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医学微生物学-病原学诊断与防治课件

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  • 卖家[上传人]:超****
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  • 上传时间:2019-04-21
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    • 1、第八章 病原学诊断与防治,医.学全.在.线,第一节 细菌学诊断 一、病原菌检测 1. 标本 标本采集与送检的原则: (1)据不同疾病以及疾病的不同时期采集不同标本 (2)严格无菌操作,避免标本被污染,医.学全.在.线,(3)尽可能在疾病早期以及抗菌药物使用前采集标本 (4)采集的标本必须尽快送检,大多数细菌标本可以冷藏送检。 (5)标本作好标记。,标本采集与送检的原则,2. 细菌形态与结构检查 (1)显微镜放大法 普通光镜 , 电子显微镜等 (2)染色法 染色剂与细菌细胞质的结合。 最常用的染色剂是盐类。,3. 分离和鉴定 鉴定的主要内容有: 培养特征、形态特征、生化反应、血清学鉴定、动物试验、药物敏感试验 4. 病原菌抗原的检测 常用的细菌学诊断的免疫学技术有: 沉淀反应、协同凝集试验、免疫荧光法、对流免疫电泳、酶免疫测定和免疫印迹技术。 5. 其他检测法,医.学全.在.线,二、血清学诊断 用已知抗原检测病人血清或其它体液中未知抗体及其量的变化,可作为感染性疾病的辅助诊断。,第二节 病毒学诊断 目前常用的病毒学诊断方法包括病毒的分离鉴定、病毒的血清学检查、病毒蛋白和核酸的检测。,一、

      2、标本的采取与送检 原则: 1. 对本身带有杂菌(如咽拭子、粪便)或易受污染的标本,要进行病毒分离培养,应使用抗生素。 2. 标本应低温保存并尽快送检。 3. 血清学诊断标本的采取应在发病初期和病后23w内各取1份血清以便对比双份血清抗体效价的动态变化。,二、病毒的分离与鉴定 (一)病毒的分离 1. 动物接种 最早的病毒分离方法 2. 鸡胚培养 按病毒种类不同接种于不同部位如绒毛尿囊膜、尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊等。 3. 细胞培养 (1)从生长方式可分 单层细胞和悬浮细胞培养,医.学全.在.线,(2)从来源、染色体特征及传代次数分 原代细胞 来源于动物、鸡胚或引产人胚组织细胞 二倍体细胞 细胞在体外分裂50100代后仍保持2倍染色体数目的单层细胞。 传代细胞系 多由癌细胞或2倍体细胞突变而来,能在体外持续传代,对病毒的敏感性稳定,(3)病毒在培养细胞中增殖的指标 细胞的变化 细胞病变、多核巨细胞、包涵体 红细胞吸附 红细胞吸附和红细胞吸附抑制现象 干扰现象 细胞代谢的变化,(二)病毒的数量与感染性测定 (三)新分离病毒的鉴定 病毒核酸类型的鉴定、理化性状的检测、形态学观察、血清学鉴定和基因

      3、测序和生物对比 三、病毒感染的血清学诊断 中和试验、补体结合试验、血凝抑制试验、凝胶免疫扩散试验,医.学全.在.线,四、病毒感染的快速诊断 (一)形态学检查 电镜和免疫电镜检查、普通光镜(查包涵体) (二)病毒蛋白抗原检查 免疫荧光技术、固相放射免疫测定、酶免疫技术 (三)特异性IgM抗体的检测,(四)检测病毒核酸 1. 核酸杂交技术 斑点杂交、细胞内原位杂交、DNA印迹杂交、RNA印迹杂交 2. 核酸扩增技术 PCR、连接酶链反应、反转录PCR 3. 基因芯片技术,第三节 真菌学诊断 (一)标本的采集 浅部感染真菌的检查: 深部感染真菌的检查: 标本采集要注意:标本量要足,标本应新鲜,严格无菌操作,医.学全.在.线,(二)病原性真菌的检查与鉴定 1. 直接镜检 不染色标本、染色标本 2. 分离培养 常用沙氏培基和改良沙氏培基(24w) 临床多用试管培养、十分重视小培养。 3. 动物实验 4. 皮肤超敏反应试验,(三) 真菌学快速诊断 血清学试验 核酸的检测 真菌毒素的检测,第四节 特异性预防与治疗(略) 一、人工主动免疫 (一)疫苗 第一代疫苗:死疫苗、活疫苗 第二代疫苗:亚单位疫苗、基因工程疫苗 第三代疫苗:DNA疫苗(基因疫苗或核酸疫苗 (二)类毒素,二、人工被动免疫 1. 抗毒素 2. 抗菌血清 3. 胎盘丙种球蛋白 4. 其他免疫制剂,三、细菌感染的治疗(略) 四、病毒感染的治疗(略) 五、真菌感染的治疗(略),医.学全.在.线,复习思考题: 1. 标本采集与送检时应注意什么? 2. 试比较人工主动免疫和人工被动免疫的不同点。 3. 用于预防病毒感染的疫苗有哪些? 4.试解释生物制品、人工主动免疫、人工被动免疫、亚单位疫苗、核酸疫苗、基因工程疫苗。,

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