离子通道的分子药理学1ppt课件.ppt

离子通道的分子药理学离子通道的分子药理学四川大学根底医学与法医学院四川大学根底医学与法医学院药理室药理室第一节 离子通道研讨简史¡1902年，Bernstein提出了细胞生物电产生的膜学说¡即细胞膜在静息形状下只对钾有通透性，由于钾离子分散到膜外，细胞膜两侧出现了内负外正的极化形状，表现为静息电位〔resting potential〕¡动作电位〔action potential〕那么是膜对其他离子通透性一过性的升高，导致膜两侧电位差瞬间消逝 ¡1936年，Young描画了枪乌贼支配其外套膜¡  肌的巨轴突直径可达1mm¡1939年，Hodgkin 〔霍基肯〕和Huxley〔哈克斯里〕运用这一发现于细胞内膜电位的记录，并证明动作电位期间膜对钠通透性瞬间增大远远超越了对钾的通透性，出现了膜电位的倒转〔超射〕¡1949年，Cole及Marmont设计了电压钳¡  〔voltage clamp〕技术，由此开场了膜对离子通透性的直接测定¡该技术经Hodgkin、Huxley和katz等加以改良，提出了描画电压门控通道门控动力学过程的Hodgkin-Huxley模型，简称H-H模型¡1955年，Hodgkin和Keens利用章鱼巨轴突神经元进展的动作电位经典实验，证明细胞经过不同的选择性离子通道来传送电信号。

¡由此，他们提出了“通道〞〔channel〕的概念并以为该类通道就是存在于细胞膜上的某些大分子蛋白质¡1963年，Hodgkin、Huxley由于上述突出研讨奉献而获得诺贝尔奖¡1970年代末，奈尔(Neher)和萨克曼(Sakmann)发明了单通道记录技术，用于探测离子通道通透性的细节研讨，80年代推出了可记录单个通道和较小细胞电活动的膜片钳〔Patch clamp〕技术¡1991年，膜片钳技术的开创人Neher和Sakmann因此获得该年度诺贝尔奖¡与此同时，钠、钾、钙等电压依赖性通道主要亚单位的一级构造被纯化、克隆和进展功能测定，为离子通道的离子电流活动提示了构造根底¡2019年，麦金农的研讨小组第一次胜利结晶了青链霉菌的一种钾离子通道，并用X射线晶体成像技术获得通道门闭合形状的高分辨构造¡2019年，为表扬他们在阐明细胞经过细胞膜通道蛋白质转运水分子以及盐份离子的研讨中作出的艰苦奉献，皮特·阿格雷和罗德里克·麦金农分享了该年度诺贝尔化学奖¡近20年来的膜片钳技术、蛋白质化学和生物学技术已给离子通道的研讨带来了宏大的革命性变化第二节 离子通道的分类及特点¡一、离子通道的分类、共性和特点¡离子通道〔Ion channel〕是细胞膜中的跨   膜蛋白质分子，具有选择性的允许适当电荷离子被动经过的亲水性微孔道。

¡离子通道普通具有相应闸门，且多处于关   闭形状 ¡离子通道按启闭闸门动因的不同主要分¡为两类：¡〔1〕电压门控离子通道〔voltage-gated ion channel〕¡门控〔gating〕：离子通道的开启和封锁过程称为门控¡该类通道因膜电位变化而开启或封锁，按最容易经过的离子命名；¡〔2〕化学门控离子通道〔chemically-¡gated ion channel〕，由递质与通道上蛋白质分子上的结合位点相结合而开启，按递质或受体命名¡目前，公认的离子通道有钾离子通道、钠离¡  子通道、钙离子通道、氯离子通道等¡同种离子通道又存在不同亚型¡  如钾离子通道包括ATP敏感性钾离子通道、¡  延迟外向型钾离子通道、暂时外向型钾离子¡  通道；¡而钙离子通道又分为电压依赖性钙离子通道¡  和受体支配性钙离子通道等¡他们均具共同特性：选择性，传导性，闸门¡  作用，化学和电压敏感性¡选择性：对某种离子通透有高度选择性选择性：对某种离子通透有高度选择性¡ 如如钠钠离离子子通通道道选选择择性性的的允允许许Na+经经过过，，而而钙钙¡ 离子通道选择性通透离子通道选择性通透Ca2+¡传导性：通道开放形状下经过该通道的传导性：通道开放形状下经过该通道的¡离子数目为传导；经过离子通道的离子离子数目为传导；经过离子通道的离子¡数与不能经过通道的离子数所携带电荷数与不能经过通道的离子数所携带电荷¡的比例为传导性〔的比例为传导性〔gs〕。

