
兽医流行病学课件:血清流行病学
23页1、,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,血清流行病学,1.,概述,一、定义:血清学,(,免疫学,),和流行病学原理和方法来研究血清中特异抗体的产生和分布规律,阐明疾病在畜群中的分布与原因,并在采取相应措施后,检验其效果。,血清中物质:生化测定、抗体测定,二、用途:,1.,查明疾病在动物群体中流行情况,特别是隐性感染为主疾病,需用血清学方法;,2.,探讨某些疾病的地理分布,3.,检查疫苗免疫效果;,4.,病因研究,特别是爆发传染病时,比较发病初与康复期双份血清,效价升高,4,倍有诊断意义。,5.,疾病监测与预报;用于疾病消灭计划中,淘汰阳性,建立健康畜群。,三、方法,(一)调查方法,短期调查:作为诊断用,从群体中随机采集一定量样本检测,另一种是暴发时采双份血清比较;,长期调查:确定疾病的时间、空间和畜群间分布情况,血清学监测,建立健康群时均用到;对于疫苗免疫为主的疾病,需监测母源抗体的影响。,(二)检测方法:,1.,凝集类,2.,沉淀类,3.,补体反应类,4.,标记类,(三)分析方法:结果与正常参考水平比较;,2.,血清抗体的测定,一抗体
2、量的表示法,血清转阳:由阴性变为阳性;,1,、稀释度的对数转换 血清稀释时通常以几何级数,(,常用倍比稀释,),,平均滴度常以几何均数计算,并使样本的分布趋向正态分布。,表示滴度的方法:,直接表示或倒数,.,Log2,平均滴度,(,1,)算出,对数滴度,的算术平均数,-,即对数平均滴度,.,(,2,)对数平均滴度的反对数,-,即几何平均滴度;,以表,11-1,为例:,(0+1+2+3+4+5+6)/7=21/7=3,对数平均滴度,二抗体测定,1.,单个稀释度测定,:均只作一个稀释度,如,ELISA,最后比较,OD,值;,2.,单系列稀释测定,:作若干个稀释度,但每个稀释度均只测一次;如,HA,或,HI,;,3.,多,系列稀释测定,:作若干个稀释度,但每个稀释度均有多个重复管(孔、头)需测几次,以求得更准确的滴度。,例如,TCID50,、,LD50,、,EID50,,以可出现感染、死亡等指标为判定标准,常用,50%,为判定终点。,TCID50,计算,表,11-2,,说明中和效价的计算方法,不过,在病毒学中通常用,Reed-Muench,二氏法计算,见以下内容,结果都一样。,血清,稀释度,
3、稀释系数对数,10,x,细胞,病变,正,常,累计和,病变,正常,病变比例,保护率,%,1/1,0.00,0,5,0,26,0/26,100,1/2,-0.3,0,5,0,21,0/21,100,1/4,-0.6,0,5,0,16,0/16,100,1/8,-0.9,1,4,1,11,1/12,99.2,1/16,-1.2,1,4,2,7,2/9,78.8,1/32,-1.5,3,2,5,3,5/8,37.5,1/64,-1.8,4,1,9,1,9/10,10,1/128,-2.1,5,0,14,0,14/14,0,计算,1.,距离比例(高于,50%,保护率,50%,的保护率),(高于,50%,保护率低于,50%,的保护率),(,78.8,50,),(,78.8,37.5,),0.697,2 .Log,10,ED,50,=,高于,50%,保护率的血清稀释度对数距离比例,稀释系数的对数,1.2,0.6970.3,1.01,ED50=,1.01,的反对数为(?),三,畜群中血清抗体水平的估计和比较,检测抗体存在否?抽样检查,按结果分为阳、阴性两类,此时涉及暴露水平,样本量大小、所用检查的方法。,抗体水平的比较,第三节 血清学试验的解释,精密性(,refinement,),抗原成分存在精密性:型、亚型、毒株之分;,取决于:,试验方法的精密性;,所用抗原的性质;,所测抗体的类型,二、准确性(,accuracy,),1,阳性结果:,真阳性:实际感染;,假阳性:交叉反应、非特异性反应(尤其是血清高浓度时);故血清学反应中通常要将被检血清作一系列的稀释;,2,阴性结果,真阴性:未有感染或免疫耐受;,假阴性:采血时间不当,抗体尚未出现;试验选择不当;非特异性抑制物;不完全抗体或封闭抗体;试验不敏感;,三、敏感性和特异性,上图:左移虚线,特异性下降,假阳性增加;,下图:左移虚线,敏感性增加,假阴性下降;,初筛时趋向于使敏感性增加;,第,13,章 分子流行病学,研究内容,传染病(病原分类、传染源、传播途径、进化分析、耐药性),肿瘤、心血管病、遗传代谢病,研究方法,核酸电泳图谱分析、,核酸酶切图谱分析、,寡核苷酸指纹图谱分析,基因探针和核酸杂交,PCR,核酸序列分析,其他技术,
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