植物组织中硝态氮含量的测定.docx

植物组织中硝态氮含量的测定目的意义 根系吸收的无机态氮，有铵态氮和硝态氯植物体内硝态氮合量可以反映 土壤氮素供应情况，常作为施肥指标叶菜类和根菜类中常含有大量硝酸盐，在烹调和腌制 过程中可转化为亚硝酸盐而危害人体健康测定植物组织硝态氮含量对研究植物氮素营养和 农产品安全性均有重要作用一、实验原理本实验采用硝基水杨酸比色法测硝态氮，其原理是在有浓硫酸的条件下no3与水杨酸 生成硝基水杨酸产物硝基水杨酸在碱性条件下(PH〉12)呈黄色，在410 nm处有最大吸收峰, 在范围内，其颜色的深浅与含量成正比，可直接比色测定二、材料、设备和试剂1. 材料 玉米、接骨木、瓜类、葡萄等植株幼苗2. 设备 电子天平、分光光度计、恒温水浴锅、容量瓶、刻度试管、漏斗、滤纸等3. 试剂(1) 100mg/L硝态氮标准溶液 精确称取烘干至恒重的KN03 0.7221g溶于蒸馏水(无 离子水)中，定容至1000ml2) 5%水杨酸-硫酸溶液 称取5g水杨酸溶于100ml浓硫酸中(密度为1.84),搅拌 溶解后，贮存于棕色瓶中，置冰箱保存1周有效3) 8%氢氧化钠溶液 称取20g氢氧化钠溶于250ml蒸馏水中三、操作方法1．标准曲线的制作(1) 吸取100 mg/L硝态氯标准溶液1m1、2ml、4m1、6m1、8ml、10ml、12m1分别放入 10ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，使之成为10、20、40、60、80、100、120临/m 1硝 态氮的系列标准液。

2) 取8支试管，分别编号为0-7,以0号管加入0.1ml蒸馏水作空白，1-7号管分别吸 取上述系列标准溶液0.1ml再分别加入0.4ml 5%水杨酸一硫酸溶液，摇匀，在室温下放 置20min后，再加入8%NaOH溶液9.5ml,摇勾冷却至室温，以空白作参比，在410nm波长 下测定吸光度，以硝态氯含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线2.样品制备 称新鲜植物组织l-2g研成匀浆，(或称经70°C烘干磨碎过60目即孔径 0.25mm筛的干样100mg)装入20m1具塞刻度试管，加无离子水10-20ml，盖紧塞子，置于45C 恒温水浴浸提1h,其间不断摇动，然后过滤或离心(如含色素需脱色)，滤液备用若样品 是伤流液，则可直接测定3．硝态氮的漓定吸取样品液0.1m1放入故人编号为8的试管中，其他操作同标准曲线，在标准曲线上可 查得硝态氮含量表1水杨酸比色法测硝态氮反应体系项目管号012345678硝态氮系列浓度(Ag/ml)01020406080100120样品各浓度硝态氮用量(ml)水0.10.10.10.10.10.10.10.10.1每管含硝态氮(Ag)0124681012x5%水杨酸-硫酸(ml)0.40.40.40.40.40.40.40.40.48%NaOH(ml)9.59.59.59.59.59.59.59.59.5吸光度值(a410)四、实验结果样品中硝态氮含量（Pg/g） =mxxV/V]XW mj标准曲线查出测定液中硝态氮含量（临）V:样品提取液总体积（ml）V]：用于测定的样品液（ml） W:样品鲜重或干重（g）。