药物分析学：第二章 含氮类药物的分析.pptx

第二章含氮类药物的分析,要求,掌握各类药物的基本结构及主要理化性质，结构、性质与分析方法间的关系 掌握亚硝酸钠滴定法测定药物含量的原理、方法及注意事项 熟悉各类药物的鉴别、有关物质检查方法，溴量法、HPLC法的原理、方法及注意事项 了解药物中其他特殊杂质的来源和检查方法，其他含量测定方法的原理及注意事项主要内容,第一节芳胺类药物的分析 第二节苯乙胺类药物的分析 第三节芳氧丙醇胺类药物的分析 第四节苯并二氮杂类药物的分析 第五节吡啶类药物的分析 第六节吩噻嗪类药物的分析 第七节沙坦类药物的分析,1. 基本结构与代表药物,第一节 芳胺类药物的分析,一、结构与性质（Structure）,芳胺类药物分子结构中都具有对氨基苯甲酸酯的基本结构：,苯佐卡因,盐酸普鲁卡因,盐酸丁卡因,2. 主要理化性质,（1）芳伯氨基特性 具有芳伯氨基，可用重氮化-偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量2）水解特性 酯键易水解,（3）弱碱性 具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量盐酸普鲁卡因,（4）光谱特征,（5）溶解性 游离碱多为碱性油状液体或低熔点固体，难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐酸盐均具有一定的熔点，易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。

苯佐卡因,二、鉴别试验（Identification）,1.芳香第一胺反应,重氮化-偶合反应,盐酸丁卡因结构中有（），可在盐酸溶液中与亚硝酸钠反应，生成（）色沉淀，以区别于有伯胺基团药物2. 水解及水解产物反应,3. 制备衍生物测定熔点（了解）,4. 氯化物的反应（了解）,5. 紫外光谱（了解）,6. 红外光谱（了解）,7. 高效液相色谱法 （了解）,1. 盐酸普鲁卡因及其制剂中对氨基苯甲酸的检查,杂质来源：生产or贮藏 ？,三、特殊杂质检查（Purification）,ChP2010盐酸普鲁卡因及其各种制剂均采用离子对色谱法检查对氨基苯甲酸,1. 亚硝酸钠滴定法 （1）原理 具有（或潜在）芳伯氨基药物,四、含量测定（Assay）,具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定2）主要测定条件 1）加入适量KBr加快反应速率 KBr为催化剂,在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：,（1）K1,（2）K2,因为： K1 300 K2 加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速率,问：为何不直接用足量过量的KBr？,2）加过量盐酸加速反应,在不同酸中重氮化反应的速度为： HBrHCl H2SO4 HNO3,盐酸 （2.56） 加入盐酸： 重氮化反应速度加快； 重氮盐在酸性溶液中稳定； 防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果,3）反应温度 室温条件下滴定 1030 4）滴定方式与速度控制 滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定,（3）指示终点的方法 1）永停滴定法 ChP、BP,2）电位法 USP,3）外指示剂法 碘化钾淀粉糊剂或试纸 2NaNO2+2KI+4HCl 2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O,2. 酸碱滴定法,盐酸丁卡因的水溶液显酸性，在反应体系中加入适量乙醇和盐酸，用氢氧化钠滴定液滴定，电位法指示滴定终点。

3. 非水碱量法（侧链弱碱性） 非水碱量法通常是以冰醋酸为溶剂，高氯酸为滴定液测定弱碱性药物及其盐类的分析方法,4. 紫外分光光度法,5. 高效液相色谱法,第二节 苯乙胺类药物的分析,肾上腺素,多巴胺,肾上腺素,盐酸去氧肾上腺素,重酒石酸间羟胺,*,*,*,盐酸甲氧明,盐酸多巴胺,盐酸多巴酚丁胺,盐酸异丙肾上腺素,盐酸克仑特罗,盐酸苯乙双胍,第二节 苯乙胺类药物的分析,一、结构与性质（structure） 1. 基本结构与代表药物,苯乙胺类药物具有苯乙胺的基本结构，苯环上大都有酚羟基，基本结构为：,*,*,2. 主要理化性质,（1）弱碱性 具脂烃胺侧链，弱碱性，可用非水碱量法测定含量 （2）酚羟基性质 可与三氯化铁反应呈色或氧化剂氧化呈色鉴别，或溴量法测定含量,（3） 旋光性 （4）光谱特征 （5）溶解性：难溶于水 （6）取代基 如盐酸克仑特罗结构中有芳伯氨基，也可供分析用二、鉴别试验（Identification）,1. 与三氯化铁反应 2. 氧化反应 结构中含有酚羟基、邻二酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾等氧化剂氧化而显色3. 与亚硝基铁氰化钠反应 Rimini试验,具有脂肪伯胺基的化合物，在碱性条件下，与亚硝基铁氰化钠和丙酮反应，显紫色。

