化学药物中亚硝胺类杂质研究技术指导原则(试行)[整理].pdf

1 化学药物中亚硝胺类杂质研究技术指导原则（试行） 一、概述 自 2018 年 7 月在缬沙坦原料药中检出N-亚硝基二甲胺 （NDMA ）以来， 陆续在其他沙坦类原料药中检出了各类亚 硝胺杂质，如NDMA 、N-亚硝基二乙胺 (NDEA) 等进一步 的调查发现，在个别供应商的非沙坦类的药物中（如雷尼替 丁） ，亦有亚硝胺类杂质的检出亚硝胺类杂质属于ICH M7 （R1）(评估和控制药物中DNA 反应性（致突变）杂质以 限制潜在致癌风险)指南 【1】中提及的“关注队列”物质 根据世界卫生组织公布的致癌物清单 【2】 ，NDMA和 NDEA 均属于 2A 类致癌物质；根据国际认可数据库，已有部分亚 硝胺类杂质有公开的致癌性数据，如NDMA 、NDEA 、N- 亚硝基 -N- 甲基 -4- 氨基丁酸（NMBA ） 、N- 亚硝基二丁胺 （NDBA ）等 为了保证药品的安全和质量可控，实现有效的风险控 制，特制定本技术指导原则，旨在为注册申请上市以及已上 市化学药品中亚硝胺类杂质的研究和控制提供指导 1 / 14 2 药品上市许可持有人/ 药品生产企业应切实履行药品质 量管理的主体责任，对药品的安全和质量进行全生命周期管 理，尽可能的避免亚硝胺类杂质的引入，若确不能完全避免 的，应充分评估药品中亚硝胺类杂质的风险，并将亚硝胺类 杂质水平控制在安全限度以下。

二、亚硝胺类杂质产生的原因 根据目前所知， 亚硝胺类杂质有多种产生原因 【3】 ，如工 艺产生、降解途径和污染引入等具体来讲，亚硝胺类杂质 可能通过以下途径引入 【4】 ： （一）由工艺引入亚硝胺类杂质的风险 目前所知， NDMA 、NDEA 杂质可能通过亚硝化机理生 成即在一定条件下，胺类化合物尤其是仲胺，与亚硝酸钠 （NaNO2）或其他亚硝化试剂反应产生亚硝胺类杂质 在同一工艺步骤中使用了能引入仲胺和亚硝化试剂的 物料（包括起始物料、溶剂、试剂、催化剂、中间体等）， 有较高的风险引入亚硝胺类杂质；即使在不同的工艺步骤中 分别使用能引入仲胺和亚硝化试剂的物料，也可能会产生亚 2 / 14 3 硝胺类杂质 除物料本身带有仲胺结构外，仲胺可能的来源有： 伯胺、 叔胺及季铵可能引入仲胺杂质；酰胺类溶剂（如N,N-二甲 基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮等） 在适宜的条件下 （如：酸性， 高温等）可能产生仲胺 亚硝化试剂可能引入来源有：亚硝酸盐、亚硝酸酯、亚 硝酸、由亚硝酸盐制备的物质（如:叠氮化钠等） ，胺类化合 物的氧化等 （二）由污染引入的风险 原料药生产过程中使用了被亚硝胺类杂质污染的物料 （起始物料、中间体、溶剂、试剂、催化剂等）可能带来亚 硝胺类杂质的风险。

使用回收的物料亦有引入亚硝胺类杂质的风险已发现 的回收物料被亚硝胺污染的实例包括邻二甲苯、氯化三丁基 锡（用作叠氮化三丁基锡的来源）、N，N-二甲基甲酰胺 （DMF ） 在同一生产线生产不同的品种，交叉污染也可能成为引 3 / 14 4 入亚硝胺类杂质的潜在原因 （三）降解产生风险 某些药物本身会降解产生亚硝胺类杂质，如雷尼替丁在 高温下会产生亚硝胺类杂质 三、控制策略 （一）基本控制理念 由于亚硝胺类杂质在人体中可接受限度较小，微量杂质 的检测和控制难度大因此对于亚硝胺类杂质的控制应采取 避免为主，控制为辅的策略 避免为主是指在药品的研发阶段应根据亚硝胺类杂质 产生的原因从原料药工艺路线的选择、物料的选择与质控、 工艺条件的优化等方面尽量避免亚硝胺类杂质的产生，并在 生产过程中严格执行各操作规范药品上市许可持有人/ 药品 生产企业应与各物料（原料药应包括起始物料、溶剂、试剂、 催化剂、中间体等，制剂应包括原料药、辅料、包材等等） 生产商充分沟通，对物料生产和回收工艺进行系统评估风 险评估方法可以采用ICH Q9 （ 质量风险管理 ）中所述的 FMEA （Failure Mode Effects Analysis） 或 FMECA（Failure 4 / 14 5 Mode, Effects and Criticality Analysis） 【 5】 ，或其他科学合 理的方法。

