《治疗性疫苗》PPT课件.ppt

第十二章　治疗性疫苗第十二章　治疗性疫苗第一节　概述第一节　概述 治疗性疫苗治疗性疫苗是指在已感染病原微生物或已是指在已感染病原微生物或已患有某些疾病的机体中，通过诱生特异性患有某些疾病的机体中，通过诱生特异性的免疫应答，达到治疗或防止疾病恶化的的免疫应答，达到治疗或防止疾病恶化的天然、人工合成或用基因重组技术表达的天然、人工合成或用基因重组技术表达的生物制品生物制品最早被应用的治疗性疫苗是巴斯德于最早被应用的治疗性疫苗是巴斯德于18851885年所用的年所用的狂犬病疫苗狂犬病疫苗用该疫苗免疫被狂用该疫苗免疫被狂犬咬伤但尚未发病的患者，可以防止发生犬咬伤但尚未发病的患者，可以防止发生致死性的疾病反复多次注射狂犬疫苗，致死性的疾病反复多次注射狂犬疫苗，通过诱生机体的免疫应答可有效地阻止病通过诱生机体的免疫应答可有效地阻止病毒进入中枢神经系统，达到治疗效果毒进入中枢神经系统，达到治疗效果 在细菌方面，已有用麻风菌素治疗麻风菌在细菌方面，已有用麻风菌素治疗麻风菌感染、用布氏杆菌素治疗布氏菌感染、用感染、用布氏杆菌素治疗布氏菌感染、用灭活的自身菌疫苗治疗金黄色葡萄球菌皮灭活的自身菌疫苗治疗金黄色葡萄球菌皮肤反复感染等。

肤反复感染等此外，还研制了针对自身免疫病、肿瘤等此外，还研制了针对自身免疫病、肿瘤等的治疗性疫苗的治疗性疫苗目前，治疗性疫苗主要应用于尚无有效治目前，治疗性疫苗主要应用于尚无有效治疗药物的疾病，如肿瘤、自身免疫病、慢疗药物的疾病，如肿瘤、自身免疫病、慢性感染、移植排斥，超敏反应等性感染、移植排斥，超敏反应等 一、治疗性疫苗发展的基础一、治疗性疫苗发展的基础1 1．微生物的持续性感染日益受到重视．微生物的持续性感染日益受到重视 微生物与人类间的相互关系无论在过去、微生物与人类间的相互关系无论在过去、现在与将来，都是重要的科学研究课题现在与将来，都是重要的科学研究课题 当人类出现后，有些微生物与人类共存，当人类出现后，有些微生物与人类共存，甚至成为人类维持正常生命活动的甚至成为人类维持正常生命活动的““伙伴伙伴””；；而另一些病原微生物则入侵人体，引起疾而另一些病原微生物则入侵人体，引起疾病，甚至病，甚至““致人于死地致人于死地””  在控制微生物所致的持续性感染中，为达在控制微生物所致的持续性感染中，为达到杀灭或抑制宿主体内微生物的目的，除到杀灭或抑制宿主体内微生物的目的，除采用采用抗微生物药物抗微生物药物外，外，提高机体免疫应答提高机体免疫应答也已受到关注。

也已受到关注虽然被动输入免疫细胞或抗体有短暂的抗虽然被动输入免疫细胞或抗体有短暂的抗微生物或其产物的作用，但对于持续性感微生物或其产物的作用，但对于持续性感染，更受重视的是用治疗性疫苗通过主动染，更受重视的是用治疗性疫苗通过主动免疫诱生机体免疫应答免疫诱生机体免疫应答 2 2．基因重组技术的发展与应用．基因重组技术的发展与应用 目前基因重组与表达技术已日趋成熟，提目前基因重组与表达技术已日趋成熟，提供了用于发展供了用于发展治疗性疫苗的组分治疗性疫苗的组分各种抗原成分的组合、拼接或用微生物抗各种抗原成分的组合、拼接或用微生物抗原基因与不同细胞因子基因组成表达嵌合原基因与不同细胞因子基因组成表达嵌合性蛋白，或使表达蛋白与药物交联的治疗性蛋白，或使表达蛋白与药物交联的治疗性疫苗为开发治疗性疫苗性疫苗为开发治疗性疫苗提供了广阔的前提供了广阔的前景景 3 3．免疫学理论的发展．免疫学理论的发展 人们通过对免疫系统的深入了解，已能合人们通过对免疫系统的深入了解，已能合理设计免疫治疗剂以及预防性疫苗理设计免疫治疗剂以及预防性疫苗对对HIVHIV免疫的研究，大大推动了抗感染免疫免疫的研究，大大推动了抗感染免疫的理论发展。