〕¡ Is=gs(E-Es) gs=Is/(E-Es)¡ Is：：S离离子子挪挪动动穿穿过过其其选选择择性性通通道道时时所产生的电流所产生的电流¡ gs：离子：离子S的传导性的传导性¡ E：离子跨膜转运时的电位离子跨膜转运时的电位¡ Es：离子的电化学平衡电位：离子的电化学平衡电位¡闸闸门门作作用用：：离离子子通通道道的的闸闸门门位位于于细细胞胞膜膜内内侧侧，，他决议该通道允许离子经过该通道的才干他决议该通道允许离子经过该通道的才干¡闸闸门门可可为为激激活活形形状状〔〔激激活活闸闸门门〕〕，，也也可可为为失失活活形形状状〔〔失失活活闸闸门门〕〕前前者者指指遭遭到到刺刺激激后后通通道的开放；后者指遭到刺激后通道封锁道的开放；后者指遭到刺激后通道封锁¡化化学学和和电电压压敏敏感感性性：：开开放放和和封封锁锁形形状状的的离离子子通通道道对对化化学学递递质质或或电电压压敏敏感感性性有有不不同同，，因因此此按照启闭闸门动因的不同分为前述两类按照启闭闸门动因的不同分为前述两类¡二、离子通道的分子构造及特点二、离子通道的分子构造及特点¡〔一〕钠离子通道〔sodium channel〕¡选择性允许Na+跨膜经过。

主要功能是维¡  持细胞膜的兴奋性及传导¡1.特征：¡〔1〕电压依赖性，即在去极化达一定程度   开场被激活，通道开放产生内向钠电流〔INa〕 ,当达最大效应后，逐渐失活直至完全失活而封锁； ¡〔2〕对Na+高度选择性，只允许Na+经过；¡〔3〕激活和失活速度快，前者1ms，后者10ms内完成； ¡〔4〕有特异性激活剂和阻滞剂，树蛙毒素¡  〔batrachotoxin，BTX〕和木藜芦毒素¡   (grayanotoxin，GTX)为其激活剂，¡   河豚毒素〔tetrodotoxin，TTX〕和哈蚌毒素〔saxitoxin，STX〕为其阻滞剂¡2.钠离子通道的分类与功能¡根据对TTX的敏感性不同分为3类：¡第一类：¡神经类钠离子通道〔对TTX敏感性高〕；¡又根据其半数最大激活电压〔V50〕和失活电压〔Vh〕不同分为：¡脑型、脊髓被根和三叉神经节细胞型、神经内分泌和外周神经型、神经细胞和神经胶质细胞型等¡第二类：¡骨骼肌类钠离子通道〔对TTX和GTX敏感性均¡高〕；其V50为-20mV；Vh为-50mV¡第三类：¡心肌类钠离子通道〔对TTX和GTX敏感〕；¡V50为-20mV；Vh为-70mV。

¡他们又根据电压依赖性和对TTX的敏感性不同分为：¡耐久〔慢〕钠通道¡瞬时〔快〕钠通道心肌类钠通道类型和特征通道           慢钠通道快钠通道激活电压低高失活速度慢快功能维持心肌AP 2期平台引起0相去极化敏感药物对TTX，利，奎高度敏感对高浓度TTX，利，奎敏感¡〔二〕   钙离子通道〔calcium channel〕¡钙离子被称作生物信使¡其通道在正常情况下使钙内流钙离子通道广泛存在于各种组织细胞，是调理各组织细胞内钙浓度的主要途径 通道类型  通道名称     分布   功能状态 电压依赖型(Voltage-dependent calcium channels, VDC) L型钙离子通道 可兴奋细胞、心肌、骨骼肌及中枢 激活电压-30 ～ 40mV,开放时间较长，单通道电导大 T型钙离子通道 广泛分布于可兴奋细胞和非兴奋细胞 膜电位<-60Mv激活，开放时间短，单通道电导小 P型钙离子通道 中枢Purkinje细胞 阈电位高 R型钙离子通道  主动脉 静息电位下被某些因素激活，有较长开放时间 N型钙离子通道中枢神经元末梢较负的电位下开放，构成细胞膜的静息期的背景电流。

