蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制.pdf

蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制方法30% (W/V) Acrylamide组份浓度配制量配制方法30%（W/V）Acrylamide1 L1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中2. 向烧杯中加入约600 ml的去离子水，充分搅拌溶解3. 加去离子水将溶液定容至1 L，用0.45 µm滤膜滤去杂质4. 于棕色瓶中4℃保存注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具有积累性，配制时应戴手套等聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份40% (W/V) Acrylamide组份浓度配制量配制方法40%（W/V）Acrylamide1 L1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中2. 向烧杯中加入约600 ml的去离子水，充分搅拌溶解3. 加去离子水将溶液定容至1 L，用0.45 µm滤膜滤去杂质4. 于棕色瓶中4℃保存注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具有积累性，配制时应戴手套等聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份10% (W/V) 过硫酸铵组份浓度配制量配制方法5×Tris-Glycine Buffer(SDS-PAGE电泳缓冲液)组份浓度配制量配制方法0.125 M Tris, 1.25 M Glycine, 0.5%（W/V）SDS1 L1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，搅拌溶解3. 加去离子水将溶液定容至1 L后，室温保存5×SDS-PAGELoading Buffer5 ml1. 量取下列试剂，置于10 ml塑料离心管中2. 加去离子水溶解后定容至5 ml3. 小份（500 µl/份）分装后，于室温保存4. 使用前将25 µl的2-ME加到每小份中5. 加入2-ME的Loading Buffer可在室温下保存一个月左右组份浓度配制量配制方法0.1%（W/V）考马斯亮蓝R-250, 25%（V/V） 异丙醇, 10%（V/V） 冰醋酸1 L1. 称取1 g考马斯亮蓝R-250，置于1 L烧杯中2. 量取250 ml的异丙醇加入上述烧杯中，搅拌溶解3. 加入100 ml的冰醋酸，搅拌均匀4. 加入650 ml的去离子水，搅拌均匀5. 用滤纸除去颗粒物质后，室温保存组份浓度配制量配制方法10%（V/V）醋酸, 5%（V/V）乙醇1 L1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中2. 充分混合后使用组份浓度配制量配制方法组份浓度配制量配制方法组份浓度0.4%（W/V）AgNO3, 1%（V/V）浓NH3·H2O, 0.04%（W/V）NaOH配制量配制方法100 ml1. 量取下列试剂，加入100～200 ml的试剂瓶中。

2. 均匀混合该溶液应为无色透明状如氨水浓度过低时溶液会呈混浊状，此时应补加浓氨水,直至透明3. 本染色液应现用现配，不宜保存组份浓度配制量配制方法0.005%（W/V）柠檬酸, 0.02%（V/V）甲醛1 L1. 称量下列试剂，置于1 L试剂瓶中2. 加入1 L去离子水后，摇动混合溶解3. 室温保存。