山大20年招生硕士学位研究生入学考试《生物化学》试题A及答案.docx

山大20年招生硕士学位研究生入学考试《生物化学》试题A及答案一 、名词解释( 12个 ,每个2分)1、差向异构体 2、丝氨酸蛋白酶 3、酶的活性部位 4、双向电泳 5、糖异生 6、前手性 7、酮体 8、一碳单位 9、错配修复 10、冈崎片段 11、氨酰-tRNA合成酶 12、滚环复制三、简答题（一个四分~）1.某种酶纯化后的活力单位比粗提取的活力单位还要高，为什么？2.A蛋白分子量是60KD，用尿素处理后检测到30KD的条带，用尿素和巯基乙醇处理后检测到15KD的条带，请分析一下这个蛋白的结构3.有一个六肽，组成是 2R A S V Y. N端检测到N末端是A，用胰蛋白酶处理后得到 A (V R）（R S Y) .羧肽酶A处理后没有得到任何氨基酸糜蛋白酶处理后得到（A R V Y）（R S） 括号里的都不确定顺序请说出六肽的顺序组成4.砷酸能否抑制葡萄糖氧化降解代谢5.比较丙酮酸脱氢酶系和 a-酮戊二酸脱氢酶系反应异同6.氨基酸降解的主要步骤，利用氨基酸降解产能存在什么问题？7.说出下列情况下Tm值曲线的变化  （1）降低溶液离子浓度  （2）加入少量乙醇8.大肠杆菌中合成的DNA是一段一段的，但是尿嘧啶糖基化酶缺陷的大肠杆菌中只有一半是一段一段的，为什么？9.在T7噬菌体的mRNA转录体中，有一段5'-ACGAGGUAA-3' 中的G全部突变成A，会有什么后果？10.DNA中的密码子由 ATA突变成了ATG，对多肽链产物有什么影响？四、论述题（一个八分）1.设计一个实验检测肽链中的二硫键，肽链中有三个Cys。

2.下列情况对血红蛋白氧和曲线的影响   （1）BPG 浓度升高  （2）CO2浓度升高 （3）  PH降低 （4） 四级结构遭到破坏3.胎儿血红蛋白（HbF）在相当于成年人血红蛋白（HbA ）a链143残基位置含有Ser，而成年人a链的这个位置是具阳离子的His残基残基143面向亚基之间的中央空隙1）为什么2,3-BPG同脱氧HbA的结合比同脱氧HbF更牢固？（2）HbF对2，3-BPG低亲和力如何影响到HbF对氧的亲和力？（3）这种差别对于氧从母体血液向胎儿血液的运输有何意义？4.嘌呤碱基和芳香族氨基酸侧链生物降解的共同点5.三大类营养物质共同的好氧代谢途径6.PCR反应中，（1）检验沉淀中放射性来推测单体掺入量时，用dNTP32在a位P标记的化学基础是什么？（2）如果加的时候漏加了一种dNTP会有什么后果？（3）如果不是在a位P上标记而是在其它位点上标记，有什么后果？7. 能够与tRNA相互作用的组分，写出五种以上生化真题答案三、1、在酶纯化过程中，由于不小心加入或丢失了事先不知道的酶的激活剂或抑制剂，可能会使纯化步骤中酶的活力升高2、该蛋白是由两个分子量为30KD的亚基构成；亚基是由两条分子量各为15KD的肽链彼此以二硫键相连组成的。

3、4、不抑制，因为砷酸只是基质水平磷酸化的解偶联剂它起着解偶联的作用，解除了氧化和磷酸化的偶联作用，不形成高能磷酸键，但糖酵解过程正常进行5、同：（1）a-酮戊二酸脱氢酶系和丙酮酸脱氢酶系极其相似，都是多酶复合体a-酮戊二酸脱氢酶系包括：a-酮戊二酸脱氢酶、二氢硫辛酰转琥珀酰酶、二氢硫辛酰脱氢酶丙酮酸脱氢酶系包括： 丙酮酸脱氢酶、二氢硫辛酰转乙酰基酶、二氢硫辛酰脱氢酶2）两酶系所催化的每步反应机制相一致，也都需要TPP、硫辛酸、辅酶A、FAD、NAD+、Mg2+6种辅助因子3）a-酮戊二酸脱氢酶系受调控的很多方面也和丙酮酸脱氢酶系非常相似a-酮戊二酸脱氢酶受其产物琥珀酰CoA和NADH的抑制，也同样受高能荷的抑制异：丙酮酸脱氢酶系中的丙酮酸脱氢酶受磷酸化和去磷酸化共价修饰的调节，磷酸化使其失去活性；而a-酮戊二酸脱氢酶不受磷酸化和去磷酸化的调节6、氨基酸降解的过程：（1）第一步，脱氨基，脱下的氨基或转化为氨，或经储氨反应转化为Asp或Glu的氨基2）第二步，氨与Asp的氮原子相结合，成为尿素并被排出体外3）第三步，氨基酸脱氨后产生的a-酮酸转化为一般的代谢中间体问题：（1）氨基酸降解产能较少，不能满足人体需要；（2）当大量降解氨基酸时，会产生过多的氨，进入尿素循环，加重肝脏负担，且氨对人体有毒害作用。