的理论发展对不同感染过程中体液与细胞免疫应答的对不同感染过程中体液与细胞免疫应答的详细分析、抗原提呈、细胞内信号传递途详细分析、抗原提呈、细胞内信号传递途径的进一步了解，微生物对免疫细胞感染径的进一步了解，微生物对免疫细胞感染所造成的后果，以及裸所造成的后果，以及裸DNADNA免疫的机制等均免疫的机制等均对发展治疗性疫苗起了推动作用对发展治疗性疫苗起了推动作用 二．治疗性疫苗的作用机理二．治疗性疫苗的作用机理在许多方面治疗性疫苗与预防性疫苗不同，在许多方面治疗性疫苗与预防性疫苗不同，其作用机理尚存在其作用机理尚存在争议争议 治疗性疫苗分为治疗性疫苗分为非特异性和特异性非特异性和特异性两种机体已经感染病毒之后再注射疫苗，此时机体已经感染病毒之后再注射疫苗，此时机体已经具有病毒的抗原，但由于机体免机体已经具有病毒的抗原，但由于机体免疫反应的部分缺陷，不能发挥作用，疫反应的部分缺陷，不能发挥作用，治疗治疗性疫苗通过不同途径把微生物抗原提呈给性疫苗通过不同途径把微生物抗原提呈给免疫系统，来弥补或激发机体的免疫反应免疫系统，来弥补或激发机体的免疫反应( (特别是特别是细胞毒性细胞毒性T T淋巴细胞淋巴细胞的杀伤活性的杀伤活性) )，，从而达到清除病毒的治疗作用，从而达到清除病毒的治疗作用， 机体接受治疗性疫苗后，机体接受治疗性疫苗后，刺激刺激T T细胞、细胞、B B细细胞增殖，激活巨噬细胞，促进胞增殖，激活巨噬细胞，促进NKNK细胞杀伤细胞杀伤肿瘤细胞，肿瘤细胞，从而发挥免疫增强作用。

从而发挥免疫增强作用 如如卡介苗卡介苗是非特异性疫苗，可通过增强机是非特异性疫苗，可通过增强机体免疫系统对肿瘤细胞的杀伤作用而辅助体免疫系统对肿瘤细胞的杀伤作用而辅助治疗肿瘤治疗肿瘤，使患者的免疫系统在对新的基，使患者的免疫系统在对新的基因重组体产生反应的同时，也同时排斥打因重组体产生反应的同时，也同时排斥打击自身类似的病原，从而达到治疗效果击自身类似的病原，从而达到治疗效果卡介苗卡介苗作为作为膀胱癌等的辅助治疗用药膀胱癌等的辅助治疗用药，可，可增强机体对肿瘤细胞的杀伤能力增强机体对肿瘤细胞的杀伤能力 三、治疗性疫苗与预防性疫苗的比较三、治疗性疫苗与预防性疫苗的比较 ①①接种对象接种对象预防性疫苗的接种对象是预防性疫苗的接种对象是健康群体，对易健康群体，对易感人群均可应用感人群均可应用，主要起，主要起免疫预防作用免疫预防作用，，它对机体大多无病理损伤，使用安全可靠；它对机体大多无病理损伤，使用安全可靠；而治疗性疫苗的使用对象是而治疗性疫苗的使用对象是感染者感染者，或，或免免疫应答低下的患者疫应答低下的患者，故疫苗疗法属，故疫苗疗法属免疫治免疫治疗疗 ②②目的目的预防性疫苗是为了预防性疫苗是为了防病防病治疗性疫苗是为了治疗性疫苗是为了治疗或防止病情恶化。

治疗或防止病情恶化③③特点特点治疗性疫苗的另一个突出特点是应用时必治疗性疫苗的另一个突出特点是应用时必须考虑须考虑适应证与禁忌证适应证与禁忌证，也可根据需要进，也可根据需要进行各种组合和调整行各种组合和调整四、治疗性疫苗制备与应用的注意事项四、治疗性疫苗制备与应用的注意事项 1 1．免疫原的选择与优化．免疫原的选择与优化免疫原的选择需在深入研究治疗对象的免疫原的选择需在深入研究治疗对象的免免疫应答基础疫应答基础上选定 一般选用的微生物抗原应为能一般选用的微生物抗原应为能引起引起中和性中和性抗体抗体及可诱及可诱生杀伤性生杀伤性T T细胞细胞(CTL)(CTL)免疫应答免疫应答的的抗原抗原；； 在非感染性患者，如肿瘤或自身免疫病患在非感染性患者，如肿瘤或自身免疫病患者中，常可选择者中，常可选择相应的或类似的抗原相应的或类似的抗原进行进行免疫或脱敏免疫或脱敏 2 2．动物模型的建立．动物模型的建立为考核治疗性疫苗的为考核治疗性疫苗的疗效疗效需要建立模拟人需要建立模拟人体感染的动物模型，体感染的动物模型， 至今微生物持续性感染的动物模型还至今微生物持续性感染的动物模型还很少很少，，均有不足之处。

