还原糖的测定国标法.docx

    还原糖的测定国标法    直接滴定法测还原糖1.实验原理实验经除去蛋白质后，在加热条件下，以亚甲基蓝为指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用还原糖标准溶液标定），根据样品液消耗体积计算还原糖含量2.实验药品与试剂硫酸铜、亚甲基蓝指示剂、酒石酸钾钠、氢氧化钠、乙酸锌、冰乙酸、亚铁氰化钾、葡萄糖、氢氧化钠溶液(40g/L)碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜及0.05g亚甲蓝加适量水溶解至1000ml碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠与75g氢氧化钠，加适量水溶解，再加4g亚铁氰化钾，完全溶解后稀释至1000ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶中盐酸溶液：量取50ml盐酸加水稀释至100ml葡萄糖标液：称取1.0g干燥2h后的葡萄糖,加水溶解并加入5ml盐酸，并以水稀释到1000ml，此溶液每毫克相当于1.0mg葡萄糖3.仪器25ml滴定管、250 ml容量瓶、150ml锥形瓶、玻璃珠、真空泵、电子天平、可调电炉（带石棉板）4.实验步骤4.1 样品处理：一般食品是称取粉碎后的样品2.5~5g或吸取5～25g液体样品，置于250ml容量瓶中，加50ml水，摇匀加入5ml 乙酸锌溶液及5ml亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀。

静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用4.2标定碱性酒石酸铜溶液：吸取5.0g碱性酒石酸铜甲液及乙液，于150ml锥形瓶中加水10ml,加入玻璃珠两粒，从滴定管滴加约9ml葡萄糖或其他还原糖标液，控制在2min内加热至沸，趁热以1滴/2s的速度继续滴加葡萄糖或其他还原糖标液至蓝色刚好褪去，即为终点，记录消耗体积，平行测定3次并取平均值，计算每10ml酒石酸铜溶液（甲、乙各5ml）相当于多少葡萄糖或其他还原糖的质量（mg）4.3试样溶液预测：吸取5.0g碱性酒石酸铜甲液及乙液，于150ml锥形瓶中加水10ml,加入玻璃珠两粒，控制在2min内加热至沸，保持沸腾以先快后慢的速度，从滴定管中滴加试样溶液，病保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以1滴/2秒的速度滴定，直至蓝色刚好褪去即为终点，记录样液消耗体积4.4样品测定：吸取5.0g碱性酒石酸铜甲液及乙液，于150ml锥形瓶中加水10ml,加入玻璃珠两粒，从滴定管滴加比预测体积少1ml的试样溶液至锥形瓶中，使在2min 内加热至沸，保持沸腾继续以1滴/2秒的速度滴定，直至蓝色刚好褪去即为终点，记录样液消耗体积，平行测定3次，得出平均消耗体积。

5.计算式中：X—样品中还原糖的含量（g/100g）V—测定用样品时平均消耗溶液的体积（ml）m—试样质量（g）m1—碱性酒石酸铜溶液相当于某种还原糖的质量（mg）  -全文完-。