CgA和SYN在非小细胞肺癌中表达的意义及其与预后的关系.docx

上海交通大学 硕士学位论文CgA和SYN在非小细胞肺癌中表达的意义及其与预后的关系姓名：戴费申请学位级别：硕士专业：内科学（呼吸病学）指导教师：韩宝惠20090401上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成 果除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的 作品成果对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明本人完 全意识到本声明的法律结果由本人承担学位论文作者签名：日期： 年 月 日上海交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关 部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅本人授权上海交通大学可 以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等 复制手段保存和汇编本学位论文保密口，在 年解密后适用本授权书本学位论文属于不保密口请在以上方框内打“寿）学位论文作者签名:指导教师签名:日期： 年 月 日日期： 年 月 日CgA和SYN在非小细胞肺癌中表达的意义及其与预后的关系摘要目的研究神经内分泌分化标志物CgA和SYN在可切除的非小细胞肺癌 (NSCLC)中表达的意义和预后的关系。

方法收集2000年1月-2003年1月肺癌手术切除标本，应用免疫组化二步法 (Elivison)分析CgA和SYN的表达，使用Kaplan-Meier生存分析和Cox 风险比例模型分析影响肺癌患者预后的因素结果CgA阳性表达率22%, SYN阳性率17.9%o CgA在腺癌中高表达，SYN 在腺鳞癌，腺癌中表达较高SYN的表达在不同分化程度的肿瘤标本中 有明显差异(p=0.001) o非小细胞肺癌伴神经内分泌分化在低分化癌中 常见，其表达和性别，年龄，吸烟指数，TNM分期，病理类型无相关有 神经内分泌分化的肺癌患者更容易产生肺外转移(p=0.007)o没有证据显 示神经内分泌分化的NSCLC患者可以耐受更多的化疗次数(p=0.406)o Kaplan-Meier生存曲线表明有神经内分泌分化的患者生存期较短Cox 比例风险模型分析表明SYN的阳性表达(p = 0.001) , TNM分期(p=0.02) 和肿瘤最大直径(p=0.049)是影响非小细胞患者预后的独立危险因素结论肺癌伴神经内分泌分化的肿瘤侵袭性强，预后差，且容易产生肺外 转移其标记物SYN可作为临床判断预后的指标之一关键词：肺癌，嗜铭蛋白A,突触素，神经内分泌分化，预后THE EXPRESSION AND PROGNOSTIC SIGNIFICANCE OF CHROMOGRANIN A AND SYNAPTOPHYSIN IN PATIENTS WITH NON-SMALL CELL LUNG CANCERABSTRACTObjective: To study the expression and prognostic significance of neuroendocrine differentiation markers chromogranin A (CgA) and synaptophysin(SYN) in patients with resectable non-small cell lung cancer(NSCLC).Methods: Immunohistochemical method Elivison was used to detected the expression rates of CgA and SYN in 123 resected NSCLC specimens enrolled from 2000.1-2003.1. Kaplan-Meier and Cox proportional hazard model multivariate analysis were applied to analysis the prognostic factor.Results: The positive expression rates of CgA and SYN were 22%, 17.9%, respectively. CgA had a high expression in Adenocarcinoma. SYN had high expressions in the Adenosquamous and Adenocarcinoma.The expression of SYN had a association with histological differentiation (p=0.001). Non-small cell lung cancer with neuroendocrine differentiation had a high expression in Low differentiation cancer. No association was found between non-small cell lung cancer with neuroendocrine differentiation (NSCLC-ND) and sex, age, smoke index, TNM Stage, Pathology. The patients with NSCLC-ND was easy to find metastasis outside the lung(p=0.007). No evidence showed the patients with NSCLC-ND could be tolerant with more cycles of chemotherapy (p=0.406). Kaplan-Meier survival curve indicated the survival had a relation with neuroendocrine differentiation. In Cox proportional hazard model multivariate analysis that SYN(p=0.001), TNM stage(p=0.02), the maximal diameter of tumor(p=0.049) showed an opposite effect on survival.Conclusion: The patients with NSCLC-ND had a poor prognosis and the tumor was easy to invade and metastasis. SYN may be one of prognostic factors in patients with NSCLC.KEY WORDS: lung cancer, CgA, SYN, neuroendocrine differentiation, prognosis肺癌是最常见的恶性肿瘤，已成为人类因癌症死亡的最主要原因之一。

