
实用生物医学实验技术:免疫染色的条件与个体化抗体选择.ppt
35页免疫染色的条件与个体化抗体选择,内容,载玻片处理 组织固定 抗原修复 二抗选择 抗体标记 复染,一、载玻片处理,清洁:无水酒精、泡酸 表面处理:1)粘合剂-正电荷:聚赖氨酸、聚精氨酸、3-aminopropyltriethoxysilane (APES) 、铬明胶 ;2)镀膜:硝酸纤维素 (Nitrocellulose)3)酸碱度 脱片原因:载玻片脏、水脏(用去离子水)、表面处理失效(放置过久、氧化、被封闭) 切片保存:干燥、不能冰冻,Fisher正电荷防脱载玻片,超强吸附:该载玻片表面具有永久的阳离子电荷,可以通过静电作用吸附冰冻切片组织或细胞,使之粘附在玻片上,进而在玻璃和切片组织之间形成共价键因此,无需粘黏剂或者蛋白包被,该玻片也能牢固的粘附切片或细胞 持久吸附:吸附在切片上的组织切片和细胞能抵抗酶消化,DNA变性和RNA杂交等处理过程,不会脱落在微波染色中,该切片维持了非常高吸附作用 极低背景:该切片在染色中没有背景它极大的限制了通常在H14:947-958,2003 by American Society of Nephrology,。
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