安息香的辅酶合成.docx

安息香的辅酶合成法实验类型：综合性实验学时：5 学时适应专业：生物医学类专业本科生一、实验目的1. 学习安息香缩合反应及安息香转化的基本原理；2. 学习以维生素B为催化剂合成安息香的实验原理和操作过程;13. 练习采用冰水浴控温；4. 巩固有机溶剂进行重结晶的操作方法和注意事项；5. 学习薄层色谱在跟踪反应进程中的应用；二、实验原理绝大多数生化过程都是在特殊条件下进行的化学反应，酶的参与可以使反应 更巧妙、更有效并且在更温和的条件下进行维生素 B 又称硫胺素或噻胺1（Thiamine），它是一种辅酶，作为生物化学反应的催化剂，在生命过程中起着 重要作用，主要是对a -酮酸脱羧和形成偶姻（a -羟基酮）等三种酶促反应发挥辅酶的作用其结构如下：H3cCH2Njsch2ch2ohCl- . HCl从化学角度来看，硫胺素分子中最主要的部分是噻唑环噻唑环C-2上的质 子由于受氮和硫原子的影响，具有明显的酸性，在碱的作用下质子容易被除去， 产生的负碳离子作为催化反应中心，形成苯偶姻安息香的辅酶合成法就是以维生素 B 为催化剂来合成安息香，其反应方程1式为：2 c H cHO65VB1OH OI IICH-C芳香醛在氰化钠（钾）作用下，分子间发生缩合反应生成a -羟酮，称为安 息香缩合反应。

氰离子几乎是专一的催化剂反应共同使用的溶剂是醇的水溶液 使用氰化四丁基铵作催化剂，则反应可在水中顺利进行安息香缩合最典型、最 简单的例子是苯甲醛的缩合反应CN-OH 02 C6H5CHO C2H5OH-h20 C6H5-CH-C-C6H5这是一个碳负离子对羰基的亲核加成反应，氰化钠（钾）是反应的催化剂其机理如下：OC6H-^^+C：o-二 CH C_H6 5 rCNc6HrcCN产CH=OOH OOH O-o- ohKi iCH C — C — CH6 5. 6 5CNH+ cn-CH CH-C-CH6 5 6 5C6H5 —厂厂C6H5CNH其他取代芳醛（如对甲基苯甲醛、对甲氧基苯甲醛和呋喃甲醛等）也可以发 生类似的缩合，生成相应的对称性二芳基羟乙酮三、实验准备1．仪器：回流装置，熔点仪磁力加热搅拌器2•试剂：苯甲醛，维生素B （盐酸硫胺素），95%乙醇，10%Na0H,活性炭,1冰块四、操作要点1 ．冰水浴冷却的操作过程及温度控制方法2. 在磁力下，将氢氧化钠溶液缓慢滴加到硫胺素溶液中，随时检测pH值， 并使 pH=10~113. 加热回流装置的安装要点及正确的装配方法，水浴温度保持在80-85°C。

4. 有机溶剂（95%乙醇）重结晶时，应采用加热回流冷凝装置五、 本实验的成败关键1. 必须在搅拌下，将氢氧化钠溶液缓慢滴加到硫胺素溶液中，同时，氢氧 化钠溶液的浓度必须为 10%，并且必须是新配置的2. 根据以往的实验经验， pH 值一定要调节到 11 左右，实验才能顺利进行；3. 水浴上加热时，水浴温度应保持在80〜85C，否则反应难以进行六、 注意事项1. 苯甲醛放置过久，常被氧化成苯甲酸，使用前最好经5%碳酸氢钠溶液洗 涤，而后减压蒸馏纯化，并避光保存2. V 在酸性条件下是稳定的，但易吸水，在水溶液中易被氧化失效，光及B1 铜、铁、锰等金属离子均可加速其氧化；在氢氧化钠溶液中噻唑环易开环失效 因此，反应前 VB1 溶液及氢氧化钠溶液必须用冰水冷透3•安息香在沸腾的95%乙醇中，其溶解度为12〜14g/100mL。