常用试剂配制及显色方法详解.docx

常用试剂配制及显色方法详解(一) 通用显色剂1. 重铭酸钾一硫酸一般有机物均能显色，不同化合物显示不同颜色喷洒剂:5克重铭酸钾溶于100ml，40%硫酸中喷洒后加热至150oC斑点出 现2. 碘:检查一般有机物(1) 碘蒸汽:在一个密闭玻璃皿先放入碘片，使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或 纸层放入缸内数分钟即显色，有时在缸内放一盛水的小杯，增加缸内的湿度，可提 高显色的灵敏度2) 0.5%碘的氯仿溶液，取出挥发散过量的碘再喷1%淀粉的水溶液，斑点转成 蓝色3. 碘一碘化钾溶液:很我有机物虽黄色(配法见后)4.5%—磷钼酸乙醇溶液:喷后120oC烤，还原性物质显兰色，再用氨气熏，则 背景变为无色5.20%磷酸乙醇溶液:喷后120oC，还原性物质显兰色6碱性高锰酸钾试剂:还原性物质在淡红背景上显黄色溶液I:1%高锰酸钾溶 液5%碳酸钠溶液溶液II溶液I和溶液II等量混合使用7. 中性0.05%高锰酸钾溶液:易还原性物质在淡红背景上显黄色8. 硝酸银一氢氧化铵(Tollen's--zoffaronl)试剂，喷后105oC烤5~10分钟， 还原性物质显黑色溶液I:0.1N硝酸银溶液溶液II:氢氧化铵溶液。

临用前溶液I和溶液II以1:5混合注意:放久则形成爆炸性的叠氦化银9硝酸银一高锰酸钾试剂:还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色溶液I:0.1N硝酸银溶液:2N氢氧化铵溶液:2N氢氧化钠（1:1:2）临用前配 制溶液II:高锰酸钾0.5g，碳酸钠1g，加水成100ml溶液，临用前溶液I和溶液 II等量混合10. 四唑试剂:还原性物质，在室温或微加热时显紫色溶液I:0.5%四唑兰甲醇溶液溶液II:6N氢氧化钠溶液临用前溶液I和溶液 II等量混合11. 铁氤化钾:三氯化铁试剂:还原性物质显兰色，再喷射2N/L盐酸溶液，则兰 色加深溶液I:1%铁氤化钾溶液溶液II:2%三氯化铁溶液临用前溶液I和溶液II 等量混合12. 浓硫酸：甲醇（1:1）溶液，或5%硫酸的乙醇溶液，喷后100oC烤15分钟，各 种不同物质显不同颜色13. 萤光显色剂溶液:试喷以下一溶液，不同的物质财富在萤光背景上可能显黑 色或其他萤光斑点A:0.2%2.7--二氯萤光素乙醇溶液B:0.01萤光素乙醇液C:0.1%桑色素乙醇溶液D:0.05罗丹明B乙醇溶液E:萤光素一漠，检不饱和化合物萤光素乙醇溶液（1）0.1%(2)5%漠的CCL4溶液。

喷洒(1)以后，放置(2)溶液的缸内，可在UV光下检查萤光，萤光素与漠化，而光饱和化合物则与漠加成，保留了原来的萤光;合成曙红(ensln)(无萤光) 若点样量较多，则成黄色斑点，底板成红色14. 碱式醋酸铅试剂(可做喷洒或沉淀试剂，多种有机化合物均反应)取Pbo14g置乳钵内，加蒸馏水10ml，研后成糊状后，倾入玻璃瓶中，乳钵用 10ml蒸馏水洗净，洗液并入瓶中，加醋酸铅溶液(取醋酸铅22g，加蒸馏水70ml制 成)70ml，用力振摇，放置七天，滤过，并自滤器中添加适量新沸过的冷蒸馏水使 成100ml即得二) 生物碱显色剂通用显色剂：1. 改良碘化铋钾(Dragendorff)试剂:生物碱和某些含氯化合物显橙红色溶液I:碱式硝酸铋0.85g，溶于冰乙酸10ml和40ml.溶液II:碘化钾0.8g溶于水20ml.储存液:溶液I和溶液II等量混合(置棕色瓶中杨以长期保存)显色剂:储存1ml与冰乙酸2ml和水70ml混合，用前配制2. 碘化铂钾(碘铂酸)试剂，不同的生物碱显不同的颜色10%六氯化铂酸溶液 3ml和水97ml混合，加6%碘化钾溶液100ml，混合均匀，临用前配制3. 碘-碘化钾(Wagner)试剂:生物碱显棕褐色。

