两株拮抗细菌防治黄瓜枯萎病的研究.doc

微生物学专业毕业论文微生物学专业毕业论文 [ [精品论文精品论文] ] 两株拮抗细菌防治黄瓜枯萎两株拮抗细菌防治黄瓜枯萎病的研究病的研究关键词：抗菌活性关键词：抗菌活性 拮抗菌拮抗菌 M22BH3M22BH3 黄瓜枯萎病黄瓜枯萎病摘要：1．两株拮抗细菌最大抗菌活性培养条件的优化 利用管碟法对本实验 室筛选出的两株具有广谱生防潜力的拮抗菌 M22BH3（Bacillus subtilis M22BH3） 、17（Bacillus amyloliquefaciens I7）无细菌滤液进行最大抗菌活 性培养条件的优化，确定了生防菌 M22BH3 在 LB 培养基、30℃、pH8 的条件下 培养其滤液抗菌活性最强；17 菌株在 NA 培养基、45℃、pH7 培养条件下滤液具 最大抗菌活性在培养基中加入促芽孢生长的尿素、土壤浸汁、马铃薯淀粉及 金属离子，M22BH3、I7 菌株滤液抗菌活性未见提高，这与报道的芽孢杆菌产抗 菌代谢物情况存在明显差异，抗菌物质的产生与芽孢形成之间没有相关性 2．两株拮抗细菌室内及大田条件下对黄瓜枯萎病的影响 研究发现菌株 M22BH3 无菌滤液对黄瓜种子的萌发有抑制作用，处理的种子萌发率为 48．33％，低于阳性对照近 20％；17 菌株滤液处理的黄瓜种子，萌发率为 75％，明显高于阳性对照，对种子的萌发有促进作用。

室内培养通过对种子浸 种、秧苗灌根及两种方法同时采用发现：I7 菌株无菌滤液两种方法同时采用对 黄瓜枯萎病的防治效果较好，防治效果达 69．05％，明显高于对照，M22BH3 菌 株无菌滤液防治效果不明显；同时对两菌株无菌滤液作用秧苗 14d 和 28d 跟踪， 发现 I7 菌株无菌滤液处理发病率上升的幅度较小，防治效果较稳定性大田试 验结果与室内结果相一致，I7 菌株无菌滤液对黄瓜枯萎病的防治效果较好，防 治效果高达 70．7％，高于阳性对照近 10％，并且经过 I7 菌滤液处理的黄瓜种 子，其地上部分的植株生长旺盛、健壮，叶片呈深绿色；M22BH3 菌滤液各处理 对黄瓜枯萎病的防治效果较对照农药未见显著差异 3．两株拮抗细菌安全 性测定 研究发现，M22BH3、I7 菌剂处理对昆明小鼠急性经口 LD50 均大于 5000mg/kg，属低毒类；急性经皮 LD50 大于 2000 mg/kg，亦均属低毒类：对豚 鼠皮肤刺激平均指数 72h 后为 0，皮肤刺激强度为无刺激性；对兔眼刺激平均 指数 48h 后为 0，眼刺激强度为无刺激性；皮肤变态反应（致敏）试验中，经 过多次致敏和激发两菌剂均未引起对封闭群豚鼠皮肤的致敏反应，致敏率为 0，属Ⅰ级弱致敏物。

正文内容正文内容1．两株拮抗细菌最大抗菌活性培养条件的优化 利用管碟法对本实验室 筛选出的两株具有广谱生防潜力的拮抗菌 M22BH3（Bacillus subtilis M22BH3） 、17（Bacillus amyloliquefaciens I7）无细菌滤液进行最大抗菌活 性培养条件的优化，确定了生防菌 M22BH3 在 LB 培养基、30℃、pH8 的条件下 培养其滤液抗菌活性最强；17 菌株在 NA 培养基、45℃、pH7 培养条件下滤液具 最大抗菌活性在培养基中加入促芽孢生长的尿素、土壤浸汁、马铃薯淀粉及 金属离子，M22BH3、I7 菌株滤液抗菌活性未见提高，这与报道的芽孢杆菌产抗 菌代谢物情况存在明显差异，抗菌物质的产生与芽孢形成之间没有相关性 2．两株拮抗细菌室内及大田条件下对黄瓜枯萎病的影响 研究发现菌株 M22BH3 无菌滤液对黄瓜种子的萌发有抑制作用，处理的种子萌发率为 48．33％，低于阳性对照近 20％；17 菌株滤液处理的黄瓜种子，萌发率为 75％，明显高于阳性对照，对种子的萌发有促进作用室内培养通过对种子浸 种、秧苗灌根及两种方法同时采用发现：I7 菌株无菌滤液两种方法同时采用对 黄瓜枯萎病的防治效果较好，防治效果达 69．05％，明显高于对照，M22BH3 菌 株无菌滤液防治效果不明显；同时对两菌株无菌滤液作用秧苗 14d 和 28d 跟踪， 发现 I7 菌株无菌滤液处理发病率上升的幅度较小，防治效果较稳定性。

