
PCR扩增产物出现杂带的原因.docx
1页可能的原因和对应的解决方案如下:1. 引物用量偏大,引物的特异性不高应调换引物或降低引物的使用量2. 循环的次数过多适当增加模板的量,减少循环次数3. 酶的用量偏高或酶的质量不好,应降低酶量或调换另一来源的酶4. 退火温度偏低,退火及延伸时间偏长应提高退火温度,减少变性与延伸时间,也可采用 二种温度的 pcr 扩增以 2 度为梯度设计梯度 PCR 反应优化退火温度5. 样品处理不当6.Mg2+ 浓度偏高,因适当调整 Mg2+ 使用浓度7.若为 PCR 试剂盒,也可能时试剂盒本身质量有问题推荐使用 engreen 的 PCR 试剂盒,添 加改良的 DNA 聚合酶,大大提高扩增产物的特异性和保真性。
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