世界卫 生组织在2001年曾经发布警告说，在过去的10年中，全球肺癌的发病率每年以22 %的速度在飞快上升，每年全球新增肺癌患者达120万人，死亡110万人在我国 沿海城市肺癌在男性中已经占首位，在女性中居第二现代医学强调循证医学的同时也十分重视个性化治疗，所以明确肿瘤的分类及 其亚型十分重要，因为它和患者的个性化治疗密切相关，并能为肿瘤的流行病学及 生物学研究提供基础目前，肺癌按病理类型可分为小细胞肺癌、鳞癌、腺癌、腺 鳞癌、大细胞癌和伴有多形性/肉瘤样/肉瘤成分的癌等类型众所周知，因小细胞 肺癌和鳞癌、腺癌、腺鳞癌、大细胞癌的病理分类不同，对放射治疗和药物治疗敏 感的程度及预后也不同即使是归于非小细胞肺癌的腺癌由于存在多种亚型，如腺 泡状腺癌，乳头状腺癌，细支气管肺泡癌，伴有黏液的实性腺癌，伴有混合亚型的 腺癌，变异型（高分化胎儿型腺癌、黏液腺癌、黏液性囊腺癌、印戒细胞腺癌、透明 细胞腺癌），其各种亚型对化疗的敏感性及预后也是存在着差异［1］能较好的明确肺癌的病理类型及亚型，对研究某些异质性肺癌的生物学特性及 开展个性化治疗可以提供较多的依据自1981年公布WHO分型后，对肺肿瘤已有了更 进一步的认识，肺神经内分泌肿瘤的概念已被重新界定。

肺的神经内分泌肿瘤是一 种独特的亚型，它拥有某些形态学、超微结构和分子学特征在组织病理学上能识 别的类型有典型类癌和不典型类癌，大细胞神经内分泌癌，小细胞癌（复合性小细胞 癌）肿瘤组织内的神经内分泌分化（Neuroendocrine differentiation, ND）是指肿 瘤组织中部分肿瘤细胞出现ND现象，它不同于一般内分泌腺肿瘤和神经内分泌肿瘤， 肿瘤组织中这部分ND的肿瘤细胞为肿瘤组织的一种伴随成分，同样也是肿瘤组织的 一部分神经内分泌分化现象在多种肿瘤中被发现，近年来研究发现一部分（10〜30%） 非小细胞肺癌中也有神经内分泌分化特征［2］ o WHO在1999年“肺与胸膜肿瘤组织病 理学分类标准"中，新增加了非小细胞肺癌伴神经内分泌分化（Non-small cell lung carcinomas with neuroendocrine differentiation, NSCLC-ND)的概念.但只是提 出了这个概念，并没有把它单独的归到某一病理类型中非小细胞肺癌伴神经内分泌分化是指在光镜下不具有神经内分泌形态特征，但 免疫组化和电镜证明有神经内分泌分化的非小细胞肺癌。

免疫组化标记是检测神经 内分泌分化(ND)较好的方法，目前，嗜格蛋白A(Chromogranin A, CgA)和突触素 (Synaptophysin, SYN)是最可靠的标记WHO定义为以上任何一个指标阳性就表明有 神经内分泌分化有研究显示NSCLC-ND的患者对化疗的敏感程度介于小细胞肺癌和 非小细胞肺癌之间，其预后相对较差[3],国外研究对此有所争议，而国内对其标记物 在免疫组化方面的研究较多，对生存期的影响研究较少，本文通过对NSCLC-ND标志 物CgA和SYN蛋白的检测来探索其在NSCLC患者中的临床意义及其对预后的影响材料和方法1.1标本样本：收集2000.1-2003.1年在我院行手术治疗的中国人非小细胞肺癌标本123例，全部病例经术后病理证实为I~III期非小细胞肺癌(NSCLC)患者手术前均 未接受过抗肿瘤治疗标本经过10%福尔马林固定，石蜡包埋，5|im厚切片1.2仪器设备：一抗：特异性标记物鼠抗人单克隆CgA抗体和鼠抗人单克隆SYN抗体，购至于 上海长岛生物技术有限公司二抗：Dako REALTm EnvisionTm HRP Rabbit/mouseDAB显色剂：DakoRealTm切片机:LECIA RM2245光波炉:格兰仕微波炉微波频率2450MHz离心机：16000转/分，TGL-16G型号电热恒温鼓风干燥器：功率3000w。

最高工作温度300度抗体稀释液：DakoLytomation Dako Antibody Diluent1.3免疫组化方法：将实验所需的肺癌肿瘤组织至于68°C烤箱中烤片4小时一)切片脱蜡、水化：二甲苯I 5min,二甲苯II 5min；无水酒精I2min,无水酒精II2min； 95%酒精2min, 85%酒精2min, 75%酒精2min；自来水洗2min,蒸馄水洗2。