酸乳中乳酸菌的测定.docx

实验 乳及乳制品中乳酸菌的测定一、 目的1、 解酸乳中乳酸菌分离原理2、 学习并掌握酸乳中乳酸菌菌数的检测方法二、 原理 活性酸奶需要控制各种乳酸菌的比例，有些国家将乳酸菌的活菌数含量作为区分产品品种和质量的依据由于乳酸菌对营养有复杂的要求，生长需要碳水化合物、氨 基酸、肽类、脂肪酸、酯类、核酸衍生物、维生素和矿物质等，一般的肉汤培养基难 以满足其要求测定乳酸菌时必须尽量将试样中所有活的乳酸菌检测出来要提高检 出率，关键是选用特定良好的培养基采用稀释平板菌落计数法，检测酸奶中的各种 乳酸菌可获得满意的结果三、材料1、培养基改良MC培养基（MRS培养基，改良CHALMERS培养基，M17培养基）2、仪器和器具无菌移液管（25ml,1ml）,无菌水（225ml带玻璃珠三角瓶，9ml试管），无菌培养 皿，旋涡均匀器，恒温培养箱四、流程酸奶一稀释一制平板一培养一检查计数五、方法1 、样品稀释先将酸奶样品搅拌均匀，用无菌移液管吸取样品25ml加入盛有225ml无菌水的三 角瓶中，在旋涡均匀器上充分振摇，务必使样品均匀分散，即为10-1 的样品稀释液， 然后根据对样品含菌量的估计，将样品稀释至适当的稀释度。

2、 制平板选用2~3个适合的稀释度，培养皿贴上相应的标签，分别吸取不同稀释度的稀释液1ml 置于平皿内，每个稀释度作2个重复然后用溶化冷却至45°C左右的MC培养基倒平 皿，迅速转动平皿使之混合均匀，冷却成平板3、 培养和计数将平皿倒置于37C恒温箱内培养72h，观察长出的细小菌落，计菌落数目，按常 规方法选择 30~300 个菌落平皿进行计算六、结果1 、指示剂显色反应乳酸菌的菌落很小，1〜3m m,圆形隆起，表面光滑或稍粗糙，呈乳白色、灰白色或暗黄色由于产酸菌落周围能使CaCO3产生溶解圈，酸碱指示剂呈酸性显色反应 2、镜检形态必要时，可挑取不同形态菌落制片镜检确定是乳杆菌或乳链球菌保加利亚乳杆备课用纸菌呈杆状，成单杆、或双杆菌或长丝状嗜热链球菌，呈球状，成对、或短链、或长 链状七、数据计数及处理 作平皿内菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏在记下 各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板的平均菌落总数将各稀释平板上的菌落数填入下表乳酸菌测定报告：稀释度乳酸菌数/平 板123平 均123平 均123平 均每毫升中的 乳酸菌数根据试验结果，报告检测结果 每 1ml 酸奶中的乳酸菌数是___。