您所在位置：网站首页 > 学术论文 > 其它学术论文 > 黑色素细胞中黑色素含量的测定和酪氨酸酶活性的测定

黑色素细胞中黑色素含量的测定和酪氨酸酶活性的测定.docx

1页

卖家[上传人]：s9****2

文档编号：473774927

上传时间：2023-04-20

文档格式：DOCX

文档大小：8.62KB

文档加载中……请稍候！
如果长时间未打开，您也可以点击刷新试试。

下载文档到电脑，查找使用更方便

10金贝

下载

/ 1 举报版权申诉马上下载

文本预览

下载提示

常见问题

黑色素细胞中黑色素含量的测定和酪氨酸酶活性的测定方法一、黑色素含量的测定1. B16小鼠黑色素瘤细胞的准备离心收集约107个细胞，再用PBS洗2次，离心条件为1000rpm、5min，细胞沉淀备用2. 除杂向细胞沉淀中加入200吐纯水重悬细胞，再加入1mL乙醇/乙醚混合液（体积比为1:1），充分摇匀并于室温下静置15min时间到后，该混合物于3000rpm， 5min条件下继续离心，弃上清液，沉淀备用3. 黑色素颗粒溶解与检测向所得细胞沉淀中加入1mL10%的DMSO （用1MNaOH配制），充分振荡后于 80°C条件下封口放置30min时间到后于470nm波长处检测吸光度值黑色素含量计算：黑色素含量=A/细胞数二、酪氨酸酶活性的测定1. B16黑色素瘤细胞的准备离心收集约107个细胞，再用PBS洗2次，离心条件为1000rpm、5min，细胞沉淀备用2. 细胞裂解想细胞沉淀中加入1mL0.5%脱氧胆酸钠，于0C条件下放置15min3. 酪氨酸酶活性的测定时间到后，向以上混合物中加入3mL0.1%L-dopa （用0.1MpH=6.8的磷酸缓冲液配制，该反应混合液应在配制后2h内使用），反应温度37C，于475nm波长处检测反应0min和10min时的吸光度值。

酪氨酸酶活性计算：酪氨酸酶活性=（A0-A10） /细胞数。

点击阅读更多内容

相关文档