大田试 验结果与室内结果相一致，I7 菌株无菌滤液对黄瓜枯萎病的防治效果较好，防 治效果高达 70．7％，高于阳性对照近 10％，并且经过 I7 菌滤液处理的黄瓜种 子，其地上部分的植株生长旺盛、健壮，叶片呈深绿色；M22BH3 菌滤液各处理 对黄瓜枯萎病的防治效果较对照农药未见显著差异 3．两株拮抗细菌安全 性测定 研究发现，M22BH3、I7 菌剂处理对昆明小鼠急性经口 LD50 均大于 5000mg/kg，属低毒类；急性经皮 LD50 大于 2000 mg/kg，亦均属低毒类：对豚 鼠皮肤刺激平均指数 72h 后为 0，皮肤刺激强度为无刺激性；对兔眼刺激平均 指数 48h 后为 0，眼刺激强度为无刺激性；皮肤变态反应（致敏）试验中，经 过多次致敏和激发两菌剂均未引起对封闭群豚鼠皮肤的致敏反应，致敏率为 0，属Ⅰ级弱致敏物 1．两株拮抗细菌最大抗菌活性培养条件的优化 利用管碟法对本实验室筛选 出的两株具有广谱生防潜力的拮抗菌 M22BH3（Bacillus subtilis M22BH3） 、 17（Bacillus amyloliquefaciens I7）无细菌滤液进行最大抗菌活性培养条件 的优化，确定了生防菌 M22BH3 在 LB 培养基、30℃、pH8 的条件下培养其滤液 抗菌活性最强；17 菌株在 NA 培养基、45℃、pH7 培养条件下滤液具最大抗菌活 性。

在培养基中加入促芽孢生长的尿素、土壤浸汁、马铃薯淀粉及金属离子， M22BH3、I7 菌株滤液抗菌活性未见提高，这与报道的芽孢杆菌产抗菌代谢物情 况存在明显差异，抗菌物质的产生与芽孢形成之间没有相关性 2．两株拮 抗细菌室内及大田条件下对黄瓜枯萎病的影响 研究发现菌株 M22BH3 无菌滤 液对黄瓜种子的萌发有抑制作用，处理的种子萌发率为 48．33％，低于阳性对 照近 20％；17 菌株滤液处理的黄瓜种子，萌发率为 75％，明显高于阳性对照， 对种子的萌发有促进作用室内培养通过对种子浸种、秧苗灌根及两种方法同 时采用发现：I7 菌株无菌滤液两种方法同时采用对黄瓜枯萎病的防治效果较好， 防治效果达 69．05％，明显高于对照，M22BH3 菌株无菌滤液防治效果不明显； 同时对两菌株无菌滤液作用秧苗 14d 和 28d 跟踪，发现 I7 菌株无菌滤液处理发 病率上升的幅度较小，防治效果较稳定性大田试验结果与室内结果相一致，I7 菌株无菌滤液对黄瓜枯萎病的防治效果较好，防治效果高达 70．7％，高于 阳性对照近 10％，并且经过 I7 菌滤液处理的黄瓜种子，其地上部分的植株生 长旺盛、健壮，叶片呈深绿色；M22BH3 菌滤液各处理对黄瓜枯萎病的防治效果 较对照农药未见显著差异。

3．两株拮抗细菌安全性测定 研究发现， M22BH3、I7 菌剂处理对昆明小鼠急性经口 LD50 均大于 5000mg/kg，属低毒类； 急性经皮 LD50 大于 2000 mg/kg，亦均属低毒类：对豚鼠皮肤刺激平均指数 72h 后为 0，皮肤刺激强度为无刺激性；对兔眼刺激平均指数 48h 后为 0，眼刺激强 度为无刺激性；皮肤变态反应（致敏）试验中，经过多次致敏和激发两菌剂均 未引起对封闭群豚鼠皮肤的致敏反应，致敏率为 0，属Ⅰ级弱致敏物 1．两株拮抗细菌最大抗菌活性培养条件的优化 利用管碟法对本实验室筛选 出的两株具有广谱生防潜力的拮抗菌 M22BH3（Bacillus subtilis M22BH3） 、 17（Bacillus amyloliquefaciens I7）无细菌滤液进行最大抗菌活性培养条件 的优化，确定了生防菌 M22BH3 在 LB 培养基、30℃、pH8 的条件下培养其滤液 抗菌活性最强；17 菌株在 NA 培养基、45℃、pH7 培养条件下滤液具最大抗菌活 性在培养基中加入促芽孢生长的尿素、土壤浸汁、马铃薯淀粉及金属离子， M22BH3、I7 菌株滤液抗菌活性未见提高，这与报道的芽孢杆菌产抗菌代谢物情 况存在明显差异，抗菌物质的产生与芽孢形成之间没有相关性。

