睾酮检测标准操作流程
4页1、概述雄性激素睾酮(17-羟雄烯二酮)的分子量为288道尔顿。男性体内的睾酮几乎全由睾丸间质细胞合成。分泌受黄体生成素(LH)的调整,并负反馈影响垂体-下丘脑的调整机制。睾酮促进男性其次性征的形成,维持前列腺和精囊的功能。血循环中的睾酮绝大部份与载体蛋白质结合(如性激素结合球蛋白(SHBG)。女性的卵巢可产生少量睾酮。生理水平浓度的雄激素对妇女没有特殊的作用。女性雄激素水平的上升可导致男性化(取决于雄激素水平的增加程度)。检测女性体内睾酮含量有助于诊断雄激素综合征(AGS)、多囊性卵巢(Stein-Leventhal综合症)以及怀疑卵巢肿瘤、肾上腺肿瘤、肾上腺发育不良或卵巢功能障碍时。检测男性体内睾酮含量可用于诊断睾酮产生不足的疾病,如性腺发育不足、雌激素治疗、染色体异样(如Klinefelter综合征)和肝硬化。1 目的规范睾酮检测测试,确保检测结果精确性和重复性。2 检测方法和原理2.1检测方法:竞争法2.2检测原理:ADVIA Centaur睾酮检测是一种竞争性的免疫测定方法,运用干脆化学发光技术。病人样品中的睾酮与标记试剂中经过吖啶酯标记的睾酮共同竟争有限量的与单克隆小鼠抗兔抗体
2、结合的多克隆兔抗睾酮抗体,前者在固相试剂中结合到顺磁性颗粒上。检测过程中,运用睾酮释放剂将样品中的结合睾酮从结合的蛋白质上释放出来。3 标本采集与爱护簇新无溶血血清遵守以下举荐的血清标本处理,运行和储存步骤3.1用真空采样管采集血液标本时须遵守常规留意事项3.2离心前使标本完全自然形成凝块3.3全程保证样品管的密闭状态3.4尽快分别血清,并刚好测定3.5假如标本不能在24小时内检测或运输标本时,将标本保存在4或更低温度的环境中:3.6冷藏标本室温放置20分钟后再测定;3.7冷冻标本室温解溶后放置20分钟后再测定3.8不符合标本处理3.8.1溶血和乳糜血标本在报告单的备注栏注明3.8.2标本量过少的标本,严峻溶血和乳糜血标本与临床沟通并将标本退回,填写不合格标本拒接登记。4 试剂和设备4.1试剂SIEMENS原装配套试剂4.1.1试剂组成标记试剂:2.5mL/盒,用吖啶酯标记的睾酮(3.2ng/mL), 置于含防腐剂的缓冲盐水中。固相试剂:15.0mL/盒,在磷酸盐缓冲液中结合到单兑降小鼠抗兔抗体(0.53g/mL)的多克隆兔抗睾酮抗体(0.03g/mL),前者通过共价键结合到顺磁性颗粒
3、上,含叠氮化钠(0.1%)和防腐剂。探针冲洗液:10.0mL/盒,含叠氮化钠(0.1%)和防腐剂的缓冲盐溶液。释放剂:5.0mL/盒,类固醇释放剂(0.1g/mL),其置于含叠氮化钠(0.1%)和防腐剂的缓冲液中。4.1.2试剂打算:手工混合全部试剂包。肉眼检查试剂底部以确保全部颗粒分散匀称并处悬浮状态,然后将混合物载入系统干脆运用 4.1.3试剂保存试剂28避光保存,并保持竖直向上4.2质控品SIEMENS原装配套质控品4.3校准品SIEMENS原装配套标准品。4. 4警告和留意事项4.4.1只可用于体外诊断;试剂中含有叠氮钠,请当心处理,请勿吞服或与皮肤粘膜接触!叠氮钠在与铜或铅等重金属接触后会产生有毒的叠氮化物;4.4.3试剂盒的测定结果仅作为临床各种疾病的协助诊断依据4.5仪器ADVIA Centaur CP 全自动化学发光免疫分析仪5 操作程序5.1检测过程流程签收样品离心上机检测审核报告签发报告标本保存5.2样本签收严格按标本接收程序签收标本5.3标本处理以3000r/min,离心610min,分别血清上机测定,若标本不能刚好检测,将分别血清冷藏于28的冰箱内5.4标本检测
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