7、（1）如果降低介质中的离子强度，将减少DNA糖-磷酸骨架的磷酸基负电荷的中和（掩盖），加大带负电荷的磷酸基的彼此排斥，其结果将会降低它的Tm2）乙醇是非极性溶剂，它的加入会减小稳定双螺旋DNA的疏水作用，因此会降低其Tm8、原因是细胞内有低浓度的dUTP，DNA聚合酶对其分辨率不高，产生的脲嘧啶碱基会迅速的被脲嘧啶-N-糖苷酶切除，接着进行核苷酸切除修复，这是暂时导致在DNA上产生一个断裂在DNA聚合酶I和DNAligase完成修复之前分离到的DNA片段是一段一段的在尿嘧啶N-糖基化酶缺陷的大肠杆菌突变体中只有约一半的新合成的DNA是一段一段的原因是其缺失这种校正功能9、5′-ACGAGGUAA-3′中的G全部变为A后成为5′-AGAAAAUAA-3′，病毒mRNA在3′端有一段非常保守的，这段序列为链的切断和多聚腺苷酸化提供了某种信号，因此，G全部变为A后，会引起mRNA链被RnaseⅢ切断，再由多聚腺苷酸聚合酶催化多聚腺苷酸化在链的3′端切断并加上polyA尾巴）10、ATA→ATG转录：ATA→AUA 翻译; AUA→Ile ATG→AUG AUG→Met 起始密码子四、1、2、略3、（1）由于2,3-BPG是同脱氧HbA中间空隙带正电荷的侧链结合，而脱氧HbF减少带正电荷的侧链（a链143位的His残基），因此2,3-BPG是同脱氧HbA的结合比同脱氧HbF的结合更紧。

2）2,3-BPG稳定血红蛋白的脱氧形式，降低血红蛋白的氧饱和度由于HbF同2,3-BPG亲和力比HbA低，HbF受血液中2,3-BPG影响小，因此HbF在任何氧分压下对氧的亲和力都比HbA大（3）亲和力的这种差别 允许氧从母亲血向胎儿有效转移4、略5、糖类、蛋白质、脂肪这三大类营养物质都可以以乙酰辅酶A为中间体，以TCA循环为三大类营养物质的共同好氧途径：（1）糖类①葡萄糖经糖酵解过程，在细胞质溶质中由1mol六碳葡萄糖转化为2mol的丙酮酸②丙酮酸粒体基质由丙酮酸脱氢酶复合体催化氧化脱羧为乙酰辅酶A，乙酰辅酶A进入TCA循环被彻底氧化为二氧化碳，并产生3molNADH 2molFADHZ2 1molGTP③NADH FADH2经电子传递链将其脱下的氢传递给氧生成水，所释放的自由能氧化磷酸化为ATP（2）蛋白质①蛋白质被降解为氨基酸②氨基酸在转氨酶的作用下与a-酮戊二酸生成丙酮酸，丙酮酸再氧化脱羧为乙酰辅酶A，氨基酸经过乙酰乙酰辅酶A再形成乙酰辅酶A或氨基酸直接形成辅酶A③乙酰辅酶A进入TCA循环被彻底氧化为CO2，并产生NADH FADH GTP④NADH FADH2经电子传递链将其脱下的氢传递给O2生成水，所释放的自由能氧化磷酸化为ATP（3）脂肪①脂肪可转变为甘油，甘油再转变为磷酸二羟丙酮进入糖酵解途径生成丙酮酸，进而转变为或乙酰辅酶A；直接通过β-氧化降解为乙酰辅酶A②乙酰辅酶A进入TCA循环被彻底氧化为CO2，并产生NADH FADH GTP③NADH FADH2经电子传递链将其脱下的氢传递给O2生成水，所释放的自由能氧化磷酸化为ATP综上所述，三大类营养物质均可以由不同途径生成乙酰辅酶A，乙酰辅酶A进入TCA循环，产生NADH FADH2，NADH FADH2经电子传递链将其脱下的氢传递给O2，形成跨线粒体内膜的质子浓度差，推动ATP合成酶合成ATP，完成好氧代谢途径，为机体提供能量。

6、（1）DNA的基本结构是脱氧核糖核苷酸，脱氧核糖核苷酸之间靠3′-5′磷酸二酯键相连为DNA，3′-5′磷酸二酯键是由前一个核苷酸的3′-OH和后一个核苷酸的a-磷酸形成，所以标记dNTP的a-磷酸来检测核苷酸的掺入量2）DNA有四种脱氧核糖核苷酸组成：腺嘌呤脱氧核糖核苷酸、鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸、胞嘧啶脱氧核糖核苷酸、胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸如果只标记一种dNTP，会使放射性检测结果减3/4，即只能检测出被标记dNTP的量3）DNA聚合酶需要以四种脱氧核糖核苷酸为底物，漏加一种核苷酸，不能形成DNA4）在DNA聚合酶催化的链延长反应中，链的游离3-OH对进入的脱氧核糖核苷三磷酸a磷原子发生亲核攻击，从而形成3′-5′磷酸二酯键并脱下焦磷酸，标记其他位置的P会被脱下形成焦磷酸，DNA检测不到放射性7、（1）氨基酸tRNA3′端CCA-OH上有氨基酸结合位点（2）氨酰-tRNA合成酶活化氨基酸（3）密码子tRNA上的反密码子位点与mRNA的密码子相识别而配对（4）核糖体的识别位点真核生物蛋白质合成起始时，需氨酰-tRNA与核糖体的结合（5）起始因子翻译起始因子IF也可与tRNA相互作用，有助于蛋白质起始。