拭，再取流出分泌物置无菌管内送检11、 尿液标本：由护理人员协助采取中段尿约3ml入无菌试管中，放2〜8°C冰箱保存待检空气培养采样方法1、 采样时间：选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样2、 采样高度：与地面垂直高度80〜150cm3、 布点方法：室内面积＜30m3,设一条对角线上取3点，即中心一点，两端各距墙1m各 取一点，室内面积＞30m3，设东、南、西、北、中5点，其中东、南、西、北点 距墙1m。

4、 采样方法：用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5分钟后送检培 养5、 标本保存5.1采样后必须尽快送检，并保存于2〜8C，送检时间不超过12小时5.2在平皿上注明各采自哪个室，用胶布把平皿和平皿盖子固定好以免在送检途 中平皿和平皿盖子分离而造成污染性病培养全套标本采集一、 支原体（解脲、人型）培养+药敏1、 病人准备：病人在采集标本做该项目时至少停用抗生素一周以上2、 标本类型：生殖器分泌物3、 标本米集：3.1支原体对干、热抵抗力差，标本采集后应尽快接种于运输培养基中送检3.2男性：用特别细的无菌棉拭子沾取无菌盐水少许深入尿道口内2-2.5cm处取分 泌物，将拭子按无菌手续洗在运输培养基中送检3.3前列腺液亦可用棉拭子尽量多的沾取洗于运输培养基中3.4中段尿可直接送检3.5女性:用沾取少许无菌生理盐水的棉拭子取宫颈管内口 1-2cm处单层柱状上皮 细胞，取样拭子不可碰阴道壁，将拭子按无菌手续洗在支原体运输培养基中送检4、 标本保存条件：室温可保存8小时；4C可保存24小时二、 淋球菌培养+药敏：1、 病人准备：病人在采集标本做该项目时至少停用抗生素一周以上2、 标本类型：生殖器分泌物3、 标本米集：3.1男性尿道炎急性期患者可用沾有少许生理盐水的无菌拭子取脓性分泌物。

3.2非急性期病人，可用无菌细小棉拭子沾取少许生理盐水轻轻插入尿道2-4cm深处，转动拭子，然后取出3.3女性患者先用无菌棉拭子擦去宫颈口分泌物，再用另一沾有生理盐水的棉拭 子插入宫颈口内1cm处旋转，取出分泌物3.4采标本以后马上把棉拭子插入运输培养基中送检4、标本保存条件：培养基室温下不超过24小时送检三、沙眼衣原体抗原检测：1、 标本类型：男性主要有尿道拭子样本，尿液样本和直肠拭子样本，眼部采集 眼结膜样本女性主要有子宫拭子样本，阴道拭子样本及眼结膜样本婴儿主要 为眼部和肺部感染，可采集眼结膜和喉咙拭子样本不可以使用血清或者血浆检 测2、 取样拭子要求：一般不能使用含有棉花纤维、本质、竹质、玻璃成分或者胶 水粘贴的拭子，也不要使用玻璃采样管，请使用本中心提供的专用的拭子及采样 管3、 取样：3.1男性尿道：将拭子直接插入尿道内2-3cm，旋转10秒后停留10-20秒后取出， 放入采样试管中若采样部位有异常分泌物，应先进行淋球菌检查3.2女性宫颈：先用一支大棉拭子擦去宫颈口表面黏液，将该棉拭子丢弃用另 一拭子插入同一位置，转动10秒后停留10-20秒后放入采样管内注意整个采样 过程避免与阴道壁接触！若样本黏液过多或者带血应该尽量重新取样。

3.3尿液采样要求：1）患者在采样前至少两小时没有排尿；2）只采集最初的 10-15ml尿液尿液使用专用的采样管4、 样本保存条件：采样管内提前加入1 ml样本处理溶液，采集后的拭子在2-8°C 可保存1-3周注意：需要开展以上检验项目的单位请提前通知我中心，以便送上所需运输培养 基或专用管，同时在采样的当天及时把样本取回，当天接种请各合作单位能积 极配合。