DE测定(还原糖含量测定).pdf

6.2.2 DE值 6.2.2.1 试剂 a) 次 甲 基 蓝 指 示 液10g/L ：称 取 1.0 g 次 甲 基 蓝 (C16H18ClN3S·2H2O)，溶解于水并稀释至 100ml； b) 葡萄糖标准溶液2g/L：称取于 100±2℃烘干至恒重的无 水葡萄糖 0.5000g，称准至 0.0001g,加水溶解，洗入 250 ml容量 瓶中并稀释至刻度，摇匀，备用 C)费林溶液：按 GB603配制 标定：预滴定时，先吸取费林试剂Ⅱ，再吸取费林试剂Ⅰ各 5.0ml 于 150ml 三角瓶中，加水 20ml，加入玻璃珠 3 粒，用 50ml 滴定管预先加入24ml 葡萄糖标准溶液 (b)，摇匀，置于铺有石棉 网的电炉上加热，控制瓶中液体在120s±15s 内沸腾，并保持微 沸，加 2滴次甲基蓝指示液 (a)，继续以葡萄糖标准溶液滴定， 直至蓝色刚好消失为其终点，整个滴定操作应在3min 内完成 正式滴定时，预加入比上述滴定消耗的葡萄糖标准溶液少1ml， 作平行试验，记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积取其算术平均 值 RP=m1×v1/250 式中： RP——斐林溶液Ⅱ、Ⅰ各5ml 相当于葡萄糖 的质量， g； m1——称取基准无水葡萄糖的量，g v1 ——消耗葡萄糖标准溶液的总体积，mL 250——配制葡萄糖标准溶液的总体积，mL。

6.2.2.2 测定 a) 样液的制备 称取一定量的样品，称准至0.0001g（取样量以每100ml 样 液中含有还原糖量125-200mg为宜） ，置于 50ml 小烧杯中，加热 水溶解后全部移入250ml 容量瓶中，冷却至室温，加水稀释至刻 度，摇匀，备用 b) 预滴定 按标定费林溶液操作，先吸取费林试剂Ⅱ，再吸取费林试剂 Ⅰ各 5.0ml 于 150ml 三角瓶中，加水 20ml，加入玻璃珠 3 粒，用 50ml 滴定管预先加入一定量的样液(a)， 将锥形瓶置于铺有石棉网 的电炉上加热至沸，控制在120s±15s 内沸腾，并保持微沸，以 样液继续滴定 （滴加样液的速度约为每两秒1 滴） ，至溶液蓝色即 将消失时，加入2 滴次甲基蓝指示液，再继续滴加样液直至蓝色 刚好消失为其终点，记录消耗样液的总体积C) 正式滴定 按上述操作吸取费林试剂Ⅱ和Ⅰ各5.0ml 于 150ml 三角瓶 中，可加入玻璃珠2 粒，用滴定管加入比预测时耗用量少1ml 的 样液于锥形瓶内，加热，使溶液在 120s±15s内沸腾，并保持沸 腾状态，与预滴定同样操作，继续以样液滴定至终点整个滴定 操作必须在 3min 内完成，记录消耗样液的总体积。

6.2.2.3 计算 RP DE 值＝× 100 m2×V2×(1－X1) 250 式中：DE 值------------ 样品葡萄糖当量值 (样品中还原糖占干物 质的百分数 )%； RP-------------- 费林溶液Ⅱ、Ⅰ各5ml 相当于还原糖的 质量， g； m2 -------------- 取样量，g； 250----------配制样液的总体积， ml； V2 ------------- 滴定时，消耗样液的体积，ml； X1---------- 样品的水分，％。