 受体操纵型受体操纵型(Receptor-operated calcium channels, POT) 钙渗漏钙渗漏受体/通道复合体，ATP可激活通道，但通道的离子选择性较VDC差 静息状态下对钙离子有一定通透性，有保持钙离子的动态平衡作用  钙 离 子 通 道 的 分 类〔一〕L型钙离子通道〔L，Ica-L〕L型钙通道特征亚基组成：   α1`、α2、β、γ、δ重要亚基：   α1，电压感受器，离子通透性，药物结合位点激活：            需较强去极化，电导较大失活：            慢开放时间：        长特异阻滞剂：硝苯地平，地尔硫唑，维拉帕米〔三〕氯离子通道(chloride channels)氯离子通道根据电流不同分为：电压依赖型氯离子通道；钙离子依赖的氯离子通道；酪氨酸〔 γ 氨基丁酸，GABA〕受体通道氯通道类型及特征通道类型 电压依赖型Ca2＋依赖型 GABA依赖的氯通道去极化激活型超级化激活型钟形依赖型激活电压低-55～-70mV电压高与钙有关GABA选择性强强强高高失活慢-10mV，慢快, >±20mV钙降低分布骨骼肌等各组织骨骼肌，平滑肌神经细胞，内皮细胞血管、气管、食道、腺体、骨骼肌、心肌等神经系统突触功能复极、稳定膜电位复极、稳定膜电位复极、稳定膜电位复极、稳定膜电位抑制神经兴奋性激活剂钙、钙调素激酶、苯二氮卓类、巴比妥类¡〔四〕钾离子通道¡特征：¡广泛存在于各组织器官；类型最多；作用最复杂；是调理平滑肌舒缩活性的主要离子通道。

¡钾离子通道分为电压门控类、钙敏感类、受体耦联类、内向整流类和其他类¡电压门控类钾通道影响细胞膜的动作电位，内向整流型钾通道影响细胞膜的静息电位¡1.电压门控类钾离子通道¡〔1〕A型钾离子通道〔A-channels,  KA, IK(A)〕¡又称为瞬时外向钾通道〔transient out K channels, Ito, Kto〕¡是一种产生外向电流的电压依赖型钾离子通道¡在心肌细胞，KA主要与AP的快速复极初期〔1相期〕有关，同时影响2相平台期和3相期,在去极化较明显时才被激活，且无整流性，故对动作电位的形状和时程有较大影响¡该通道激活迅速，失活快，但活性恢复较慢¡〔2〕电压依赖型钾离子通道voltage dependent K channels, Kv, IK(v)〕¡又称为延迟整流钾通道(delayed rectifier K channels, KDR, Ik)¡在去极化时被激活而产生外向电流，然后缓慢失活与膜的复极化有关故其电流称为复极电流¡在心肌细胞，主要影响AP的3相期，因此与APD有关¡在血管平滑肌，其主要功能是限制膜的进一步去极化¡〔3〕平台钾离子通道(KP, IKP)¡又称为背景外向钾离子通道。