均有不足之处 ——种是在灵长类动物，如黑猩猩、猿猴中；种是在灵长类动物，如黑猩猩、猿猴中；或是在非灵长类动物中寻找，如类似人乙肝或是在非灵长类动物中寻找，如类似人乙肝病毒的土拨鼠或鸭乙肝动物模型病毒的土拨鼠或鸭乙肝动物模型 另一种是建立有病毒基因整合的转基因动物，另一种是建立有病毒基因整合的转基因动物，如用如用HBVHBV基因建立的转基因小鼠基因建立的转基因小鼠 3 3．临床应用的重要性．临床应用的重要性 治疗性疫苗和预防性疫苗的很重要区别是治疗性疫苗和预防性疫苗的很重要区别是前者需要前者需要临床医生的积极参与临床医生的积极参与( (禁忌证与适禁忌证与适应证应证) )由于治疗性疫苗的对象是患者，因此常伴由于治疗性疫苗的对象是患者，因此常伴有免疫低或其他病理变化，在使用疫苗时有免疫低或其他病理变化，在使用疫苗时需较预防性疫苗更为慎重选择对象时应需较预防性疫苗更为慎重选择对象时应有严格标准，对每种疫苗的疗效也应用不有严格标准，对每种疫苗的疗效也应用不同的评价标准在免疫应答出现时还可能同的评价标准在免疫应答出现时还可能伴有免疫损伤而出现不良反应，需要医生伴有免疫损伤而出现不良反应，需要医生协同进行判断。

协同进行判断 第二节第二节 治疗性疫苗的种类治疗性疫苗的种类根据治疗性疫苗针对根据治疗性疫苗针对疾病种类的不同疾病种类的不同，，可可分为细菌型治疗性疫苗、病毒型治疗性疫分为细菌型治疗性疫苗、病毒型治疗性疫苗、肿瘤型治疗疫苗、自身免疫病治疗性苗、肿瘤型治疗疫苗、自身免疫病治疗性疫苗等根据治疗性疫苗的根据治疗性疫苗的作用机制作用机制，可，可分为特异分为特异性治疗性疫苗和非特异性治疗性疫苗性治疗性疫苗和非特异性治疗性疫苗根据所用根据所用免疫原的种类免疫原的种类，，可分为核酸型治可分为核酸型治疗疫苗、重组蛋白型治疗疫苗、天然蛋白疗疫苗、重组蛋白型治疗疫苗、天然蛋白型治疗疫苗、免疫复合物型治疗疫苗、嵌型治疗疫苗、免疫复合物型治疗疫苗、嵌合型治疗疫苗合型治疗疫苗 一、细菌型治疗性疫苗一、细菌型治疗性疫苗 1.1.结核杆菌治疗性疫苗结核杆菌治疗性疫苗 细菌性感染因有抗生素等治疗，可以控制，故治疗性疫细菌性感染因有抗生素等治疗，可以控制，故治疗性疫苗仅限于少数几种慢性感染，如结核病、麻风病及布氏病苗仅限于少数几种慢性感染，如结核病、麻风病及布氏病等 英国伦敦大学医学院英国伦敦大学医学院StanfordStanford对对BCGBCG预防结核病的效果在预防结核病的效果在某些国家中很好，而在另一些国家中则不佳的发现感到疑某些国家中很好，而在另一些国家中则不佳的发现感到疑惑不解。

惑不解StanfordStanford在乌干达土壤中分离到了一株分枝杆菌，在乌干达土壤中分离到了一株分枝杆菌，StanfordStanford等用杀死的等用杀死的Mycobacterium vaccaeMycobacterium vaccae制成菌苗，在制成菌苗，在冈比亚和越南对结核病患者进行治疗试验结果表明，抗冈比亚和越南对结核病患者进行治疗试验结果表明，抗结核病药物和菌苗治疗组的治愈率为结核病药物和菌苗治疗组的治愈率为8989％，而药物和安慰％，而药物和安慰剂治疗组的治愈率为剂治疗组的治愈率为7878％，使结核病病死率从％，使结核病病死率从8 8％降至％降至3 3％；％；能缩短常规药物治疗的奏效时间，药物治疗结核病需能缩短常规药物治疗的奏效时间，药物治疗结核病需6 6个个月，缩短至月，缩短至2 2个月，个月， 2020世纪初，为治疗金黄色葡萄球菌引起的世纪初，为治疗金黄色葡萄球菌引起的反复发作的疖及痈，反复发作的疖及痈，WrightWright等采用自患者分离的加热灭活的葡等采用自患者分离的加热灭活的葡萄球菌为治疗性疫苗，获得成功，奠定了萄球菌为治疗性疫苗，获得成功，奠定了细菌型治疗性疫苗的基础。

