执业兽医资格考试：微生物与免疫学四色笔记

执业兽医资格考试兽医微生物学与免疫学四色笔记第一单元 细菌的结构与生理(一)细菌的形态1.细菌的概念 具有细胞壁和核质的单细胞原核细胞型微生物无成形的细胞核，无完整的细胞器以微米为测量单位在固体培养基上培养，肉眼可见菌体集落二)细菌的基本结构1.细胞壁结构(1)G+菌 ①肽聚糖 又称黏肽为聚糖骨架； 原核生物细胞特有②磷壁酸 G 菌特有；其抗原性较强黏附宿主细胞2)G-菌 ①肽聚糖②外膜A.外膜蛋白 脂蛋白、微孔蛋白B.脂质双层C. 脂多糖类脂A 内毒素成分核心多糖 具有属特异性特异性多糖 具有种、型特异性③周浆间隙 外膜与细胞膜之间，可获得营养、解除毒性3)细胞壁的功能①维持固有形态；②物质交换；③携带有抗原决定簇；④与致病性有关4)革兰氏染色①G菌 染为紫色；+②G-菌 染为红色2.细胞膜组成为脂质双层，并镶嵌有特殊功能的载体蛋白和酶类，不含胆固醇功能①物质交换；②分泌胞外酶；③能量的产生与利用有关；④细胞生物合成的场所3.细胞质基本成分 水、蛋白质、脂类、核酸、少量无机盐有形成分①核糖体 由RNA和蛋白质组成，是蛋白质合成场所②质粒 细胞染色体外的遗传物质，为双股DNA分子种类F质粒 决定细菌的致育性。

R质粒 决定耐药性毒力质粒 决定致病性4.核体 染色体，裸露的双链DNA三)细菌的特殊结构1.荚膜①为黏液样物质；②为多糖或多肽或透明质酸；③在营养品丰富时才形成；④能抵抗吞噬；⑤有特异性抗原性1 2.鞭毛①细长波浪状物；②成分为蛋白质；③能运动(沙门菌);④有特异的H 抗原；⑤与黏附有关3.菌毛①普通菌毛 有黏附功能；②性菌毛 F 菌毛，成分为蛋白质；与细菌的接合和F 质粒的转移有关4.芽孢①一定条件下胞质脱水浓缩形成；有多层膜包裹；抵抗力强②通透性低；③有完整核质和酶系统；④代谢静止；不能分裂繁殖，是细菌的休眠状态⑤灭活方法 160℃干热灭菌或高压蒸气灭菌四)细菌的染色方法1.革兰氏染色法(1)程序草酸铵结晶紫染色1min→碘液染1min→95%乙醇脱色30s→碳酸复红 1min2)意义 鉴别细菌、选择抗菌药物2.瑞氏染色法 将细菌染成蓝色；组织细胞的细胞核染成蓝色；背景和细胞浆染成红色3.特殊染色法 包括抗酸染色法、芽孢、荚膜、鞭毛染色法1)抗酸染色法 常用于结核杆菌、副结核杆菌的染色 红色①顺序石碳酸复红微热3—5min→3% 盐酸酒精脱色→碱性美兰复红1min五)细菌的生长繁殖1.细菌的生长的基本条件①营养物质；②酸碱度 最适宜pH 为7.2～7.6;③温度 最适宜为37℃;④气体 O₂、CO₂;⑤渗透性。

2.细菌个体的生长繁殖 世代时间是指一个菌体以二分裂方式繁殖为两个菌体所需的时间3.细菌群体的生长繁殖 细菌的生长曲线分为四个时期①迟缓期菌体增大，代谢活跃；分裂迟缓，细菌数增加不显著②对数期 活菌数对数直线上升；生物活性典型，观察细菌形态、染色性、生物活性最佳；对抗生素敏感③稳定期 新繁殖的活菌数与死菌数平衡；产生芽孢、外毒素等④衰亡期死菌数超过活菌数；菌体形态改变六)细菌的代谢1.细菌的基本代谢过程(1)代谢的能量供给来源 ATP;(2)细菌代谢活动的核心能量代谢3)细菌获得能量的基质糖类，贮存能量的形式 高能磷酸键 (ADP、ATP)4)细菌生物氧化的类型①发酵以有机物为受氢体②呼吸以无机物为受氢体其中，a有氧呼吸 以分子氧为受氢体b厌氧呼吸 以无机物(硝酸盐、硫酸盐)为受氢体2.细菌合成的代谢产物①致热源 (操作时严格注意无菌操作)②毒素内毒素为G 菌死后释放，外毒素为G'菌分泌的蛋白质2 ③侵袭性酶类 透明质酸酶(促使细菌扩散)④色素铜绿假单胞菌产绿色色素⑤细菌素仅对近缘菌株有抗菌作用的蛋白质，如绿脓菌素⑥抗生素 多由放线菌和真菌产生⑦维生素大肠杆菌能合成维生素 B、维生素 K。