在心肌主要维持AP的平台高度和继续时间无整流特性和失活过程¡在膜去极化时迅速被激活，而在复极时快速激活〔deactivation〕¡可被Ba2+阻滞，对四氢吡啶类和黄酰脲类药物不敏感¡2.钙敏感类钾离子通道(Kca,IK(Ca))¡去极化和提高[Ca2+]I浓度均可激活该通道而使之开放，K+因此外流使膜复极化或超极化在血管平滑肌，该通道调理其肌原性张力¡3. 受体耦联类钾离子通道¡为一类离子型受体〔ionotropic receptor〕或离子通道受体〔ion channels receptors〕,即受体分子中含有允许离子经过的微孔道受体被激活时，其构象变化而通道开放¡〔1〕M受体钾离子通道¡分布于CNS，具有时间和电压依赖性¡M型Ach受体激活时封锁，故又称为M型通道在-60mV时被激活，因此神经元静息形状时该通道开放，产生外向钾电流以维持静息电位，从而降低神经元的兴奋性和限制反复放电频率可被Ca2+、Ba2+、linopirdine(利诺吡啶)阻滞¡〔2〕心房毒覃碱激活钾离子通道¡又称Ach调理钾离子通道¡存在于窦房结、房室结、心房肌细胞¡其活性需求有[Ca]o和[Mg]I的参与，其具有内向整流特性。

¡主要由Ach和GTP激活，亦可被超极化激活¡该通道激活后添加舒张电位而致负性频率作用Ach浓度添加使该通道开放频率添加而非延伸开放时间¡另外，血小板活化因子〔PAF〕和白三烯C4等调控其激活过程¡4.内向整流类钾离子通道¡〔1〕内向整流型钾离子通道〔inward rectifier K channels, KIR, Ik.IR〕¡内向整流指引起内向电流大于外向电流¡心房肌、心室肌、普肯野细胞均有KIR, 但心室肌最为丰富该通道的激活不仅依赖于电压，还与[K]O浓度有关[K+]O浓度升高时，内向和外向电流均添加该类通道在心肌细胞称为Ik1，其电压-电流〔V-I〕曲线为“N〞型，超极化部分为明显的内向电流，去极化部分为细小的外向电流¡内向整流的缘由是由于外向离子流被细胞内正常生理浓度的Mg2+抑制所致¡心肌细胞的KIR通道也参与AP的3相复极，但主要维持4相期静息电位，防止由于Na+-K+泵的作用使膜超极化大于钾平衡电位〔Ek〕¡在血管平滑肌，KIR主要调理细胞外高钾的作用，当[K+]O浓度升高时，KIR通道开放引起超极化和血管扩张 ¡〔2〕ATP敏感的钾通道¡为代谢性调理K+外流的通道。

分布于骨骼肌、心脏、血管平滑肌、胰腺β细胞、神经、内分泌细胞及肾上腺皮质细胞¡其特征：¡①高度选择性；¡②受细胞内ATP/ADP比率、Mg2+和G蛋白调控；正常生理形状下由于ATP作用而使该通道处于失活形状，只需在缺氧、能量耗竭及ATP减少时，通道才逐渐被激活而开放¡Mg2+存在时，ADP起激活通道作用反之，那么可抑制¡外源性GTP激活心肌细胞上的G蛋白而拮抗ATP对通道的抑制造用Ach、腺苷，降钙素基因肽〔CGRP〕等经过G蛋白而促进通道开放¡③有特异的开放剂和阻滞剂其开放剂有克 罗 卡 林 〔 cromakalim〕 ， 二 氮 嗪 〔diazoxide〕、阿普卡林〔aprikalim〕、吡那地尔〔pinacidil〕等阻滞剂有格列本脲、甲苯磺丁脲等¡〔3〕钠激活钾通道 ¡亦为一种内向整流性钾离子通道¡首先在心肌细胞内发现，细胞内钠浓度升高到达负荷，膜电位大于+20mV时被激活其电导较大¡洋地黄中毒时，由于Na+-K+泵被抑制，[Na+]I浓度添加而激活该通道¡特异性阻滞剂R56865可取消洋地黄中毒时缩短APD和诱发的迟后除极作用 第三节￿离子通道的生理功能¡一、提高细胞内钙离子浓度而触发生理效应¡静息形状下，［Ca2+］i浓度大约为0.1μm ·L-1 ，当Ca2+通道被激活而开放时，大量Ca2＋内流可使［Ca2+］i提高到1.0 μm·L-1,从而触发一系列生理活动：¡1. 肌肉收缩¡2. 细胞兴奋¡3. Ca2+依赖性离子通道的开放或封锁¡4. 腺体分泌¡5. 蛋白激酶的激活和基因表达的调理¡二、决议细胞的兴奋性、不应期和传导性¡三、调解血管平滑肌的舒缩活动¡四、参与突触传送¡五、维持细胞的正常体积¡六、调理内分泌功能以及维护心肌受缺血性损害¡ 第四节 离子通道调理和作用药物¡一、受体对离子通道的调理¡1.β肾上腺素受体对L型Ca2＋通道的调控¡β肾上腺素受体激动剂经过激活β受体和其偶联的G蛋白〔Gs〕-AC-cAMP-PKA途径，使钙通道蛋白磷酸化而开放Ca2＋通道，产生正性肌力和正性频率；在血管平滑肌，那么经过Gs蛋白偶联，抑制L型钙通道活性而舒张血管。

