大黄中大黄素的提取分离和鉴定.docx

本文格式为Word版，下载可任意编辑大黄中大黄素的提取分离和鉴定 大黄中大黄素的提取、分开与鉴定 一、 测验目的 （1）熟谙蒽醌类成分的提取分开方法 （2）掌管PH梯度提取法的原理和操作技术 （3）掌管蒽醌类化合物鉴定方法 （4）了解液液萃取法分开混合物的测验方法 二、 测验原理 大黄为蓼科植物,味苦,性寒,具有泻热通肠、凉血解毒、逐瘀通经等成果其主要有效成分为大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚等蒽醌类化合物 ,其中大片面为结合的蒽醌,少量为游离的蒽醌结合的蒽醌类化合物由于其苷元具有酚羟基,故呈弱酸性,能溶于水、乙醇、碳酸氢钠溶液,但在有机溶剂中的溶解度很小游离的蒽醌易溶于氯仿、乙醚等有机溶剂而不溶于水其中，大黄酸具有羧基，酸性最强；大黄素具有β-酚羟基，酸性其次；芦荟大黄素连有羟甲基，酸性第三；大黄素甲醚和和大黄酚的酸性最弱根据以上化合物的酸度差异，可用碱性强弱不同的溶液举行梯度萃取分开1】 本测验主要用薄层层析法分开纯化大黄素，其Rf值由大到小分别为大黄酚和大黄素甲醚、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸2】 大黄酸：黄色针状结晶mp.321—322℃（升华），不溶于水，能溶于吡啶、碳酸氢钠水溶液，微溶于乙醇、苯、氯仿、乙醚和石油醚。

大黄素：橙黄色针状结晶，mp.256—257℃（乙醇或冰醋酸），能升华其溶解度如下：四氯化碳0.01%、氯仿0.07%、二硫化碳0.009%、乙醚0.14%、苯0.041%易溶于乙醇，可溶于稀氨水、碳酸钠水溶液，几乎不溶于水3】 OHOOHR1O大黄酸 R1=H R2=COOH 大黄素 R1=CH3 R2=OH 芦荟大黄素 R1=CH2OH R2=H R2 大黄素甲醚 R1=CH3 R2=OCH3 大黄酚 R1=CH3 R2=H 三、 测验器材 试药：大黄粗粉、20%硫酸溶液、5%碳酸氢钠溶液、5%碳酸钠溶液、盐酸、丙酮、乙酸乙酯、硅胶CMC-Na板、石油醚、大黄素标准品等 仪器：回流装置一套、烧杯、层析槽、试管、梨形分液漏斗、水浴锅、电热套、旋转蒸发仪 循环水式多用真空泵、抽滤瓶、铁架台等 四、 测验内容 大黄素的提取、分开流程图 大黄粗粉30g【4】 20%H2SO4 150ml 加热1h,抽滤、枯燥 滤饼 乙酸乙酯回流提取1h 乙酸乙酯层 5%NaHCO3萃取 水层（紫红色） 乙酸乙酯层 5%Na2CO3 水层（红色） 乙酸乙酯层（弃掉） HCl 黄色沉淀（粗品） 水洗至中性，丙酮溶解，分开纯化 大黄素结晶 概括操作步骤： 1.游离蒽醌的提取 称取大黄粗粉30g，加20%H2SO4水溶液150mL，加热1小时，放冷，抽滤，同时滤饼水洗至近中性（除去H2SO4），于70℃枯燥后，置回流装置中，参与乙酸乙酯300 mL回流提取1小时，得到乙酸乙酯提取液。

2.PH梯度萃取分开 （1）将乙酸乙酯提取液参与分液漏斗中，用 5% NaHCO3水溶液萃取三次，经查看乙酸乙酯层颜色变浅及无气泡产生为止 （2）经5% NaHCO3水溶液萃取后的乙酸乙酯层，继以5% Na2CO3水溶液萃取三次，乙酸乙酯层经薄层检查(标准大黄素作对照)，得知已提尽大黄素后，合并三次Na2CO3萃取液，并用HCl酸化，得大黄素沉淀留神:加酸时应缓慢参与，以防酸液溢出） 3.大黄素的精制 过滤大黄素沉淀，水洗沉淀物至洗出液呈中性，用适量丙酮溶解，用自备薄层色谱分开纯化大黄素薄层层析板上橙色层为大黄素，将其刮下溶于丙酮中2】用旋转蒸发仪浓缩丙酮溶液，得到大黄素结晶 4.大黄素的薄层色谱检识【5】 薄层板：硅胶CMC-Na板 样品液：自制大黄素溶液 对照品：标准大黄素溶液 开展剂：石油醚-乙酸乙酯（7：3） 显色：查看斑点颜色及计算Rf值 五、 留神事项： （1) 游离蒽醌的提取要操纵温度，不宜太高 （2) PH梯度萃取分开时，要检查是否萃取完全 （3) 留神碱液浓度及萃取时的静置时间对测验结果的影响 六、 — 4 —。