薯蓣皂苷元的提取分离和鉴别.docx

薯蓣皂苷元的提取分离和鉴别一、 实验目的1 .掌握甾体皂苷元(亲脂性和中性成分)的提取方法2. 熟悉薯蓣皂苷元的性质及鉴定法二、 仪器与试药(一) 仪器SHB-循环水式多用真空泵 HHS型电热恒温水浴锅玻璃仪器气流烘干器ZF-2型三用紫外仪电热恒温干燥箱 烧杯(1000mL、100mL) 乳钵电炉子 空气回流管 移液管(10mL、5mL) 锥形瓶(100mL) 沙式提取器(二) 试药薯蓣粗粉硫酸铵碳酸钠中性滤纸石油醚(30-60°C) 无水乙醇活性炭浓硫酸 AI2O3软板(中性100〜200目，活性III级) 苯 甲醇硅胶H-CMC硬板 石油醚 乙酸乙酯磷钼酸三、 药材中主要成分介绍薯蓣皂苷元(Diosgenin)是一种甾体皂苷元，分子式(C27H42O31)，分子量414.61,为 白色结晶，mp 204〜207C，溶于一般有机溶剂和醋酸，不溶于水目前，是制造多种甾体 药物如口服避孕药(I号，II号避孕药片)和甾体激素(如可的松)等的重要原料在植物 界主要分布在薯蓣科薯蓣属(Dioscorea)植物中，我国的薯蓣属植物有80余种，其中只有 薯蓣根茎组(Stenophora)的17种、I亚种及一变种才含有甾体皂苷元，其它则含有多量淀 粉，无皂苷元。

已用于生产的主要有盾叶薯蓣(D.Zingiberensis C. H. Wright)，穿龙薯蓣 (D.nipponica Makino)，黄山药(D.panthaica prain et Burkil)，紫黄姜(D.nipponica Makinovar rosthani prain et Burk)等在植物体内薯蓣皂苷元是与葡萄糖、鼠李糖结合成薯蓣皂苷 (Dioscin)而存在提取分离时，一般是先用稀酸将薯蓣皂苷水解成薯蓣皂苷元与单糖(葡 萄糖、鼠李糖)因薯蓣皂苷元不溶于水，混存于植物残渣中，故可用有机溶剂(如石油醚) 直接从植物残渣中提取出薯蓣皂苷元四、 实验内容1 .皂昔预试(1)泡沫试验(2)李伯曼一布哈德(Liebermann-Burchard)反应2. 薯蓣皂昔元的提取样品（薯蓣地下部分）V粉碎碎块（3-5mm左右的小颗粒）50g置于100ml锥形瓶中，再加A2NH SO 500ml安上空气回流管 ， ，^^〉|1|〃11＞尸1，i「在电炉上直火加热（隔石棉网）回流4小时（从回流开始计时）水解物放冷，水洗两次后，用Na co粉中和，在布氏漏斗上水洗至中性，尽量抽干 2 3中性滤渣（薯蓣皂苷元+植物组织等）Y滤渣置盘中，在60°C干燥（干燥过程中要注意压散团块并翻动）干燥的中性滤渣置沙氏提取器中，以石油醚（bp30-60°C ）在水浴上回流提尽皂苷*元［注一］石油醚提取液回收石油醚［注二］至约10-15ml时停止，倾入小锥形瓶，密塞，冷却析晶，抽滤，用少量石油醚快速抽洗［注三］薯蓣皂苷元（粗品）用无水乙醇重结晶（必要时用少许活性碳脱色），干燥（105°C）白色晶体（薯蓣皂苷元）注一：检查薯蓣皂昔元是否提尽，可用李伯曼反应，参考实验二“注三”项下。

注二：回收石油醚的方法见实验一“注四”项下注三：所得薯蓣皂昔元（粗品）用石油醚抽洗后，即可测定熔点，若熔点不合格时，才进行重结晶五、薯蓣皂昔元的鉴定1. 熔点测定：204〜209°C2. 薄层层析鉴定：样品：白色结晶的无水乙醇液标准品：薯蓣皂昔元无水乙醇液方法一：吸附剂：Al2O3软板（中性100〜200目，活性III级）展开剂：苯-甲醇（9： 1）方法二：吸附剂：硅胶H-CMC硬板展开剂：石油醚-乙酸乙酯(7： 3)显色剂：10%磷钼酸乙醇溶液喷雾后加热10〜20分钟3. 化学反应：(1) Liebermann-Burchard 反应(2) CHC13 -浓 H2SO4反应(3) 五氯化锑反应(Kahlenberg反应)：与五氯化锑的氯仿溶液呈紫蓝色4. 制备衍生物：乙酰化物的制法：取样品100mg溶于3mL毗啶中，加入20mL醋酐，煮沸半小时至一 小时后，将反应物倒入冰水中(冬季操作使用冷水即可)待析出白色晶体后，抽滤，析出 物丙酮重结晶即得mp196〜193°C5. 紫外吸收光谱的测定：取样品5mg,加入浓H2SO4 10mL，在40C水浴上加热1小时，放冷，测定薯蓣皂苷 元应有以下最大吸收峰：久max 271nm 415nm 514nmlg 3.99 4.06 3.64六、实验结果1. 详细记录定性反应结果2. 绘制色谱图，并计算Rf值。

3. 总结实验过程中遇到的问题和解决方法。