2．两株拮 抗细菌室内及大田条件下对黄瓜枯萎病的影响 研究发现菌株 M22BH3 无菌滤 液对黄瓜种子的萌发有抑制作用，处理的种子萌发率为 48．33％，低于阳性对 照近 20％；17 菌株滤液处理的黄瓜种子，萌发率为 75％，明显高于阳性对照， 对种子的萌发有促进作用室内培养通过对种子浸种、秧苗灌根及两种方法同 时采用发现：I7 菌株无菌滤液两种方法同时采用对黄瓜枯萎病的防治效果较好， 防治效果达 69．05％，明显高于对照，M22BH3 菌株无菌滤液防治效果不明显； 同时对两菌株无菌滤液作用秧苗 14d 和 28d 跟踪，发现 I7 菌株无菌滤液处理发 病率上升的幅度较小，防治效果较稳定性大田试验结果与室内结果相一致， I7 菌株无菌滤液对黄瓜枯萎病的防治效果较好，防治效果高达 70．7％，高于 阳性对照近 10％，并且经过 I7 菌滤液处理的黄瓜种子，其地上部分的植株生 长旺盛、健壮，叶片呈深绿色；M22BH3 菌滤液各处理对黄瓜枯萎病的防治效果 较对照农药未见显著差异 3．两株拮抗细菌安全性测定 研究发现， M22BH3、I7 菌剂处理对昆明小鼠急性经口 LD50 均大于 5000mg/kg，属低毒类； 急性经皮 LD50 大于 2000 mg/kg，亦均属低毒类：对豚鼠皮肤刺激平均指数 72h 后为 0，皮肤刺激强度为无刺激性；对兔眼刺激平均指数 48h 后为 0，眼刺激强 度为无刺激性；皮肤变态反应（致敏）试验中，经过多次致敏和激发两菌剂均 未引起对封闭群豚鼠皮肤的致敏反应，致敏率为 0，属Ⅰ级弱致敏物。

1．两株拮抗细菌最大抗菌活性培养条件的优化 利用管碟法对本实验室筛选 出的两株具有广谱生防潜力的拮抗菌 M22BH3（Bacillus subtilis M22BH3） 、 17（Bacillus amyloliquefaciens I7）无细菌滤液进行最大抗菌活性培养条件 的优化，确定了生防菌 M22BH3 在 LB 培养基、30℃、pH8 的条件下培养其滤液 抗菌活性最强；17 菌株在 NA 培养基、45℃、pH7 培养条件下滤液具最大抗菌活 性在培养基中加入促芽孢生长的尿素、土壤浸汁、马铃薯淀粉及金属离子， M22BH3、I7 菌株滤液抗菌活性未见提高，这与报道的芽孢杆菌产抗菌代谢物情 况存在明显差异，抗菌物质的产生与芽孢形成之间没有相关性 2．两株拮 抗细菌室内及大田条件下对黄瓜枯萎病的影响 研究发现菌株 M22BH3 无菌滤 液对黄瓜种子的萌发有抑制作用，处理的种子萌发率为 48．33％，低于阳性对照近 20％；17 菌株滤液处理的黄瓜种子，萌发率为 75％，明显高于阳性对照， 对种子的萌发有促进作用室内培养通过对种子浸种、秧苗灌根及两种方法同 时采用发现：I7 菌株无菌滤液两种方法同时采用对黄瓜枯萎病的防治效果较好， 防治效果达 69．05％，明显高于对照，M22BH3 菌株无菌滤液防治效果不明显； 同时对两菌株无菌滤液作用秧苗 14d 和 28d 跟踪，发现 I7 菌株无菌滤液处理发 病率上升的幅度较小，防治效果较稳定性。

大田试验结果与室内结果相一致， I7 菌株无菌滤液对黄瓜枯萎病的防治效果较好，防治效果高达 70．7％，高于 阳性对照近 10％，并且经过 I7 菌滤液处理的黄瓜种子，其地上部分的植株生 长旺盛、健壮，叶片呈深绿色；M22BH3 菌滤液各处理对黄瓜枯萎病的防治效果 较对照农药未见显著差异 3．两株拮抗细菌安全性测定 研究发现， M22BH3、I7 菌剂处理对。