七氟烷对成年大鼠学习记忆及海马齿状回nestin和GFAP表达的影响.pdf

l -t●徐州医学院硕士学位论丈缩略词B r d UD GG F A PM A CM W MN S C sP B SP O C DP K AS e v oS G ZS V Z缩略词表A b b r e v i a t i o n‘+ 英文全称中文全称5 - b r o m o d e o x y u r i d i n e5 ．溴脱氧尿核苷d e n t a t eg y r u s齿状回g l i a lf i b r i l l a r ya c i d i cp r o t e i n ，G F A P神经胶质原纤维酸性蛋白m i n i m u ma l v e o l a rc o n c e n t r a t i o n肺泡气最低有效浓度M o m sw a t e rm a z eM o m s 水迷宫n e u r a ls t e mc e l l s神经干细胞p h o s p h a t eb u f f e r e ds a l i n e磷酸盐缓冲液p o s t o p e r a t i v ec o g n i t i v ed y s f u n c t i o n术后认知功能障碍p r o t e i nk i n a s eA蛋白激酶As e v o f l u r a n e七氟烷s u b v e n t r i c u l a rz o n e海马齿状[ 口l 颗粒下区s u b v e n t r i c u l a rz o n e侧脑室的室管膜下区徐州医学院硕士学位论丈七氟烷对成年大鼠学习记忆及海马齿状回n e s t i n 和G F A P 表达的影响中文摘要目的探讨连续吸入I M A C 七氟烷对成年大鼠学习记忆及海马齿状回巢蛋白( n e s t i n ) 和神经胶质原纤维酸性蛋白( g l i a lf i b r i l l a r ya c i d i cp r o t e i n ，G F A P ) 的影响。

方法将1 8 只雄性S D 大鼠经过M o r r i s 水迷宫训练2d 筛选后，随机分为空白组( 未经任何处理) 、载广携l ( 吸氧2h ) 和七氟烷组( 1 M A C 七氟烷吸入麻醉2h ) 每天吸氧或七氟烷2h ，连续5d 每天吸氧或七氟烷处理结束后，用M o r r i s 水迷宫实验行学习记忆能力测试，记录逃避潜伏期和跨越平台次数来评定其学习记忆能力的变化M o r r i s 水迷宫测试完毕后处死大鼠，取大鼠脑组织分别应用免疫组织化学和免疫荧光化学方法检测大鼠海马n e s t i n 和G F A P 的表达结果用M o r r i s 水迷宫测试大鼠学习记忆能力结果显示，空白组、载气组和七氟烷组平均逃避潜伏期分别为l O ．2 ±3 ．2s ，l O ．5 ±2 ．3s 和1 7 ．9 ±2 ．9s ，跨越平台次数分别为7 ．8 ±1 ．7 ，7 ．3 ±1 ．9 和3 ．7 ±1 ．1 空白组与载气组比较，平均逃避潜伏期和跨越平台次数差别无统计学意义( 尸> O ．0 5 ) ；而七氟烷组与空白组和载气组比较，平均逃避潜伏期较空白组明显延长7 7 ．4 ％，较载气组明显延长7 0 ．5 ％( P O ．0 5 ^ 七氟烷组与载气组和空白组相比较，n e s t i n 阳性细胞数明显减少( 尸 O ．0 5 ) 。

七氟烷组海马C A l 区和齿状刚有较稀疏的G F A P 阳性2徐州医学院硕士学位论文细胞表达，与空白组相比较明显减少( P O ．0 5 ) ．T h en u m b e ro fn e s t i n - p o s i t i vc e l l ss e v o f l u r a n eg u o u pi ss i g n i f f i c a n t l yl o w e rt h a no t h e rg r o u p s ( P 0 ．0 5 ) ；而七氟烷组与空白组和载气组比较，平均逃避潜伏期较空白组明显延长7 7 ．4 ％，较载气组明显延长7 0 ．5 ％( 尸 O ．0 5 ) ，七氟烷组与载气组和空白组相比较，n e s t i n 阳性细胞数明显减少( P O ．0 5 ) 七氟烷组海马C A I区和齿状回有较稀疏的G F A P 阳性细胞表达，与空白组相比较明显减少( P < 0 ．0 5 ) ，分别是空白组的5 0 ．O ％和4 1 ．2 ％，与载气组相比较明显减少( P < 0 ．0 5 ) ，分别是载气组的5 4 ．1 ％和4 4 ．1 ％。