若评估发现有生成亚硝胺类杂质的风险，应首先分析亚 硝酸盐或者可能形成亚硝胺类杂质的相关试剂和溶剂在工 艺中使用的必要性，尽量避免选择可能生成亚硝胺类杂质的 生产工艺 【6】 控制为辅的策略是指当评估药品具有亚硝胺类杂质残 留风险且相关工艺无法避免时，应尽可能将该步骤调整至工 艺的早期，利用后续多步骤的操作降低亚硝胺类杂质残留风 险同时须根据工艺路线分析可能生成的亚硝胺结构，并优 化工艺，制定详细的过程控制策略，保证生产过程中此类杂 质的有效去除 由降解产生亚硝胺类杂质的情况，应分析降解产生的条 件，通过优化生产工艺、处方、贮存条件等，降低降解杂质 的产生风险例如有研究显示 【 7】 ：某些雷尼替丁制剂中的 NDMA含量在室温下会随着时间的推移而增加，温度升高 也会导致NDMA的含量增加在此种情况下，应进一步研 5 / 14 6 究并确认NDMA杂质的含量在药品有效期内仍低于安全限 度 对于明确有亚硝胺类杂质残留风险的品种应建立合适 的分析方法，确保成品中亚硝胺类杂质低于限度要求 （二）限度控制 药物中亚硝胺类杂质的控制策略建议参考ICH M7（R1） 指南的相关规定，应保证最终拟定的控制策略和杂质限度具 有充分合理的科学依据。

亚硝胺类杂质的致癌风险较高，不 适合按照 ICH M7 （R1）提出的 1.5 g/ 天的毒理学关注阈值 （TTC）控制限度 药品上市许可持有人/ 药品生产企业应根据研发品种的 物料属性、 工艺路线、 生产过程、 降解情况、 分析测试结果、 监管机构的要求确定应该控制的亚硝胺类杂质种类药物中 亚硝胺类杂质的控制应在符合ICH M7 （R1）要求基础上制 订控制策略，以使该类杂质在原料药和制剂中的水平低于可 接受限度 1.能在权威机构数据库中查找到TD50值 （50% 肿瘤发生 6 / 14 7 率）的亚硝胺类杂质 根据 ICH M7 （R1） ，应使用来自最敏感性别和物种的 最敏感目标器官的TD50值来计算可接受的摄入量亚硝胺 类杂质致癌风险高，根据ICH M7 （R1） ，应使用来自研究 设计完善的致癌性试验中的最低TD50值，或与人类风险评 估最相关的种属、性别和肿瘤发生器官部位的最低TD50值 来计算可接受摄入量，设定对应肿瘤发生风险为十万分之 一，人体体重统一按50kg 计算，则该亚硝胺类杂质的每日 可接受摄入量 （Acceptable Intake，AI）为：TD50（mg/kg/ 天）50kg/50000。

结合各药品法定说明书中规定的每日最大用药量，可计 算出该药品中亚硝胺类杂质的控制限度计算公式为： 限度=AI/ 每日用药量 具体可参考本文所附示例1 2.未在权威机构数据库中查见TD50值的亚硝胺类杂质 未能在权威机构数据库中查询到TD50值时，可选用以 下几种方法分别获得该亚硝胺类杂质的控制限度，并建议取 7 / 14 8 其中最小值： A.可以参考国际权威机构，如WHO 、国际化学品安全 性方案（ International Programme on Chemical Safety， IPCS）等公布的数据或建立的风险评估方法 B.与已有 TD50值的亚硝胺类杂质结构相似，可以导用其 TD50值计算杂质限度如示例2 （三）检测方法的建立 药物中亚硝胺类杂质的分析测试方法，可以参考权威机 构发布的方法，亦可自行开发方法，均需注意分析方法灵敏 度应与所论证的杂质限度相匹配，并采用杂质对照品进行完 整的方法学验证，保证亚硝胺类杂质能够准确有效的检出 若采用自行开发方法，需证明该方法等效于或者更优于同品 种官方公布的方法 （四）全生命周期的风险控制 对于申报上市的产品，申请人在研发中，应进行亚硝胺 类杂质的风险评估，对明确有亚硝胺类杂质潜在风险的品种 应进行充分的研究，在申报资料的相应章节提交亚硝胺类杂 8 / 14 9 质的研究资料及检测结果，同时应注意用于研究的样品的批 次、批量必须具有代表性以及科学依据。

