黄芩中黄芩苷的提取、分离与鉴定.docx

药学专业综合实验（二）学院：题目：黄芩中黄芩苷的提取、分离与鉴定班级：##########x医药学院##############x学号：黄芩中黄芩苷的提取、分离与鉴定黄芩简介：黄苓又名山茶根、黄苓茶、土金茶根；为唇形科植物，以根入药有清热燥湿， 凉血安胎，解毒等功效含多种黄酮类化合物，主要为黄苓甙，黄苓素，汉黄苓甙，汉黄苓素，7- 甲氧基黄苓素，7-甲氧基去甲基汉黄苓素，黄苓黄酮I,黄苓黄酮II等主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目 赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症产于、、、、、、等一、实验目的1掌握从黄苓中提取、精制黄苓苷的原理、方法与操作要点2掌握黄苓苷的结构鉴定原理与方法二、实验原理黄苓苷为一连有葡萄糖醛酸结构的黄酮化 合物，具有一定的脂溶性和弱酸性，提取时 可以选择一定浓度的乙醇溶液，同时其可在 碱性溶液中溶解，形成钠盐，在提取液中加 酸酸化，使黄苓苷游离析出利用黄苓苷能 溶于碱，不溶于酸的性质使之与酸性杂质分离三、实验材料与仪器材料：黄苓干燥根仪器： 旋转蒸发仪 离心沉淀机 200g摇摆式高速中药粉碎机电子天平 真空泵 抽滤装置 圆底烧瓶 水浴锅 索氏提取器 量筒 玻璃棒 PH试纸试剂：浓盐酸 60%乙醇 40%氢氧化钠 95%乙醇 50%乙醇2mol/l盐酸 镁粉 二氧化锆 枸橼酸 三氧化铝四、实验步骤1、黄芩苷的提取、分离黄苓粗粉100g10倍量水煎煮2次，每次lh过滤两次滤液药渣加浓盐酸调pH至1-2, 80r水浴保温0.5h，充分结晶，过滤加水适量混匀，40%氢氧化钠调pH 至 6.5-7,加入等体积95%乙醇，滤液(弃去)沉淀物滤渣(弃去)滤液加浓盐酸调pH至1-2放置4h,抽滤沉淀滤液水洗，50%乙醇洗，再用 醇洗或结晶(粗制黄苓苷)2、黄芩苷的鉴定(1) 盐酸-镁粉反应：取黄苓苷少许置于试管中，以乙醇lml水浴微温振摇溶解, 加镁粉适量，滴加浓盐酸数滴，观察颜色变化。

2) 锆-枸橼酸反应：取黄苓苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶解, 加数滴5%二氧化锆溶液，振荡后，观察颜色变化；再加2%枸橼酸试剂，观察颜 色变化3) 三氧化铝反应：取黄苓苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶解, 加入2%三氧化铝甲醇溶液数滴，观察颜色变化五、实验结果1. 黄芩苷得率黄苓苷得率(％)=M/M x 100%0式中：M—所得黄苓苷精品重量 M —提取时用黄苓的重量0本实验中：M为0.139g, M为100g，所以收率为0.139%02. 芩苷鉴定结果(1) .盐酸-镁粉反应：取黄苓苷少许置于试管中，以乙醇1ml水域微温振摇 溶解，加镁粉适量，滴加浓盐酸数滴，溶液产生樱红色2） •锆-枸橼酸反应：取黄苓苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至 溶解，加数滴5%二氧化锆溶液，振荡后，显黄色并有黄绿色荧光再加2%枸橼 酸试剂，黄色和荧光褪去3） .三氧化铝反应：取黄苓苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶 解，加入 2%三氧化铝甲醇溶液数滴，溶液产生鲜黄色，在紫外光下显黄绿色荧 光试剂盐酸-镁粉锆-枸橼酸三氧化铝颜色橙色至微红色黄色和荧光褪去黄色六、 结果分析、须知1、 结果分析：本实验中产率不高，原因可能有：①粗粉未浸泡（或粉末浸泡不 完全）；②静置时间短，沉淀不完全；③调PH时温度控制不好。

2、 须知：① 提取过程中为防止黄苓苷的酶解、氧化和减少有效成分被破坏，应控制在一定 温度下进行② 在用酸、碱进行提取纯化黄酮类化合物时，应当注意温度和碱度都不宜过高， 以免破坏黄酮类化合物的母核酸化时，酸度也不宜过高，否则酸会与黄酮类化 合物生成盐而溶解③ 在选择乙醇溶液做提取剂时要注意提取溶液的溶度浓度在（50%〜70%）的乙醇水溶液其极性与黄苓苷的极性相近，便于其溶出 低浓度（40%与以下） 的乙醇极性较大，杂质的溶出量大大增加，高浓度（90%与以 上） 的乙醇溶液极性较小，主要用于药材中的挥发油、叶绿素、树脂等的溶出七、 思考题1、黄苓苷提取过程中为什么要控制温度和调节PH?答：（1）温度的控制：黄苓苷在一定温度和湿度下能酶水解成黄苓素与葡萄 糖醛酸黄苓素分子中具有邻三酚羟基，在空气中易氧化成醌式结构显绿色以 防提取过程中黄苓苷的酶解、氧化和有效成分被破坏2）PH的调节：在提取纯化黄酮类化合物时，碱度过高，会破坏黄酮类化合 物的母核；酸度过高，会使酸与黄酮类化合物生成盐而溶解因此在黄苓苷的提取过程中要控制温度和调节PH2、为什么要选用一定浓度的乙醇溶液作为提取液？答：黄苓苷在黄苓中以羧酸盐存在，可以被溶剂溶出，传统的提取方法以水 做提取剂，但黄芩苷只能微溶于热水，而且在水煎煮的过程中引入了大量的水溶 性杂质。

黄芩苷为一连有葡萄糖醛酸结构的黄酮化合物，具有一定的脂溶性，所 以在提取时可以选择一定浓度的乙醇溶液作为提取液，大大增加它的溶出率，并 且抑制象鞣质、蛋白、粘液等高分子杂质的溶出，便于过滤纯化浓度（50%〜70%） 的乙醇水溶液其极性与黄芩苷的极性相近，便于其溶出低浓度（40%与以下） 的乙醇极性较大，杂质的溶出量大大增加，高浓度（90% 与以上） 的乙醇溶液极性较小，主要用于药材中的挥发油、叶绿素、树脂等的溶 出因此，本实验采用了60%的乙醇溶液作为提取溶剂。