见表4 和图4 ，6 ，7 ) 1 2堡型垦茎堕堡主兰堡垒墨讨论术后认知功能障徉} 足指患者在麻酐于．术后} } { 现的中楸神经系统并发症，其临床特点为学爿记忆能力减退、焦虑、语占理解能力和社会融合能力减退I 博I 关FP O C D 的病[ 犬l 很复杂，术f j i 『应用抗胆碱类药、患占‘年龄、术自订基础疾病、手术类型、麻醉持续时M 、受教自稗度、嘲术期低f f I L 瓜、手术m 血畦等郜町能弓P O C D 的发，卜有天【2 ．4 1 f if j ，J ．P O C D 的病【大J 和发病机制还不十分清楚，除了年龄足P O C D 苣嘤的发病[ 大J 素外，令身麻醉约也足引起P O C D 的1 t 要诱【大】之4 七氟烷分配系数低，麻酐诱导迅速，深度窬埸拧制，恢复苏眸快而完令，七氟烷是目自，J - 临床卜比较理想的吸入麻酐药之·㈣f } l 近年来临床和’丈验审报道L 氟烷麻醉町引起术后早期短暂认矢| J 功能降f l 寻陈益{ i 葛选择择期行f ：腹部F 术中老年( 6 5 “ - - “ 7 9 岁) 患肯，术中吸入L 氟烷，’冰瞍以确保眦状态指数( c e r e b r a ls t a t ei n d e x ，C S I ) 值往4 0 “ - ' - 6 0范围，f } J 确易智力测试( M i n i ．m e n t a ls t a t ee x a m i n a t i o n ，M M S E ) 评分测最术后麻醉。

恢复及认知J 力能情况结果硅示患者术后6h 的M M S E 评分显蒋降低，说明乙氟烷叮影响老年患苦‘的认知状念I 旧I 张7 ‘i 蓉等将6 0 例择期{ r 腹腔镜卜．胂囊切除术的老年病人分为L 氟烷和肄氯烷两绀，两钎l 麻酹诱导方法相F i 】，插管后两缎【分别吸入七氟烷和异氟烷，麻酹诱导日，J I 及拔管^ jl 、2 、3 小t l , ，均应用M M S E 测试疗法评定其认知J 力能结果娃示，‘j 术前相比，两组病人拔锊后1d , H , J 的M M S E 值均明显降低提，J ÷L 氟烷和肄氟烷均叮能影响老年病人令身麻醉术后早期认知功能1 2 0 I C u l l e y 等给老龄( 18 个，} j ) 人鼠I 吸入1 ．2 ％异氟烷‘j7 0 ％氧化亚氮／3 0 ％氧广e 的混合气体麻醉2h ，结果砬示l ￡对麻酐日订已纤建覆的窄I ’日J 操作能力的提高5 曼蔷低f 对照组，n 这种损伤一直持续8 蒯之久；州时通过监测J f I L f j i 和血气排除了} } J 麻醉朗I ’日J 低血压或缺氧对脑损伤的叮能性，故推测对大鼠址忆产生影响的原【大1 足1 吸入的麻酹药物【2 ¨。

刘毓和等给老年大鼠反复吸入3 ％L 氟烷，并测定认知功能的变化研究．显示七氟烷町导敛一过性的认知功能障碍，表现为剑达、H - 台的潜伏期延长、撤徐州医学院硕士学位论丈去半台后存i F f ；象限的i I t 动t } , j l ' u J 缩短．而2 ％．匕氟烷反复吸入后‘j 对照组相似，尤此变化，提尔匕氟烷对学爿记忆的影响} } 钉剂舒依赖·I { ，l ：1 2 2 之3 i 我们给大鼠连续5d 每天2h 吸入L 氟烷，然后用M o r r i s 水迷宫实验检测学习记忆能力的变化结果瞳示，七氯烷组比对照绀人鼠第4 ，5 大逃避潜伏期明砬延长说明连续匕氟吸入烷麻酹人鼠，叮致其学爿畦忆能力F 降吸入麻肼药引起学爿记忆能力的原冈和机制相、’复杂，既仃神经递质和受体机制，也仃神终细咆内蛋r I 质变化和细胞凋C ：的机制．L 氟烷对N M D A 受体l ’J 控电流的抑制作用V - - 浓度依赖性1 2 4 I ．町存矩f } 、t f “ J 内使N M D A 受体M R 2 B 哑基过度表达，产√卜火肇氧F j [ I I 琏加苣呐损伤；另外N M D A 受体的拈抗降低了细胞外谷氨酸的浓度，减少了突触形成和细『地川的连接而抑制神经兀的兴台性‘”I ，提示匕氟烷对学爿汇忆能力的影响叮能L ．il ￡抑制N M D A 受体功能彳r 天1 2 引。