细菌型治疗性疫苗的基础 2 2．麻风杆菌治疗性疫苗．麻风杆菌治疗性疫苗麻风是慢性麻风杆菌感染，可引起严重的麻风是慢性麻风杆菌感染，可引起严重的神经损害和畸形神经损害和畸形 麻风有有效的治疗药物但是首先，往往麻风有有效的治疗药物但是首先，往往需要多种药物治疗数年才能从麻风患者体需要多种药物治疗数年才能从麻风患者体内清除麻风杆菌；其次，药物治疗不能纠内清除麻风杆菌；其次，药物治疗不能纠正可能先于感染存在的基本免疫缺损，在正可能先于感染存在的基本免疫缺损，在有些人中，能杀伤麻风杆菌细胞的细胞介有些人中，能杀伤麻风杆菌细胞的细胞介导免疫导免疫(CMI)(CMI)不起作用；最后，有些患者用不起作用；最后，有些患者用药物治疗无效药物治疗无效 19861986年，委内瑞拉生物学研究所年，委内瑞拉生物学研究所ConvitConvit用灭活的用灭活的麻风杆菌和卡介苗麻风杆菌和卡介苗(BCG)(BCG)制成混合菌苗，对制成混合菌苗，对300300例例严重麻风病人进行无对照研究，结果表明，菌苗严重麻风病人进行无对照研究，结果表明，菌苗和药物合用，可使和药物合用，可使6060％麻风患者恢复对麻风杆菌％麻风患者恢复对麻风杆菌的的CMlCMl应答。

应答CMICMI能从损害中清除麻风杆菌，使一能从损害中清除麻风杆菌，使一些患者不易复发或再感染些患者不易复发或再感染ConvitConvit报道，接种疫苗的患者的麻风损害在两年报道，接种疫苗的患者的麻风损害在两年内得到控制，比单用药物治疗的患者缩短一半时内得到控制，比单用药物治疗的患者缩短一半时间 印度国立免疫学研究所印度国立免疫学研究所TalwarTalwar用一种不同的治疗用一种不同的治疗性麻风菌苗进行试验，同样获得了令人鼓舞的结性麻风菌苗进行试验，同样获得了令人鼓舞的结果 3.3.幽门螺旋杆菌治疗性疫苗幽门螺旋杆菌治疗性疫苗全世界全世界5050％以上的人受到幽门螺杆菌％以上的人受到幽门螺杆菌(Helicobacter pylori(Helicobacter pylori，，HP)HP)的感染，其中的感染，其中约约10%10%～～2020％的感染者会导致胃溃疡和胃癌％的感染者会导致胃溃疡和胃癌等严重疾病等严重疾病 (1)HP(1)HP抗原蛋白加大肠杆菌不耐热肠毒素抗原蛋白加大肠杆菌不耐热肠毒素(heat liable enterotoxin(heat liable enterotoxin，，LT)LT)／霍乱肠／霍乱肠毒素毒素(choleratoxin(choleratoxin，，CT)CT)佐剂佐剂 ，成功地根，成功地根除了感染，并有效防止了再感染。

除了感染，并有效防止了再感染 (2)(2)表达尿素酶抗原的减毒沙门菌疫苗表达尿素酶抗原的减毒沙门菌疫苗 　　Londono ArcilaLondono Arcila等（等（20022002）先将尿素酶表）先将尿素酶表达在沙门菌载体达在沙门菌载体TyphiTyphi中，给小鼠鼻鼻饲，中，给小鼠鼻鼻饲，激发了针对尿素酶的激发了针对尿素酶的ThlThl型免疫反应，再用型免疫反应，再用尿素酶加铝佐剂增强皮下注射，结果促进尿素酶加铝佐剂增强皮下注射，结果促进了免疫反应，导致了一个更加平衡的了免疫反应，导致了一个更加平衡的ThlThl／／Th2Th2表型并产生了很好的保护作用并产生了很好的保护作用 (3)HP(3)HP裂解物加上佐剂裂解物加上佐剂 RaghavanRaghavan等等(2002)(2002)用用HPHP裂解物和黏膜佐剂裂解物和黏膜佐剂CTCT经口免疫小鼠，结果导致了经口免疫小鼠，结果导致了HPHP细菌载量细菌载量的明显降低，同时对再感染也有保护作用；的明显降低，同时对再感染也有保护作用；Th2Th2型的型的IgGlIgGl和和ThlThl型的型的IgG2aIgG2a血清抗体水平血清抗体水平增高，增高， (4)HP(4)HP的灭活全菌疫苗的灭活全菌疫苗 目前，口服福尔马林灭活的目前，口服福尔马林灭活的HPHP全菌疫苗全菌疫苗(H(H．．pylori whole cellpylori whole cell，，HWC)HWC)已进入临床已进入临床I I期实验。

