发酵罐操作流程.doc

发酵罐操作流程1 技术准备 发酵罐使用之前，应先检查电源是否正常，空压机、循环水系统是否能正常工作同时要检查管道是否通畅及废水废气管道的完好情况2 空消在投料前，气路、料路、发酵罐罐体必须用蒸汽进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系统处于无菌状态2.1 空消步骤打开蒸汽总开关----打开排冷凝水阀-------打开蒸汽过滤器开关------关闭预过滤器开关---打开空气精过滤器开关---打开进罐空气阀---打开空气排气阀---打开上分气包进发酵罐蒸汽阀---打开取料口进罐蒸汽阀---打开取样口排气----打开上分汽包进下分汽包阀---打开下分汽包总开关---打开下面进罐体蒸汽阀---打开接菌口和流量计出的排气阀2.2 空消注意事项2.2.1 空气管路上有预过滤器和空气过滤器，预过滤器不能用蒸汽灭菌，因此在空气管路通蒸汽前，必须将预过滤器的阀门关闭2.2.2 空消时，应将罐上的接种口、排气阀及料路阀门微微打开，使蒸汽通过这些阀门排出，同时保持罐压为0.13~0.15Mpa,空消时间为50分钟，夹层排水阀一直打开2.2.3 经常用手感受进蒸汽管道的畅通2.2.4 发酵罐空消前，应将夹套内的水放掉。

空消结束后，应将罐内冷凝水排掉2.2.5空消结束后要通入无菌风吹干管路，并且管路和罐体要始终保持正压，以免杂菌的进入3 罐体实消 实消是当罐内加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌的过程空消结束后，罐体压力降至0.03Mpa,打开罐体下面出料口排水阀排冷凝水，待排完后，关紧出料口阀门打开进料口，加入培养基，拧紧3.1 实消步骤开启机械搅拌装置---打开蒸汽总开关---打开拍冷凝水阀---打开上分气包进发酵罐蒸汽阀---打开夹层蒸汽阀---打开排气口排罐体冷空气---夹层温度达到95℃时关闭夹层蒸汽阀---打开罐体上面进蒸汽阀---打开上分汽包进下分汽包阀---打开下分汽包总开关---打开下面进罐体蒸汽阀---罐体压力达到0.15Mpa时开始计时，通过调节蒸汽阀保压30分钟3.2 实消注意事项3.2.1 打开夹套蒸汽阀、排气阀，对罐内培养基预热，当罐内温度升到95℃时，关闭夹套进气阀，打开罐内所有进气阀，通入蒸汽3.2.2 当罐压升至0.15Mpa,控制蒸汽阀门开度，保持罐压在0.13～0.15Mpa,30分钟后停止供汽3.2.3 关闭进气阀后立即通入无菌空气以维持罐内正压4 冷却接种培养4.1 操作步骤打开进夹层冷水阀---打开夹层冷却水排水阀---待温度降至设定温度时用卡式罐从接种口接菌---打开油水分离器---打开预过滤器---通过空气流量计调通气量。

4.2 注意事项4.2.1 接种时先用火焰对接种口进行灭菌，在接种口放置酒精圈，点燃后燃烧1分钟左右灭菌迅速将卡式罐连接到接种口进行接种4.2.2 培养发酵罐压力保持在0.05Mpa,根据各培养条件设定通气量5 取样与放料5.1 取样步骤 打开蒸汽总开关---打开排冷凝水阀---打开蒸汽过滤器开关---打开上分汽包进发酵罐蒸汽阀---打开取料口蒸汽阀灭菌30分钟---用无菌三角瓶在取样口取样5.2 取样注意事项用0.1Mpa左右空气压力取样，刚开始取的样弃去6 放料打开连接混合罐的放料阀---用0.1Mpa左右空气压力放样至混合罐。