¡2.α肾上腺素受体¡其激动剂兴奋α1受体，经过与其偶联的¡糖蛋白〔Gp〕激活PLC而促进DAG和IP3合成，DAG经过PKC而抑制KATP通道，IP3引起储Ca2+ 释放而添加［Ca2+］i浓度，从而激活非选择性阳离子通道和Ca2+激活氯通道，两者均使膜去极化而开放L型钙通道，Ca2+内流引起平滑肌收缩¡3 M 胆碱受体¡M受体与Gk和Gi两种蛋白偶联，Gk激活KACh通道，Gi抑制AC活性，减少cAMP合成，降低PKA活性，封锁L型钙通道，开放KDR通道，两种钾通道开放均产生复极化电位，从而抑制心肌电活动¡4 其他受体¡1〕组胺受体    ¡组胺激动H2受体而激活AC，导致L型钙通道开放；组胺激动H1受体那么提高磷酸肌醇的更新率，促进IP3生成，故提高Ca2＋浓度¡2〕胰高血糖素¡作用于受体而激活AC使cAMP添加，并抑制磷酸二酯酶而减少cAMP水解，从而促进L型钙通道开放¡3〕内皮素－1¡使L型钙通道开放，产生平滑肌收缩，正性肌力作用¡4〕降钙素基因相关肽¡开放L型钙通道产生正性肌力作用，激活Kca通道而使血管平滑肌舒张¡5〕甲状旁腺激素¡在血管平滑肌抑制L型钙通道，降低Ca2＋内流引起血管扩张，在心肌，那么经过激活AC，促进L型钙通道开放，Ca2＋内流而导致正性肌力作用。

¡6〕5－羟色胺；ATP、血管活性肠肽〔VIP〕、血管紧张素Ⅱ〔  angiotensinⅡ, ATⅡ〕、加压素均可激活L型钙通道，人参皂甙Rf那么抑制神经元的N型通道，粉防己碱抑制心肌细胞的L型钙通道 ¡二、G蛋白对离子通道的调理¡在心血管系统，G蛋白家族调理两大系统，即Gs／Gi调理受体－AC－系统和Gp调理受体－PLC系统当Gs激活后，抑制钠通道，激活钙通道和钾通道，引起一系列生理效应¡三、第二信使对离子通道的调理¡cAMP、cGMP、IP3、DAG、脂肪酸及其代谢产物¡cAMP促进L型Ca2＋通道开放；¡cGMP激活PKC使通道磷酸化，也可激活磷酯酶A2使通道蛋白去磷酸化，或激活PDE而降低cAMP浓度，抑制PDE Ⅲ而添加cAMP 浓度，使钙通道发生变化；¡IP3抑制L型钙通道和激活Kca通道，DAG促进L型钙通道，抑制KATP通道；¡脂肪酸及其代谢产物激活L型钙通道，抑制N型钙通道¡四、钙离子对平滑肌离子通道的调理¡Ca2+同属第二信使¡五 、 ABC蛋 白 〔 ATP-binding  cassette proteins〕¡P-糖蛋白：¡阴离子通道的调制因子；¡囊性纤维跨膜电导调理体〔CFTR〕：¡阴离子通道和阴离子通道调理体，以及上皮细胞分泌的协调器；¡磺酰脲受体：¡胰腺KATP通道的调理体，被阻断时胰岛素分泌；¡六、作用于离子通道的药物¡〔一〕钙通道阻滞剂和钙通道激活剂¡钙通道阻滞剂按电压门控型通道的亚型〔L、T、N、P、R、Q〕分为三类。