3.细菌的分解代谢试验试验名称①氧化发酵试验阳性菌产酸产气(大肠杆菌)阴性菌产酸不产气沙门氏菌肠科杆菌②氧化酶试验③过氧化氢酶试验④硫化氢试验⑤尿素酶试验⑥吲哚试验紫色(假单胞菌、气单胞菌)产气泡(葡萄球菌、微球菌)黑色(变形杆菌)链球菌大肠杆菌红紫色(变形杆菌)沙门菌红色(大肝杆菌、变形杆菌)红色(大肠杆菌)⑦甲基红试验(MR)⑧VP试验产气杆菌红色(产气杆菌)大肠杆菌⑨枸橼酸盐利用试验(C)⑩IMVC试验深蓝色(产气杆菌)大肠杆菌大肠杆菌++——产气杆菌一—++(七)细菌的人工培养1.培养基 (理化性状) 分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基其中，固体培养基 含 2%琼脂；半固体培养基 琼脂含量0.5%2.培养基的分类 (营养组成和用途)(1)基础培养基 常用普通肉汤培养基，含蛋白胨、牛肉浸膏、NaCl、水等；常用于糖发酵试验2)营养培养基 在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏等；常用血琼脂平板(链球菌) (3)选择培养基 麦康凯培养基抑制G'生长，利于大肠杆菌、沙门氏菌生长4)鉴别培养基 另加入底物及指示剂，而鉴别细菌5)厌氧培养基 常用疱肉培养基；即在肉浸液中加入煮过的肉渣，用凡士林封口。

2.细菌在培养基中的生长现象(1)液体培养基生长现象①混浊生长葡萄球菌；②沉淀生长链球菌；③菌膜生长枯草杆菌2)半固体培养基中的生长现象 沿穿刺线生长或穿刺线向四周扩散呈放射状生长3)固体培养基中的生长现象 平板上划线后形成菌落；斜面上划线重叠形成菌苔第二单元 细菌的感染(一)正常菌群1.动物体内正常菌体的分布(1)消化道球菌、乳杆菌、棒状杆菌；①胃乳杆菌、幽门螺杆菌、八叠球菌；②反刍前胃 无芽孢的厌氧菌；③小肠有消化液故细菌少；④大肠双歧菌、拟杆菌；肠球菌、大肠杆菌、乳杆菌、葡萄球菌、酵母菌；(2)呼吸道①鼻、咽 葡萄球菌；②喉、扁桃体 甲型链球菌、卡他球菌；③正常时支气管和肺泡无菌3)泌尿生殖道3 ①阴道 乳杆菌；葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌②尿道口 葡萄球菌、棒状杆菌；2.正常菌群的生理作用 ①生物颉颅作用； ②营养作用；③免疫作用二)细菌的致病性1.细菌致病性的确定 柯赫法则是确定某种细菌是否具有致病性的主要依据 其要点①特定的病原菌应在同一疾病中可见，在健康者不存在；②此病原菌能被分离培养而得到纯种；③此病原菌纯培养物接种易感动物能导致同样病症；④自实验感染的动物体 内能重新获得该病原菌的纯培养物。

2.细菌的毒力因子(1)侵袭力①黏附因子F1 菌毛无特异性； F4 菌毛 (K88) 黏附猪小肠前段； F6 菌毛(987P) 黏附猪小肠后段②侵袭性酶透明质酸酶、链激酶(链球菌产生)、胶原酶(梭菌、气单胞菌产)、血液凝固酶(致病葡萄菌产生)③Ⅲ型分泌系统沙门氏菌、大肠杆菌等④干扰宿主防御荚膜 抵抗吞噬；细菌表面蛋白 抗吞噬，避免抗体、补体作用；蛋白酶细胞内逃逸(如产生过氧化氢，中和吞噬细胞中的氧自由基)2)毒素①外毒素 由 G 菌及少量G (如产毒性大肠埃希氏菌)产生；外毒素经0.3%甲醛处理，转为类毒素，刺激机体产生抗毒素；神经毒素包括破伤风毒素、肉毒毒素②内毒素是G 菌细胞壁的脂多糖，当细菌死亡后才游离出来；产生症状发热、毒血症、休克、管内凝血、出血3.细菌的侵入数量、途径与感染破伤风梭菌及其芽孢必须侵入缺氧的深部创口才能致病4.临床上常见的全身感染的类型①菌血症 病原菌侵入血，但不繁殖②毒血症病原菌不入血，但其产生内毒素入血，引起症状③败血症病原菌入血，并繁殖产生毒性物质，引起中毒症状(高热、皮肤黏膜淤斑、肝脾肿大)④脓毒血症 化脓性细菌入血并繁殖，产生新的化脓灶三)细菌的耐药性药敏试验结果判定标准①敏感用常用剂量时，该抗菌药物治疗有效。