期实验 (5)(5)注射用的多成分疫苗注射用的多成分疫苗 RossiRossi等等(2004)(2004)用用VacAVacA、、CagACagA、中性粒细胞、中性粒细胞激活蛋白激活蛋白(neutrophilactivating protein(neutrophilactivating protein，，NAP)3NAP)3种抗原加上氢氧化铝作为佐剂免疫种抗原加上氢氧化铝作为佐剂免疫毕格犬毕格犬(beagle dog)(beagle dog)，在预防性免疫中取，在预防性免疫中取得了很好的保护效果得了很好的保护效果 二、病毒型治疗性疫苗二、病毒型治疗性疫苗 1 1．单纯疱疹治疗性疫苗．单纯疱疹治疗性疫苗 在目前各种候选治疗性疫苗研究中，对疱在目前各种候选治疗性疫苗研究中，对疱疹病毒疫苗的研究最深入疹病毒疫苗的研究最深入单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒(HSV)(HSV)按血清学分为两型按血清学分为两型 I I型主要引起皮肤、黏膜感染，型主要引起皮肤、黏膜感染，ⅡⅡ型主要引型主要引起生殖器、肛门感染起生殖器、肛门感染 19881988年，年，StanberryStanberry等报道，用等报道，用HSV—IHSV—I混合混合疫苗接种豚鼠模型，可使疱疹损害率降低疫苗接种豚鼠模型，可使疱疹损害率降低5050％，病情减轻％，病情减轻5050％左右。

％左右 2 2．人类免疫缺陷病毒．人类免疫缺陷病毒(HIV)(HIV)的治疗性疫苗的治疗性疫苗 艾滋病艾滋病(AIDS)(AIDS)是一种由病毒引起的全身性传染病，是一种由病毒引起的全身性传染病，目前尚无有效的治愈方法，而且病死率极高目前尚无有效的治愈方法，而且病死率极高AIDSAIDS的病原体是人类免疫缺陷病毒的病原体是人类免疫缺陷病毒(HIV)(HIV)，它是，它是在首次发现艾滋病例在首次发现艾滋病例2 2年后才分离成功的年后才分离成功的 病毒的酶类主要包括逆转录酶，又称依赖病毒的酶类主要包括逆转录酶，又称依赖RNARNA的的DNADNA多聚酶多聚酶(p66(p66、、p51)p51)，整合酶和蛋白酶以及核，整合酶和蛋白酶以及核心壳蛋白心壳蛋白p9p9、、p7p7病毒的最外层为包膜，其主体病毒的最外层为包膜，其主体为磷脂双分子层．包膜表面有为磷脂双分子层．包膜表面有7272个刺突，每个刺个刺突，每个刺突由突由3 3～～4 4个个gpl20(gpl20(外膜糖蛋白外膜糖蛋白) )组成，组成，gp41gp41为跨为跨膜蛋白 最近，除最近，除gpl60gpl60外，其他的外，其他的HIVHIV的包膜抗原，的包膜抗原，如如gpl20gpl20、、p24p24病毒样颗粒，重组的金丝雀病毒样颗粒，重组的金丝雀痘病毒痘病毒gpl60gpl60等疫苗均仍在研究中。

等疫苗均仍在研究中 3 3．人类乳头状瘤病毒治疗性疫苗．人类乳头状瘤病毒治疗性疫苗 乳头状瘤病毒乳头状瘤病毒(PV)(PV)感染人及动物的皮肤或感染人及动物的皮肤或黏膜上皮细胞黏膜上皮细胞主要根据主要根据PVPV的宿主范围和基因组同源性划的宿主范围和基因组同源性划分型别目前，人类乳头状瘤病毒分型别目前，人类乳头状瘤病毒(HPV)(HPV)已已分为分为100100多型，多型，人类乳头状瘤病毒人类乳头状瘤病毒(HPV)(HPV)可引起皮肤疣、生可引起皮肤疣、生殖道疣等，其中某些型感染是引起生殖道殖道疣等，其中某些型感染是引起生殖道癌的一个主要因素，特别是子宫颈恶性肿癌的一个主要因素，特别是子宫颈恶性肿瘤 目前有大量有关目前有大量有关E6E6、、E7E7疫苗方面的研究疫苗方面的研究由于由于E6E6、、E7E7是癌蛋白，寻找是癌蛋白，寻找E6E6、、E7E7的的T T细胞细胞和和B B细胞表位尤为重要细胞表位尤为重要 三、自身免疫病治疗性疫苗三、自身免疫病治疗性疫苗 自身免疫病自身免疫病(autoimmune disease(autoimmune disease，，AID)AID)是是由于机体识别由于机体识别““自我自我””的耐受机制在某些的耐受机制在某些情况下遭到破坏，机体免疫系统针对自身情况下遭到破坏，机体免疫系统针对自身抗原产生过度应答，破坏正常组织结构，抗原产生过度应答，破坏正常组织结构，从而导致一系列病变。