碘1g和碘化钾10g溶于50ml水中，加热，加冰醋酸2ml用水稀释到100ml4. 改良碘化铋钾:碘，碘化钾(1:1)试剂;生物碱显紫棕色或灰黑色5. 硫酸铈--硫酸试剂(改良sonnensclein试剂)：喷后110oC烤几分钟，不同的 生物碱显不同的颜色硫酸铈0.1g悬浮于水4ml中，加三氯化乙酸1g，加热煮 沸，放冷，逐滴加入浓硫酸直到混浊消失为止6. 碘化氯钾（vmayer）试剂（沉淀试剂）：取HgCL2（毒）1.35g加蒸馏水60ml溶解 后，量取碘化钾5g，加碘馏水10ml使溶解将两液混合，加蒸馏水稀释使成100ml 即得7. 硅钨酸（Bertrand）试剂（沉淀试剂）：5g硅钨酸溶于100ml蒸馏水中，加稀盐 酸使呈酸性反应即得三）强心甙显色剂1. 碱性3.5—二硝基苯甲酸试剂:强心甙显紫红色、几分钟后褪色2%3.5—二 硝基苯甲酸甲醇溶液与2N氢氧化钾溶液，用前按劳1:1混合2. 碱性三硝基苯:在浅橙色背景上显橙红色溶液I:间三硝基苯100mg溶于二甲基甲酰胺40ml，加浓HCL3~4滴，加水至 100ml，避光能长期保存溶液II:5%碳酸风溶液先喷溶液I，再喷溶液II，喷后90~103.0oC烤5分钟。

3. 三氯乙酸试剂:喷后110oC烤7〜10分钟，紫外光下观察萤光试剂I:25%三氯乙酸的乙醇或氯仿溶液，配制后可放置数日或用试剂II:上 述乙醇溶液用前每10ml加过氧化氢溶液4滴或新配3%氯铵T水溶液按4:1混合4. 三氯化锑试剂:喷后100oC烤5分钟，日光下或紫外光下观察25%或饱和的三氯化锑氯仿溶液5. 磷酸一漠试剂溶液I:10%磷酸溶液溶液II:漠化钾饱和溶液:25%盐酸溶液（1:1:1）薄层用溶液I喷洒后，在125oC烤12分钟（薄层太湿时则烤的时间可适当延 长），在紫外光下观察一次，将薄层再烤热，趁热喷溶液II，再在紫外光下观察去氧糖）6. Keller--Kllianl 试剂：（检查 a试液:100ml冰HAC和FeCL3试液0.5ml混匀，试样1ml混匀试样1ml加试液2ml溶解后，沿试管壁滴入浓硫酸2接触面即显棕色渐变浅绿，兰色最后HAC 层全部染成兰色四）黄酮甙显色剂黄酮类成份在紫外光下大多显出不同颜色，用氨熏，喷三氯化铝溶液或喷氢氧化钠等碱性溶液，则颜色变深或变色I. 氨气2.10%氢氧化钠或氢氧化钾溶液3.1%或5%碳酸钠溶液4.1%或5%三氯化铝乙醇溶液5.2%乙酸镁甲醇溶液。

6.饱和三氯化锑的氯仿溶液，100oC烤5分钟以上六种试剂在喷前喷后将薄层置日光与紫外光下观察7.1~2%三氯化铁乙醇溶液中性乙酸铅或碱式乙酸铅溶液8.1%9.0.1N硝酸银溶液10. 铁氤色钾一三氯化铁试剂溶液I:2%铁氤化钾溶液溶液II:2%三氯化铁溶液临用前溶液I与溶液II等量混合II. 硼氢化钾试剂:双氢黄酮化合物显红、橙红色溶液I:1~2%硼氢化钾（钠）异丙醇溶液，必须新鲜配制溶液II:浓盐酸先喷I、5分钟后放入盐酸蒸气槽内12.Shinoda试剂:在混有锌粉的硅胶薄层上喷盐酸，黄酮醇显红紫色制备硅胶薄层时，加入2%w/w锌粉混合，薄层展开后盐酸溶液，如展开剂为酸性，可在展 开后先喷锌一丙酮混悬液，再喷盐酸溶液罗丹明一氨试剂溶液I:0.1%罗丹明B的4%盐酸溶液溶液II:浓氨溶液先喷溶液I，然后再将薄层放入氨汽槽内14. 对氨基苯磺酸试剂溶液I:对氨基苯磺酸盐溶液溶液II:5%亚硝酸钠溶液将对氨基苯磺酸0.3g溶液对8%盐酸溶液100ml中，到紫溶液25ml用冰冷却， 加预冷的溶液II1.5ml15. 硼酸一柠檬酸试剂溶液I:饱和硼酸的丙酮溶液溶液II:柠檬酸丙酮溶液先喷溶液I，再喷溶液II。