¡1. 1类，作用于L型钙通道的药物：¡1a类〔二氢吡啶类〕如硝苯地平、尼卡地平、尼群地平；¡1b类〔地尔硫唑类〕如地尔硫卓、克仑硫卓、二氯呋利；¡1c类〔苯烷胺类〕如维拉帕米、加洛帕米、噻帕米；¡1d类如粉防己碱¡2. 2类，选择性作用于其他电压门控钙通道：¡作用于T型通道的苯妥因、右美沙芬、人参皂甙Rf、氟桂利嗪；¡作用于N型通道的芋螺霉素；¡作用于P型通道的某些蜘蛛毒素如AgaIVA¡3. 3类，非选择性钙通道调理物：¡普尼拉明、卞普地尔、卡罗维林、氟桂利嗪¡2 T-型钙通道阻滞剂¡ 平滑肌细胞膜上的钙通道存在L-型与T-型两种亚型过去临床运用的钙拮抗剂均是阻滞L-型通道由于以前缺乏特异性的T-型钙通道阻滞剂作为研讨工具，目前,对T-型钙通道的生理功能尚不完全明了¡T-型钙通道存在于心脏起搏细胞，与心脏及血管的生长与重塑亲密相关在胚胎期，T-型钙通道有显著表达而在成年，除了肥厚的心肌和血管壁外鲜见表达¡选择性T-通道阻滞剂米贝地尔(mibefradil)，对T通道的作用是对L通道作用的30～100倍¡与L型钙阻滞剂相比，T通道阻滞剂具有高度血管选择性，扩张冠脉而缓解心绞痛; 无负性肌力作用; 无反射性心动过速，并能减慢心率;副作用小。

尤其适用于高血压合并冠心病和心衰患者¡由于米贝地尔能抑制蛋白激酶C(PKC)，阻断细胞的增殖信号，因此能剧烈抑制血管重塑及平滑肌细胞增殖; 同时，它能阻断去甲肾上腺素及内皮素对血管的收缩作用，甚至对PKC激动剂所致已收缩的血管起舒张作用¡米贝地尔的出现，不仅为高血压的治疗提供了一种新的武器，而且必将对T-型钙通道的生理功能的研讨起着艰苦的推进作用¡钙通道激活剂：¡二氢吡啶类如Bay K8 644等其作与硝苯地平等钙通道阻滞剂相反，起到缩血管、促进肾上腺皮质激素释放等作用¡此外，尚有Maitotoxin (MTX)、β肾上腺素受体、组胺受体、降钙素基因相关肽 ( CGRP )受体、加压素受体等¡〔二〕作用于钠通道的药物¡1〕部分麻醉药：利多卡因、普鲁卡因、丁卡因、布比卡因等¡2〕抗癫痫药：苯妥因钠、卡马西平、苯巴比妥、丙戊酸¡3〕抗心律失常药：奎尼丁、普鲁卡因胺、丙吡胺、利多卡因、苯妥因钠、美西律、普罗帕酮、氟卡尼 ¡〔三〕作用于钾通道的药物¡1〕钾通道开放药： 苯并吡喃类如克罗卡林、雷罗卡林、吡马卡林、阿普卡林；氰胍类如吡那地尔；烟酰胺类如尼可地尔；嘧啶类如米诺地尔；苯并噻二嗪类如二氮嗪等。

¡2〕钾通道阻滞药：抗心律失常药如溴苄胺、索他洛尔、胺碘酮¡3〕磺酰脲类降糖药：甲苯磺丁脲、氯磺丙脲；格列苯脲、格列吡嗪；格列齐特¡4〕4－氨基吡啶〔4-AP〕¡5〕中药有效成分：钩藤碱、小蘖碱、关附甲素¡运用离子通道进展药理学研讨可客观、理想、科学、深化讨论药物作用机制¡因此离子通道研讨为分子药理学的研讨提供了无以伦比的优越性条件和高科技技术条件他将有力促进分子药理学向更高程度开展。