紫外光度法测定维生素C试验报告.doc

壬•事附•释辜•需回0遊 joquioooa \z uo uotstaoj [sir]NUM：血Fraihiniiiiiii!l^?：rrmixn^"亠必□-、紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量一、 实验目的1 •学习利用紫外吸收光谱测定物质含量的原理和方法；2•熟练紫外-可见分光光度计的操作二、 实验原理维生素c （VC）是一种酸性己糖衍生物，具有烯醇式己糖内酯立体结构，分D和L两种立体构型，但只有L型有生理功效维生素C具有较强的还原性，在一定条件下氧 化型和还原型可以互变•两者均具有生物活性（结构式见图1）,其C2和C3位上两个相邻 的烯醇式轻基极易解离而释放出H+,故维生素C虽然不含自由竣基，仍具有有机酸的性 质维生素C呈无色无臭的片状结晶体，易溶于水，不溶于脂在酸性环境中稳定•遇空气 中氧、热、光、碱性物质,特别是有氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时可促进其破坏 速度具有it电子的共辄双键化合物、芳香怪化合物等，在紫外光谱区都有强烈吸收，其 摩尔吸收系数k可达104-106数量级利用紫外吸收光谱进行定量分析，要借肋朗伯-比 尔定律根据维生素C在稀硫酸溶液（维生素C水溶液在pH5~6之间稳定）中，在 245 nm波长处有最大吸收的特性，建立了紫外分光光度法测定维生素C片含量的方 法。

三、 实验仪器及试剂实验仪器：容量瓶（100 ml. 1000 ml）、移液管（ml、5 ml）、烧杯、紫外分光光度计 实验用品：98%浓硫酸（分析纯，1.84g/ml）、维生素C对照品系以原料药经105 °C干燥至恒重（含量为％）、维生素C片（2片）、去离子水四、实验步骤1. 0.005 mol L1硫酸溶液的配制用ml移液管移取ml 98%浓硫酸放入事先已盛有蒸镭水的烧杯中，搅拌，冷却至室 温后移入1000 ml容量瓶，稀释至刻度，待用2. 0.5 g-L 1对照品濬液的配制精密称取105°C干燥至恒重的维生素C对照品50 mg置100 ml量瓶中，加molL" 硫酸溶液制成0.5 g-L'1对照品溶液3. 维生素C对照品标准濬液的配制用5 ml移液管精密量取0.5 g-L'1对照品溶液、、、、ml,分别置100 ml量瓶中，用mol L-*硫酸溶液稀释至刻度，摇匀，待用4 •测定波长及标准曲线以mol L-1硫酸溶液为空白，测定维生素C在稀硫酸溶液中最大吸收波长，并在此波 长处测定维生素C对照品标准溶液的吸光度，以浓度对吸光度作线性回归5.样品含量测定取维生素C片2片，精密称定，研细，精密称取适量（0.06g,约相当于维生素C 50 mg）置100 ml容量瓶中，加mol-L"1硫酸溶液适量，超声5 min使溶解，再加mol-L」硫酸 溶液至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液ml置100 ml量瓶中，加mol L- |硫酸溶液至刻度，摇匀，在最大吸收波长处测定吸光度。

6 .空白试验模拟维生素C片处方比例，精密称取辅料适量置100 ml量瓶中，与步骤5样品含量测 定同法操作，在最大吸收波长处测定吸收度为07 •回收率试验先测得2 ml样品溶液的吸光度Ai (Ci),再取0.0125 g/L的VC标液200 pl,于2 ml已测得吸光度Ai的样品溶液中，再测得吸光度A2 (C2)五、实验数据记录及处理1•维生素的吸收波长在紫外可见分光光度计上扫描测定VC标准样品的吸收光谱，结果显示VC在244nm波长处的吸光度值最大2. 维生素C对照品标准曲线标准VC浓度(g/L)Absy = x - R=3•样品中维生素C含量测定样品nivc/gAbs样品VC浓度(g/L)样品中VC含量(％)平均值(%)RSD (%)4•回收率试验先测得2 ml样品溶液的吸光度Ai (Ci),再取0.0125 g/L的VC标液200 pl,于2ml已测得吸光度Ai的样品溶液中，再测得吸光度A2 (C2) o123AtC,加入 V (0.0125 g/L) /mLa2c2回收率(%)平均回收率(%)RSD (%)六、实验结果及讨论1.维生素C还原性很强，在空气中易被氧化，在酸性介质中氧化作用减慢，水溶液在 pH = 5~6之间稳定，故本实验选用mol.L"硫酸溶液(pH =)为溶剂，维生素C稳定性 好。

2•标准曲线R二，且测定的未知样品的吸光度均落在标准曲线有效的范围内，实验结果 表明，维生素C在-0.0125 gL范围内与吸光度呈良好的线性关系3. 由于对加标回收率的原理及概念模糊，导致实验在这一环节消耗较多的时间本实验 测得维生素C的平均回收率为％,相对标准偏差为％4. 利用紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量，该法操作简便，快速，准确， 所用试剂价格低廉、易得，适合维生素C片剂含量测定的快速分析。