4. 双缩脲反应：侧链氨基醇 在强碱性条件下，与硫酸铜反应，生成紫色配位化合物，易溶于水；加乙醚振摇后，有机层应无色5. 紫外光谱与红外光谱,6. TLC与HPLC,三、特殊杂质检查（purification）,杂质来源 原料残存 检查方法 紫外分光光度法,1. 酮体的检查,检查原理 利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸光度限制酮体的量2. 有关物质的检查：苯酚氧化物 纸色谱和TLC很少，大部分都是HPLC,盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查 检查方法：纸色谱法（PC）分离后，甲醇萃取，紫外分光光度法于232nm波长处测定吸光度，控制吸光度以控制有关双胍的量,四、含量测定（assay）,1. 非水碱量法,2. 溴量法 药物中的苯酚结构，酚羟基对、邻位的氢比较活泼，能与溴发生定量反应3. 紫外-可见分光光度法（紫外区和可见区）,结构中具芳伯氨基，可发生重氮化偶合反应,分子结构中酚羟基，与亚铁离子反应,4. HPLC,本类药物极性较强，多采用离子对色谱法，调节溶液pH，可调整分离度第三节 芳氧丙醇胺类药物的分析,一、结构与性质（Structure）,1. 基本结构与代表药物,芳氧丙醇胺类药物结构中有芳环，并具有氨基丙醇侧链，基本结构为：,阿替洛尔（Atenolol）,盐酸卡替洛尔（Carteolol）,盐酸普萘洛尔（Propranolol）,氧烯洛尔（Oxprenolol）,酒石酸美托洛尔（Metoprolol）,富马酸比索洛尔（Hisoprolol）,2. 主要理化性质（character）,（1）弱碱性 （2）旋光性 （3）光谱特征 （4）溶解性,二、鉴别试验（Identification）,1. 沉淀反应：生物碱特征,例1. 盐酸普萘洛尔注射液的鉴别：取本品适量，加硅钨酸试液数滴，即产生淡粉红色沉淀。

2. 与高锰酸钾反应：不饱和键（芳环？）,例2. 马来酸噻吗洛尔的鉴别：取本品约 5mg，加水 lml 使溶解，加高锰酸钾试液3滴，紫色立即消失，加热，即生成红棕色沉淀3. 紫外光谱,4. 红外光谱,5. 色谱法,三、特殊杂质检查,1. 游离萘酚的检查,盐酸普萘洛尔中游离萘酚的检查：生产中产生，限量检查法测定,2. 有关物质的检查,酒石酸美托洛尔中有关物质的检查 ： 有关杂质结构与性质差异较大，采用TLC（正相，预平衡1h以上）和HPLC（反相）进行，采用自身对照法四、含量测定,1. 非水碱量法,本类药物的原料药大多用该法测定含量 氧烯洛尔片的含量测定也采用非水碱量法，为排除辅料的干扰，采用三氯甲烷（二氯甲烷？）提取主药，过滤后测定2. 紫外分光光度法,3. 高效液相色谱法：离子对色谱法，外标法定量（可否用内标法定量？）,第四节 苯并二氮杂类药物的分析,第四节 苯并二氮杂类药物的分析,一、结构与性质（Structure）,1. 基本结构与代表药物,目前临床应用的1,4-苯并二氮杂类药物为取代苯环与七元含氮杂环并合而成的有机药物，基本结构为：,地西泮,氯氮,三唑仑,阿普唑仑,2. 主要性质,（1）弱碱性 可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。

