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暨大生化课件第十章核酸的生物合成(生物系）

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1、第十章核酸的生物合成 1944年，半保留复制。遗传物质的基本特征是能进行复制半保留复制（：在代后以每条链为模板，按照碱基配对原则，在这两条链上各形成一条互补链。这样，从亲代个子代个子代一条链是从亲代一条则是新形成的。半保留复制 1957年半保留复制的实验证据 1963年，用氚标记的胸苷复制近两代，放射自显影，未复制部分银密度低，由一条放射链和一条非放射链组成；已复制部分有一条双链是放射的，一条双链有一半是放射的。这证明大肠杆菌半保留方式复制。半保留复制的实验证据 1956年，）。 70 71年分离出和。 1999年发现、，涉及错误倾向修复以四种需要模板指导需要有引物 3 3 产物大肠杆菌小片段 /323 核酸外切酶活性大片段 /段 / 6043 聚合 / 5 核酸外切 N 端 C 端木瓜蛋白酶真核生物有、、（线粒体）、、五种核、完成；最初认为相当于聚合酶，现认为主要用于引发（因为无校正功能，仅其有引发功能）；能持续合成，且有校正功能。相当于，主要起修复作用，位于线粒体，为修复酶。使双链需供能

2、，细菌用物和噬菌体用成焦磷酸键的活化形式，再由 3羟基发动亲核攻击，形成磷酸二酯键。大肠杆菌的连接酶作用于粘末端，过程除了需要酶的催化之外，还需要适量的引物和镁离子的参与。催化这个反应的酶也有多种，除有引发酶），扑异构酶、解螺旋酶及单链结合蛋白多种蛋白质因子参与。复制的起始复制的起始点：从此特定部位称为复制起始点（ of ，可以用原核生物常只有一个起始点，，由 245个，非常保守。真核生物的染色体有多个复制起始点。）点处子链 11个）较长时间保持未甲基化。半甲基化的有当链被能有效地与始新一轮的在复制起始部位将合于起始位点，并促使解链。成引发前体，然后定和保护单链。引物酶 (入并与引发前体结合生成引发体（白、引物酶和。引发体中的引物酶催化成引物。型为主 )在解链前方理顺弛正超螺旋。原核生物拓扑异构酶 :切断闭切口，反应不需拓扑异构酶 :切断用接断端。、 5 3 5 复制的引发形成引发体和引物含有解螺旋酶、物酶和复制的方向：一般为双向复制。合成的开始与甲基化有关，由甲基化酶起始

3、相关蛋白，、、、等复制时需要解螺旋酶和拓扑异构酶来解链的。单链结合蛋白 (与解开的单链结合，防止复性和水解复制有一些特殊方式。滞后链、冈崎片段与不连续复制复制叉由 5向 3方向连续复制，称为前导链；另一条链复制叉由 3向 5移动，称为滞后链。滞后链的复制中，形成许多不连续片段，称为冈崎( 片段。冈崎片段连接成完整的引物合成酶由 5向 3方向合成聚合酶在引物 3 聚合酶切除引物，填补空白向导链滞后链冈崎片段 5 5 3 3 5 3 保留的半不连续复制其他复制滚环复制粒体端粒和端粒酶的发现 30年代，端粒。 1972年 1984年，限增殖）具有重建端粒的酶端粒酶。端粒端粒是真核生物线性染色体的两个末端所具有的特殊结构 , 其共同特点是一条链上富含 T、G 短序列的多次重复 , 而其互补链上富含 A、 C。功能：维持染色体的稳定性；保证染色体末端端粒酶( 端粒酶由有模板和逆转录酶两方面的作用多莉与细胞的死亡爬行模型动画演示多聚酶链式反应聚合链式反应（ K. 985年发明。是一种在体

4、外快速扩增特定基因或称为基因的体外扩增法。 1993年获得诺贝尔奖变性 4 变性，形成两条单链。退火反应体系降温至 50，模板延伸反应体系升温至 72 ，耐热引物的指导下，复制出互补的一种 n 2l n 10 n 物 F（ 2 M） n 物 R（ 2 M） n 5U/l） n 15 n 13l 混匀，放入 94 ，预变性 5分钟 94 ，变性 1分钟 55 ，退火 1分钟 72 ，延伸 1分钟 72 ，延伸 5分钟 30个循环一种生物因素、物化因素均可导致 1. 物理因素紫外线、电离辐射、 2. 化学因素烷化剂、碱基或核苷类似物、亚硝酸盐及亚硝胺、代谢活化化合物（苯并笓、黄曲霉毒素等）以上物理及化学因素统称诱变剂。 3. 生物因素起突变。复制时的碱基错配，互变异构、碱基脱氨、碱基丢失。主要有五种修复系统：错配复活（直接修复（切除修复（重组修复（易错修复（错配复活 ( 原核细胞内存在使 5的复制后分钟）为半甲基化的细胞错配系统能区别新链与旧链。向移动形成突环至核酸内切酶（未甲基化的开切，重新合成（直接修复（光复活酶可被可见光激活，分解 6上的甲基，恢复正常的鸟嘌呤。 66上的甲基切除修复（是细胞内最重要和有效的修复机制，主要由连接酶完成。多种特异的核酸内切酶，识别其附近将由外切酶将损伤链切除，由聚合酶以完整链为模板进行修复合成，最后有连接酶封口。重组修复稀释错误此过程也叫复制后修复。重组修复中原损伤没有除去，若干代后可逐渐稀释。所需要的酶包括与重组及修复合成有关的酶。易错修复（细胞求得生存而出现的应急效应。紫外线照射过的受紫外线照射过的噬菌体感染时存活率高。易产生差错修复 . 逆转录（以指导逆转录酶催化进行。 1964年 1970年鸡 )劳氏肉瘤病毒和小白鼠白血病病毒等致癌 1

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