从而导致一系列病变 1 1．多发性硬化症．多发性硬化症 多发性硬化症多发性硬化症(multiple sclerosis(multiple sclerosis，，MS)MS)是由细胞毒是由细胞毒T T细胞介导的、侵犯中枢神经系细胞介导的、侵犯中枢神经系统白质的慢性进行性统白质的慢性进行性AIDAID MSMS的自身抗原来源于中枢神经的髓鞘，其的自身抗原来源于中枢神经的髓鞘，其中髓磷脂碱性蛋白中髓磷脂碱性蛋白(MBP)(MBP)和蛋白脂蛋白和蛋白脂蛋白PLP)PLP)被认为是主要自身抗原，目前被认为是主要自身抗原，目前MSMS肽耐受研肽耐受研究多基于这两种抗原究多基于这两种抗原 近年来运用肽耐受的方法在实验性变态反近年来运用肽耐受的方法在实验性变态反应性脑脊髓膜炎和应性脑脊髓膜炎和MSMS临床治疗研究中均获临床治疗研究中均获得了令人振奋的结果，甚至有人认为肽疫得了令人振奋的结果，甚至有人认为肽疫苗最终可以普遍应用于苗最终可以普遍应用于MSMS的临床治疗的临床治疗  2.2.重症肌无力重症肌无力重症肌无力重症肌无力(MG)(MG)是由是由T T细胞调节失调引起的疾病，细胞调节失调引起的疾病，重症肌无力是由重症肌无力是由乙酰胆碱受体乙酰胆碱受体抗体介导的抗体介导的AIDAID，，这些抗体通过减少肌肉中这些抗体通过减少肌肉中AchRAchR的数量或阻碍乙酰的数量或阻碍乙酰胆碱与受体的结合，影响突触传递而使骨骼肌变胆碱与受体的结合，影响突触传递而使骨骼肌变得无力，得无力，有多项研究采用肽疫苗治疗有多项研究采用肽疫苗治疗MGMG，其中有，其中有3 3项研究项研究证明有较好前景：一是使用重组表达的多肽通过证明有较好前景：一是使用重组表达的多肽通过黏膜系统给药，有效诱导了免疫耐受和免疫抑制黏膜系统给药，有效诱导了免疫耐受和免疫抑制效应；二是使用一组多肽通过口服和鼻腔给药可效应；二是使用一组多肽通过口服和鼻腔给药可预防实验性预防实验性MGMG的发生；另外一项研究采用乙酰胆的发生；另外一项研究采用乙酰胆碱受体。

碱受体3 3．系统性红斑狼疮．系统性红斑狼疮 系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮(systemic lupus(systemic lupus　　erythematosuserythematosus，，SLE)SLE)是一种累及多个器官是一种累及多个器官或系统的、由多种自身抗体介导的或系统的、由多种自身抗体介导的AIDAID，其，其发病涉及遗传和环境等多种因素发病涉及遗传和环境等多种因素诱导诱导SLESLE发病的自身抗原来自于凋亡的外周发病的自身抗原来自于凋亡的外周血单一核细胞，种类繁多，对关键或主要血单一核细胞，种类繁多，对关键或主要自身抗原的确定一直是自身抗原的确定一直是SLESLE研究的难点，因研究的难点，因此对此对SLESLE疫苗的研究也相对复杂，困难也较疫苗的研究也相对复杂，困难也较多虽然现在没有进入临床实验阶段的疫多虽然现在没有进入临床实验阶段的疫苗出现，但是一些实验结果令人鼓舞苗出现，但是一些实验结果令人鼓舞  4 4、、I I型糖尿病型糖尿病 I I型糖尿病型糖尿病(type(type　　I diabetes)I diabetes)也称青少年也称青少年型糖尿病或胰岛素依赖性糖尿病，是一种型糖尿病或胰岛素依赖性糖尿病，是一种慢性的、胰岛慢性的、胰岛B—B—细胞选择性破坏的细胞选择性破坏的AIDAID。

热休克蛋白热休克蛋白60(HSP60)60(HSP60)是非肥胖性糖尿病是非肥胖性糖尿病(NOD)(NOD)小鼠自身免疫性糖尿病模型的小鼠自身免疫性糖尿病模型的T T细胞细胞识别靶蛋白识别靶蛋白 四、肿瘤治疗性疫苗四、肿瘤治疗性疫苗除心脑血管疾病之外，肿瘤除心脑血管疾病之外，肿瘤(tumor)(tumor)一直是一直是威胁人类健康的第一杀手肿瘤是机体中威胁人类健康的第一杀手肿瘤是机体中的正常细胞在各种外部致病因素和内部遗的正常细胞在各种外部致病因素和内部遗传因素的长期共同影响和作用下，发生过传因素的长期共同影响和作用下，发生过度增生和异常分化所形成的物质肿瘤实度增生和异常分化所形成的物质肿瘤实际上是破坏了或者是逃避了人体正常的免际上是破坏了或者是逃避了人体正常的免疫系统对它的监视作用所致疫系统对它的监视作用所致1 1．以肿瘤细胞为基础的第一代疫苗和树突细胞痘．以肿瘤细胞为基础的第一代疫苗和树突细胞痘苗苗 以细胞为组成的疫苗是肿瘤治疗性疫苗设计的热以细胞为组成的疫苗是肿瘤治疗性疫苗设计的热点，主要有肿瘤细胞和树突状细胞点，主要有肿瘤细胞和树突状细胞(dendritic (dendritic cellcell，，DC)DC)疫苗。