福林试剂（Folin Ciocalteu 试剂）16.钨酸钠10g和钼酸钠2.5g溶于70ml水中，再缓缓加85%磷酸5ml和浓盐酸10ml，将混合液回流煮沸10小时，然后加硫酸锂15g，水5ml及漠1滴，再回去 流煮沸15分钟，所得溶液冷却后移置100ml溶量瓶中并用水稀释到刻度（贮备 液），溶液应不显绿色溶液I:20%碳酸钠溶液溶液II:临用前上述贮备液1份用水三分稀释先喷溶液I，稍干再喷溶液II五）皂甙灶显色剂1.25%磷钼酸乙醇溶液:喷后在140oC加热5~10分钟皂甙元均呈深兰色2. 三氯化锑浓盐酸或氯仿溶液:喷后在90oC烤10分钟（应在通风厨中进行）， 不同的皂甙元在可见光或紫外光下显出各种颜色3. 硫酸：甲醇（1:2）溶液，喷后加热，不同的皂甙元可显红褐色、紫色、黄色或 黑色，所显颜色与温度无关4. 氟磺酸：乙酸（1:1）溶液，喷后130oC加热5分钟各种皂甙元可显天兰紫、 粉红、淡棕等色，在紫外光下也显不同萤光5. 碘蒸汽:薄层置于碘蒸汽筒中，皂甙无皆显棕黄色斑点6. 三氯快乙酸或三氯乙酸：乙酸（1:2）溶液，喷后在100oC加热20分钟皆显黄 色7.2%血球生理盐水混悬液（溶血试验、检皂甙）。

取新鲜兔血（由心脏或静脉取血）适量，用洁净小毛刷迅速搅拌除去纤维蛋白， 并用生理盐水反复离心洗涤至上清液无色后，量取沉降红血球（可以管的离心管通 接读取）用生理盐水配成2%混悬液贮冰箱内备用（贮存期2~3天）六）蒽醍甙显色剂蒽醍及其甙本身在日光下显黄色，在紫外光下则显黄，红橙色萤光在薄层上 用氨熏或喷氢氧化钾与碱溶液，则颜色变深或变色1. 氨气2.10%氢氧化钾、甲醇溶液3.3%氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液4.50%哌啶的苯溶液5. 饱和喷酸锂溶液6. 饱和硼砂溶液7.0.5%乙酸镁甲醇溶液:喷后90oC烤5分钟8.0.5%乙酸铝溶液，喷后紫外光下看萤光9.0.5%牢固兰B试剂，喷后则原来氢氧化钠、锂、钾等溶液碱溶液显萤光的斑 点此时在可见光下显棕、紫或绿色也可先喷本试剂，再喷稀氢氧化钠溶液而显 色也用于酚类及能偶芳香胺的显色溶液I:新配的0.5%牢固兰B盐的水溶液溶液II:0.1N/L氢氧化钠溶液先喷溶液I，喷溶液II七） 香豆精甙显色剂1.0.5%碘的碘化钾溶液，香豆精各种颜色，很多其他类型的化合显色2. 重氟化氨基苯磺酸试剂，香豆精显黄、橙、红、棕紫等颜色也用于酚类，芳 香胺反转偶合的朵环化合物的显色。

对氨基苯横酸0.9g克加热溶于12N盐酸9ml，用水稀释到100ml，取此溶液 10ml用冰冷却，加冰冷的4.5%亚硝酸钠溶液10ml，0oC放15分钟（在0oC可保存 三天），用前加等体积1%碳酸钠溶液3. 重氮化对硝基苯胺试剂、香豆精显黄、红、棕、紫等颜色，也用于酚类的显 色对硝基苯苯胺0.7g溶于12N盐酸9ml，用水稀释到100ml，将此溶液逐渐滴加 到冰冷的1%亚硝酸钠溶液5,再用冰冷的水稀释到100，需临用时新配4.4— 氨基安替比林一铁氤化钾试剂:香豆素和酚类显橙红至深红色溶液I:2%4--氨基安替比林乙醇溶液溶液II:8%铁氨化钾溶液先喷溶液I，再喷溶液II，再用氨气熏之5.稀氢氧化钠:喷前喷后薄层在短波长的紫外光下观察萤光八） 挥发油显色剂1. 茴香醛一浓硫酸试剂:喷后150oC烤挥发油中各成分显不同颜色浓硫酸1ml加到冰醋酸50ml中，冷后加茴香醛0.5ml必须临时配制2. 萤光素--漠试剂:检出含乙烯化合物配法及使用见前）3. 碘化钾一冰乙酸一淀粉试剂:斑点显兰色则为过氧化物溶液I:4%碘化钾溶液10ml与冰乙酸40ml混合，。