对于已上市药品， 药品上市许可持有人/药品生产企业也 应主动对于亚硝胺类杂质存在的风险进行评估，若存在潜在 的亚硝胺类杂质产生风险，可参照本指导原则以及其他相关 指导原则的要求进行研究，根据研究结果采取相应的措施， 以防止或最小化患者亚硝胺类杂质的暴露 四、其他 NDMA是一种常见亚硝胺类物质，在水中和食物中， 包括熏肉和烤肉、奶制品和蔬菜中均有发现，所有人均会暴 露于一定水平的NDMA 目前， NDMA暂时可接受摄入量 为 96ng/ 天长期暴露于高出可接受水平的致突变性致癌物 如 NDMA可能会增加患癌风险， 但持续 70 年每天服用含有 等于或低于可接受水平NDMA的药品的人并不会增加患癌 风险 【8】 目前各国药品监管机构正在对药品中的亚硝胺类杂质 积极开展相应的探索研究，本指导原则将基于各方研究结果 9 / 14 10 及风险效益评估原则不断完善 五、附件 示例 1：有权威机构推荐的TD50值的亚硝胺类杂质的 限度 【9】 一般来说，对于具有阳性致癌数据的诱变杂质，建议 根据国际公认数据库中致癌性物质的TD50值来计算每日可 接受的摄入量（AI） NDMA在小鼠与大鼠的TD50值分别 为 0.189mg/kg/天和 0.0959mg/kg/天。

按照更为保守的大 鼠 TD50值 0.0959mg/kg/天和人体重50kg来计算人对 NDMA的 每 日 最 大 摄 入 量 为 ： 0.0959mg/kg/天 50kg/50000=0.0000959mg/天96ng/ 天，此时对应肿瘤 发生风险为十万分之一 若按照缬沙坦每日最大用药320mg计算，则其 NDMA 限度设定为： 96ng/320mg=0.00003%=0.30ppm 示例 2： 未在权威机构数据库中查见TD50值的亚硝胺类 杂质的限度 【9b 】 10 / 14 11 国际公认数据库中暂无N-亚硝基二异丙胺（DIPNA ） 和N-亚硝基乙基异丙基胺 （EIPNA ） 的 TD50数据根据 ICH M7 （R1），应采用具体问题具体分析原则来确定可接受摄 入量，如采用密切相关结构的致癌性数据为确定密切相关 结构，进行了专家构-效关系（ SAR）分析该分析提示，根 据密切的 SAR 和烷基重氮离子形成， NDMA和 NDEA 的数 据可用于外推DIPNA 和 EIPNA 的 AI 值Sulc 等人（2010 年）研究结果显示，烷基N- 亚硝胺可通过 -羟基化进行生 物转化并释放羰基化合物，如对相应的烷基重氮离子甲醛 化，导致 DNA 共价修饰。

根据缬沙坦每日用药量和用药周期，参考示例 1 的计算 方法，可以得出DIPNA 、EIPNA的人每日最大摄入量为 26.5ng/ 天，此时对应肿瘤发生风险为十万分之一 11 / 14 12 六、参考文献 1ICH M7(R1) Assessment and control of DNA reactive (mutagenic) impurities in pharmaceuticals of limit potential carcinogenic risk EB/OL (2017-03-31) 2. 世 界 卫 生 组 织 国 际 癌 症 研 究 机 构 致 癌 物 清 单 ， 3 (a) Assessment report, 14 February 2019, EMA/217823/2019. (b)A Screening Procedure for the Formation of Nitroso Derivatives and Mutagens by Drug-Nitrite Interaction, 。