疫苗肿瘤细胞中包含着广谱的肿瘤抗原，但缺乏协同肿瘤细胞中包含着广谱的肿瘤抗原，但缺乏协同刺激分子以有效识别和激活免疫细胞刺激分子以有效识别和激活免疫细胞 ElliottElliott等等(1993)(1993)报道，将自体肿瘤细胞和异体报道，将自体肿瘤细胞和异体肿瘤细胞的裂解物混合并配以肿瘤细胞的裂解物混合并配以DETOXDETOX佐剂制成一佐剂制成一种疫苗叫做种疫苗叫做MelacineMelacine，发现它和化疗一样有效，，发现它和化疗一样有效，可以增加生存率，而毒副作用却很低可以增加生存率，而毒副作用却很低 2 2、转基因肿瘤细胞疫苗、转基因肿瘤细胞疫苗 (1)(1)细胞因子的导入细胞因子的导入 细胞因子可以在细胞间提供短暂的信号传细胞因子可以在细胞间提供短暂的信号传导，有效地激发免疫功能，又可避免其全导，有效地激发免疫功能，又可避免其全身性的不良反应身性的不良反应 学者们又发现从肿瘤组织中分离出来的肿学者们又发现从肿瘤组织中分离出来的肿瘤浸润淋巴细胞瘤浸润淋巴细胞(TIL)(TIL)能针对性地杀死肿瘤能针对性地杀死肿瘤细胞细胞 19911991年美国年美国FDAFDA批准世界第一例肿瘤基因治批准世界第一例肿瘤基因治疗方案，即疗方案，即TNF-aTNF-a基因导人基因导人TILTIL治疗黑色素治疗黑色素瘤。

瘤  (2)MHC(2)MHC（组织相容性复合体）分子的导入（组织相容性复合体）分子的导入 肿瘤逃避免疫监视的其中一个途径是通过肿瘤逃避免疫监视的其中一个途径是通过不表达或降低不表达或降低MHCMHC抗原由于抗原由于MHCMHC分子的表分子的表达降低，不能进行有效的抗原提呈过程，达降低，不能进行有效的抗原提呈过程，所以不能激发有效的免疫反应所以不能激发有效的免疫反应通过导入通过导入MHCMHC基因使肿瘤细胞基因使肿瘤细胞MHCMHC抗原表达抗原表达上调，从而使上调，从而使CTLCTL能够识别原来不能识别的能够识别原来不能识别的抗原而产生有效的应答抗原而产生有效的应答 (3)(3)癌基因及肿瘤相关抗原的导入癌基因及肿瘤相关抗原的导入 也有试验尝试导入突变的癌基因也有试验尝试导入突变的癌基因rasras、、p53p53或者一些肿瘤相关抗原基因，以期提高肿或者一些肿瘤相关抗原基因，以期提高肿瘤抗原的表达，但效果不甚满意瘤抗原的表达，但效果不甚满意 3 3．抗原合成肽疫苗．抗原合成肽疫苗 机体对肿瘤抗原应答的主要效应细胞是机体对肿瘤抗原应答的主要效应细胞是细细胞毒性胞毒性T T淋巴细胞淋巴细胞(CTL)(CTL)，，T T细胞受体在提呈细胞受体在提呈肿瘤抗原时是以短肽的形式进行的，新的肿瘤抗原时是以短肽的形式进行的，新的化学方法的引入和使用，使得利用肿瘤细化学方法的引入和使用，使得利用肿瘤细胞表面的抗原决定簇序列合成肽段进行肿胞表面的抗原决定簇序列合成肽段进行肿瘤免疫成为可能，瘤免疫成为可能，目前，利用多肽段进行肿瘤免疫治疗的研目前，利用多肽段进行肿瘤免疫治疗的研究已有不少报道，特别在黑色素瘤的研究究已有不少报道，特别在黑色素瘤的研究中取得了非常乐观的结果。