2）水解性（有关物质）,（3）光谱特征,二、鉴别试验,1. 化学鉴别法 （1）沉淀反应（生物碱）,例. 氯氮的鉴别：取本品约 10mg，加盐酸溶液（91000）10ml 溶解后，加碘化铋钾试液 1 滴，即生成橙红色沉淀2）水解后呈芳香第一胺反应 氯氮、艾司唑仑、劳拉西泮、硝西泮、奥沙西泮,（3）硫酸-荧光反应,（4）分解产物的反应,2. 光谱法,3. 色谱法（分离分析）,三、有关物质的检查,四、含量测定,原料药：非水碱量法 制剂：紫外分光光度法 高效液相色谱法,中间体，副产物，分解产物等第五节 吡啶类药物的分析,一、结构与性质,1. 基本结构与代表药物,吡啶类药物均含吡啶环，基本结构为：,异烟肼,尼可刹米,硝苯地平,2. 主要理化性质,（1）吡啶环,1）弱碱性 非水碱量法测定含量或沉淀反应鉴别 2）吡啶环的开环反应,（2）二氢吡啶环 1）还原性 氧化还原反应鉴别或氧化还原滴定法测定含量 2）不稳定性 其分析应避光操作，同时应检查引入的特殊杂质,（3）取代基,1）异烟肼 位上酰肼基 还原性 氧化还原反应鉴别或氧化还原滴定法含量测定 可与某些羰基试剂发生缩合反应 鉴别或比色法含量测定 酰胺键易水解引入特殊杂质游离肼,2）尼可刹米 位上酰胺基 易水解，遇碱水解后，释放出具有碱性的乙胺，能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色，故可以此进行鉴别。

3）硝苯地平 硝基具有氧化性,（4）光谱特征,二、鉴别试验,1. 吡啶环的反应,（1）吡啶环的开环反应,本反应适用于吡啶环的或位上的氢被羧基衍生物所取代的吡啶类药物1）戊烯二醛反应（knig反应）,*,*,2）二硝基氯苯反应,（2）沉淀反应,尼可刹米的鉴别：取本品2滴，加水1ml，摇匀，加硫酸铜试液2滴与硫氰酸铵试液3滴，即生成草绿色沉淀2. 二氢吡啶的解离反应,二氢吡啶类药物与碱作用，二氢吡啶环1,4-位氢均可发生解离，形成p-共轭而发生颜色变化，可用于鉴别3. 酰肼基的反应,（1）还原反应（银镜反应）,异烟肼的鉴别：取本品约10mg，置试管中，加水2ml溶解后，加氨制硝酸银试液1ml，即发生气泡与黑色浑浊，并在试管壁上生成银镜2）缩合反应,4. 分解产物的反应,5. 重氮化-偶合反应,6. 紫外光谱与红外光谱,7. 高效液相色谱法,三、特殊杂质检查,1. 异烟肼中游离肼的检查,杂质来源：原料残存、降解产生,检查方法：TLC,2. 有关物质,四、含量测定,1. 氧化还原滴定法,（1）溴酸钾滴定法,异烟肼与溴酸钾反应的摩尔比为32,（2）溴量法,异烟肼与溴反应的摩尔比为12,（3）铈量法,硝苯地平与硫酸铈反应的摩尔比为12,2. 非水碱量法,3. 紫外分光光度法,4. 高效液相色谱法,第六节 吩噻嗪类药物的分析,一、结构与性质,1. 基本结构与代表药物,*,*,盐酸氯丙嗪,盐酸异丙嗪,*,奋乃静,盐酸氟奋乃静,癸氟奋乃静,盐酸三氟拉嗪,盐酸硫利达嗪,2. 主要理化性质,（1）光谱特征 本类药物含S、N的三环共轭的大体系，S、N与苯环形成p-共轭, 一般在紫外光区具有三个峰值。

2位上的取代基（R）不同，引起吸收峰发生位移其结构中-2 价的硫，易氧化，其氧化产物砜及亚砜有四个吸收峰图 吩噻嗪及其氧化产物的紫外吸收图谱,*,*,*,*,（2）易被氧化呈色 硫氮杂蒽环上硫原子为-2价，具有还原性，易氧化呈色 （3）易与金属离子络合呈色 硫氮杂蒽环上硫原子有两对孤对电子，易与金属离子络合呈色 （4）弱碱性,*,*,二、鉴别试验,1. 紫外光谱与红外光谱,特征性强，且随取代基不同，有明显区别！ 随着取代基不同，红外光谱也有区别！,2. 显色反应 （1）氧化剂氧化显色 氧化剂 硫酸、硝酸、过氧化氢,（2）与钯离子络合显色,3. 分解产物的反应,4. 色谱法,三、有关物质的检查,易被氧化成砜类化合物，遇光分解（贮藏），以及在合成过程中的副反应等 （1）避光操作 （2）临用时配制,四、含量测定,1. 非水碱量法,利用吩噻嗪类药物10位取代基上脂烃胺基、哌啶基、哌嗪基的碱性。