乙酰肚l 碱也是中楸兴奋性神绛递质之‘乙氯烷抑制突触后膜烟碱型乙酰H } j 碱受体的J 力能．明礁降低乙酰胆碱住突触问的f 毛递1 26 1 另行实验研究表I 列，3 ．0 ％匕氟烷明礁抑制老年火鼠海马毒蕈碱掣乙酰明城M l 和M 2 受体任麻酐后ld 的表达H 时人鼠的学爿记忆能力明5 I ! 减退3d 后人鼠海t §M l 和M 2 受体的表达均‘J 对照组大鼠元明弘篾异，学爿记忆能力也‘j 对照组人鼠元明镀芹，这个结果提示L 氟烷造成短暂P ( ) C D ，町能‘J 抑制了，人脑海t §M 受体仃A 接的天系而M 受体的激活町以增强G A B A 能神经元的i ^ 性，易化N M D A 受体的种绎f 专导1 27 1 ，从而延加促进了P O C D 的发，曼吸入麻醉约还町以增强抑制性神终系统G A B A A 受体；刮峰，通过对G A B A A 受体的激活，抑制小鼠离体海t §脑片L 1 1 P ，影响突触传递的l J r 嶝性突触叮塑性足突触对内、外环境变化作} l { 反应的能力，足学习记忆的神经，- 物学基础【2 8 l X i e 等研究发现，异氟烷麻醉药能改变j - p 淀粉样蛋f 1 日玎提蛋广j 的，- 成降解过程，引发各种免疫炎症反应和神经毒性级联反应，导敛广泛的神纶无变性】；} ￡争死f ：是P O C D 发生的町能机制【2 9 】。

H e a dB P 等研究发现，异氟烷町能足减少了海1 5 神经元突触纤维蛋f 1 溶酶原激活刹的释放并加强了脑源性神经营养【大l 子自订体和P 7 5 介导的神经细胞凋亡，从而影响学爿记忆功能f 3 0 J 1 4徐州医学院硕士学位论丈近年来研究认为海t §I ) ( 域神经细胞的变性、凋r ：与认知功能障碍仃着f ‘分密切的关系1 7 - 9 1 I F 常认知功能的维持有赖r 海z §结构的完整性，海码神经细胞损伤或变性足导致阿尔茨海默病认知J 力厶H 匕I “9 “1 , , b h 的．卜要原冈之·1 10 1 由此b J ．见，神经细胞的J 力能状念和修复能力足建澎和维持认知功能的关键【犬l 素以往‘直认为中枢神经系统神经元细胞损伤后无法修复，神经细胞小能再7 卜A l t m a n 等F1 9 6 5 年利用3 H ．胸腺嘧啶核苻标记力．法首次观察剑成年人鼠海t §岗状叫j 七有产乍新神经兀的能力之后许多实验部证’实中楸神绎系统的海L §、侧脑窀以及纹状体等脑Ⅸ或核【于1 均存行：神经f ：细胞I ⋯这些神绐F 细胞；} 仃分化为种终细胞、艰形胶质细胞、少突胶质细胞的能力，能f i 我更新并参‘0 神经J 力能的修复。

这种神经f 细l 】包在一定条件F 向神经细胞等增咱分化，参’0 神经功能修复的过程，被称之为神经发，卜1 1 2 1 神经发乍侄神经细胞功能修复中发挥t 莪要作川成年海t I 的神经发乍卜要f 谚j = ：齿状『l J l ，幽状f I J lf X 终乍保持神经发乍的能／J ，q j 海t §发7 - 神经发7 卜。