中取得了非常乐观的结果 4 4．肿瘤核酸疫苗．肿瘤核酸疫苗 基因疫苗的基本原理是通过将编码抗原的基因疫苗的基本原理是通过将编码抗原的质粒直接导人机体组织，再局部注射表达质粒直接导人机体组织，再局部注射表达该抗原，从而诱生抗原特异性体液和细胞该抗原，从而诱生抗原特异性体液和细胞免疫应答免疫应答 五、非特异性治疗性疫苗五、非特异性治疗性疫苗卡介苗曾被应用于治疗结核病及肿瘤卡介苗曾被应用于治疗结核病及肿瘤卡介苗主要用于非特异地提高机体的细胞卡介苗主要用于非特异地提高机体的细胞免疫，但作用较弱而被用作一种协同治疗，免疫，但作用较弱而被用作一种协同治疗，联合用于肿瘤病人联合用于肿瘤病人 短小棒状杆菌短小棒状杆菌( (革兰阳性杆菌革兰阳性杆菌) )以及其他的以及其他的一些细菌均曾被用作非特异的治疗性疫苗一些细菌均曾被用作非特异的治疗性疫苗 六、蛋白质复合重构治疗性疫苗六、蛋白质复合重构治疗性疫苗 对于蛋白质疫苗而言，改造可从几方面开对于蛋白质疫苗而言，改造可从几方面开展：展：①①在蛋白质水平上进行修饰，如脂蛋白化；在蛋白质水平上进行修饰，如脂蛋白化；②②在结构或构型上加以改造，如固相化、在结构或构型上加以改造，如固相化、交联、结构外显及构象限定等；交联、结构外显及构象限定等；③③在组合上可有多蛋白的复合及多肽偶联在组合上可有多蛋白的复合及多肽偶联等。

等 七、核酸型治疗性疫苗七、核酸型治疗性疫苗( (一一) )核酸疫苗的免疫机理核酸疫苗的免疫机理 目前对核酸疫苗免疫机理的认识还仅仅是目前对核酸疫苗免疫机理的认识还仅仅是个开始，许多实验现象还不能用现有的理个开始，许多实验现象还不能用现有的理论进行解释论进行解释 含病原体的含病原体的DNADNA疫苗被导入宿主的肌细胞或疫苗被导入宿主的肌细胞或皮肤细胞后，可在肌细胞内表达病原体的皮肤细胞后，可在肌细胞内表达病原体的蛋白质抗原，经加工后形成的蛋白质抗原，经加工后形成的多肽抗原多肽抗原可可与宿主细胞与宿主细胞MHCIMHCI类和类和MHCⅡMHCⅡ类分子结合，并类分子结合，并被提呈给宿主的免疫识别系统，从而引起被提呈给宿主的免疫识别系统，从而引起特异性体液和细胞免疫应答特异性体液和细胞免疫应答 另一种观点认为肌细胞的直接参与并非必另一种观点认为肌细胞的直接参与并非必需，目的基因产物从肌细胞分泌出来后，需，目的基因产物从肌细胞分泌出来后，被巨噬细胞或树突状细胞吞噬、提呈，分被巨噬细胞或树突状细胞吞噬、提呈，分别在别在MHCIMHCI和和MHCⅡMHCⅡ分子的限制下，诱导分子的限制下，诱导CTLCTL前体、前体、B B细胞和特异性细胞和特异性T T细胞。

细胞 还有一种解释是用还有一种解释是用DNADNA免疫时，肌细胞和抗免疫时，肌细胞和抗原提呈细胞均被感染，引起细胞亚群的同原提呈细胞均被感染，引起细胞亚群的同时活化，从而产生特异性细胞免疫应答时活化，从而产生特异性细胞免疫应答 ( (二二) )核酸疫苗的安全性问题核酸疫苗的安全性问题 作为质粒载体，在理论上最大的风险是整作为质粒载体，在理论上最大的风险是整合问题，即核酸疫苗整合到宿主合问题，即核酸疫苗整合到宿主DNADNA中，导中，导致插入突变的产生致插入突变的产生 另一个问题在于另一个问题在于DNADNA本身，进入体内的本身，进入体内的DNADNA是否会造成抗是否会造成抗DNADNA抗体而引起自身免疫病抗体而引起自身免疫病 另外，另外，DNADNA在体内持续表达外源蛋白可能会在体内持续表达外源蛋白可能会产生不良影响，如免疫耐受等情况产生不良影响，如免疫耐受等情况  ( (四四) )核酸疫苗的制备核酸疫苗的制备 首先构建携带有抗原基因的表达质粒首先构建携带有抗原基因的表达质粒DNADNA，，再通过培养含有表达质粒的工程苗使质粒再通过培养含有表达质粒的工程苗使质粒扩增，扩增，最后利用一系列的纯化方法获得纯度较高最后利用一系列的纯化方法获得纯度较高的质粒。

的质粒 ( (五五) )核酸疫苗的应用核酸疫苗的应用 1 1．．DNADNA疫苗用于治疗艾滋病疫苗用于治疗艾滋病 2 2．．DNADNA疫苗用于肿瘤治疗疫苗用于肿瘤治疗3 3．．DNADNA疫苗用于治疗自身免疫性疾病疫苗用于治疗自身免疫性疾病4 4、、DNADNA疫苗用于治疗结核病疫苗用于治疗结核病5 5．．DNADNA疫苗用于治疗寄生虫病疫苗用于治疗寄生虫病 作业题：作业题：核酸型治疗性疫苗安全性问题有哪些，核酸型治疗性疫苗安全性问题有哪些，核酸型治疗性疫苗的制备方法，核酸型治疗性疫苗的制备方法， 。