②中介指被测菌株的MIC 与该抗菌药物常用剂量所能达到的血清和组织浓度相近③耐药指被测菌株不能被该抗菌药物常用剂量达到的血液浓度所抑制，临床治疗无效第三单元 细菌感染的诊断·1.样品保存液 30%无菌甘油缓冲盐水(细菌)、50%无菌甘油缓冲盐水(病毒)2.利用生化反应对肠道杆菌进行鉴定是必不可少的步骤3.特异性IgM抗体，可进行早期诊断4.聚合酶链式反应 (PCR) 主要扩增DNA 5.RT～PCR 主要扩增RNA, 主要是病毒第四单元 消毒与灭菌◎热力灭菌 干热和湿热灭菌；在同一温度下湿热效果好◎高压蒸汽灭菌法(121.3℃,15~30min) 是应用最广、效果最好的方法◎煮沸法 100℃ 30min左右，2%碳酸钠提高沸点◎巴氏消毒法 葡萄酒、牛奶等消毒，低温长时间(60°℃30min)、高温短时间(70°℃15s)、超高温瞬时间(132℃1~2s)◎热空气灭菌法 160℃,2 h◎紫外线265~266nm, 表面消毒(穿透力弱),空间消毒4 ◎电离辐射 “冷灭菌”,穿透力强，医用塑料制品消毒◎滤过除菌 0.22~0.45μm, 不能除去病毒、支原体◎过氧乙酸 过氧化物类， 不属于酸类◎氢氧化钠(烧碱) 2%水溶液杀灭繁殖体和病毒，4%溶液45min杀灭芽孢。

一般配成20%的石灰乳涂刷厩舍墙壁、畜栏及地面消毒熏蒸消毒，温度应不低于15℃,相对湿度60%~80%乙醇(75%)、碘酊(2%)季铵盐类(改变细菌细胞壁或细胞膜通透性，常用浓度0.1%左右)第五单元 主要的动物病原菌◎球菌链球菌，α溶血(不完全溶血)、β溶血(完全溶血)、γ溶血(完全不溶血)◎猪链球菌 1、2、7、9型是致病菌，2型最常见；斑马鱼是动物模型◎蜜蜂的病原 欧洲幼虫腐臭病 (蜂房球菌)、美洲幼虫腐臭病 (拟幼虫芽孢杆菌、“巨鞭”)、白垩病(蜜蜂球囊菌、真菌、孢囊深墨绿色)◎蚕的病原 白僵病 (白僵菌、真菌、可观察到大量的菱形结晶)、质型多角体病毒(病毒、呼肠孤病毒科)、核型多角体病毒(病毒、杆状病毒科)◎肠杆菌 大肠杆菌和沙门氏菌◎大肠杆菌麦康凯培养基(发酵乳糖)红色菌落；伊红美蓝琼脂黑色带金属闪光的菌落；引起的常见疾病◎沙门氏菌麦康凯培养基(不发酵乳糖)无色透明菌落；专嗜性沙门氏菌、偏嗜性沙门氏菌、泛嗜性沙门氏菌(鼠伤寒沙门氏菌);引起的常见疾病◎巴氏杆菌科及相关属 多杀性巴氏杆菌(两极着色)、引起的常见疾病生出血性败血症 巴氏杆菌；牛肺疫(牛传染性胸膜肺炎) 支原体猪出血性败血症(猪肺疫) 巴氏杆菌；猪传染性胸膜肺炎放线杆菌猪萎缩性鼻炎 巴氏杆菌+支气管败血波氏杆菌◎鸭疫里氏杆菌 雏鸭传染性浆膜炎；2~3周龄雏鸭；引起的疾病病理变化与禽大肠杆菌类似(三炎)◎嗜血杆菌副猪嗜血杆菌、巧克力培养基、X 因子和V 因子、格氏病◎猪胸膜肺炎放线杆菌 巧克力培养基、V因子、CAMP试验阳性◎布鲁氏菌人畜共患(波浪热),病原局限于腺体组织和生殖器官(赤鲜醇)、胞内菌。