SOPQC-CP014-00 地塞米松检验操作规程.doc

文件名称：地塞米松检验操作规程 文件编号：SOPQC-CP014-00 制订部门：QC 起 草 人： 日期： 替代文件：N/A审 核 人： 日期： 颁发部门：QAQA 审 核： 日期： 生效日期：批 准 人： 日期： 页数：第 1 页 共 20 页分发部门 ：QA、QC目的：建立地塞米松检验操作规程，确保检验操作规范、结果准确同时详细的规范了地塞米松各项目的检验、计算方法和操作步骤范围：本规程适用于地塞米松的检验与质量控制职责：QC 负责起草并审核；质量部主管批准；分析检验人员必须认真阅读和理解本操作规程，并严格按规程中所规定的要求进行检验，确保检验结果准确无误1 质量标准:项目名称 质量标准 检验方法性 状 白色或类白色的结晶性粉末；无臭 目检溶 解 度在甲醇、乙醇、丙酮或二氧六环中略溶，在三氯甲烷中微溶，在乙醚中极微溶解，在水中几乎不溶溶解试验法比 旋 度 +72°～+80° （二氧六环，25℃） 旋光度测定法吸收系数 380～410 （UV 240nm） 紫外分光光度法应呈正反应 显色反应法样品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致 HPLC样品的红外光吸收图谱与对照的图谱应一致 IR 测定法鉴 别样品应显有机氟化物的鉴别反应 有机氟化物鉴别法倍他米松 ≤0.5%其他单个杂质 ≤1.0%有关物质总 杂 质 ≤2.0%HPLC（外标法）干燥失重 ≤0.5% 105℃干燥 3 小时炽灼残渣 ≤0.2% 炽灼残渣检查法含 量 97.0%～ 102.0%（以干燥品计） HPLC（外标法）2 操作程序2.1 性状 取本品于有足够亮度的自然光或日光灯下直接目视观察。

2.2 溶解度 称取研成细末的样品 1.00g 数份，分别置于适量的 25℃±2℃的甲醇、乙醇、丙酮、二氧六环、三氯甲烷、乙醚及水中，每隔 5 分钟强烈振摇 30 秒钟；观 文件名称：地塞米松检验操作规程 文件编号：SOPQC-CP014-00 制订部门：QC 起 草 人： 日期： 替代文件：N/A审 核 人： 日期： 颁发部门：QAQA 审 核： 日期： 生效日期：批 准 人： 日期： 页数：第 2 页 共 20 页分发部门 ：QA、QC察 30 分钟内的溶解情况，如无目视可见的溶质颗粒时，即视为完全溶解略溶：样品能在 30～不到 100ml 溶剂中溶解；微溶：样品能在 100～不到 1000ml 溶剂中溶解；极微溶解：样品能在 1000～不到 10000ml 溶剂中溶解；几乎不溶：样品在 10000ml 溶剂中不能完全溶解2.3 比旋度2.3.1 试剂和仪器：1、4-二氧六环（AR ）、旋光仪、分析天平（万分之一）、旋光测定管、容量瓶、超声清洗器等2.3.2 样品溶液制备：精密称取样品约 500mg，置 50mL 容量瓶中。

加入已恒温（25℃）的 1、4-二氧六环约 30ml，放置超声设备上使完全溶解，再加已恒温的1、4-二氧六环稀释至刻度，摇匀2.3.3 测定：调节旋光仪测试室温度至 25±0.5℃，用已恒温（25℃）的 1、4-二氧六环对旋光仪作空白调零；每批样品溶液测定三次，记录样品的旋光度（ ）a2.3.4 计算： )h-1(0lWVatD式中： 为测得的旋光度，°；V 为最终稀释体积，用 ml；W 为样品的重量，用 g 表示；l 为测定管长度，dm；h 为样品的干燥失重，%2.4 吸收系数2.4.1 试剂和仪器：乙醇（ AR）、紫外分光光度计、分析天平（万分之一）、石英比色管、容量瓶、超声清洗器等2.4.2 样品溶液配制：精密称取样品约 10mg，置 100ml 容量瓶中，加乙醇 50ml， 文件名称：地塞米松检验操作规程 文件编号：SOPQC-CP014-00 制订部门：QC 起 草 人： 日期： 替代文件：N/A审 核 人： 日期： 颁发部门：QAQA 审 核： 日期： 生效日期：批 准 人： 日期： 页数：第 3 页 共 20 页分发部门 ：QA、QC放置于超声设备上 2 分钟至完全溶解，再以乙醇稀释至刻度，摇匀。

精确移取上述溶液 5.0ml 置 50ml 容量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，备用2.4.3 测定：将样品溶液用 1cm 石英吸收池在 240nm 波长处进行测定，每批样品溶液测定三次记录样品溶液吸光度, 取平均吸光度计算吸收系数测定前先用乙醇作空白校验2.4.4 计算： lhWAE)1(0%1cm式中：E 为吸收系数；A 为吸光度；l 为液层厚度，cm；W 为称取样品的量，g；h 为样品的干燥失重，%2.5 鉴别2.5.1 显色反应取约 2mg 样品加硫酸 2ml 振摇使溶解，5 分钟内显淡红棕色，加水 10ml 混匀，颜色消失2.5.2 HPLC 鉴别2.5.2.1 试剂和仪器：见含量测定项下2.5.2.2 在含量测定项下记录的色谱图中，样品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致2.5.3 红外鉴别2.5.3.1 试剂和仪器：地塞米松对照品、红外分光光度计（4000 -1－400cm -1）、分析天平（万分之一）等2.5.3.2 测定：取样品约 1～2mg，置玛瑙研钵中，加入预先干燥的溴化钾粉末约 200～300mg ， 文件名称：地塞米松检验操作规程 文件编号：SOPQC-CP014-00 制订部门：QC 起 草 人： 日期： 替代文件：N/A审 核 人： 日期： 颁发部门：QAQA 审 核： 日期： 生效日期：批 准 人： 日期： 页数：第 4 页 共 20 页分发部门 ：QA、QC作为分散剂，充分研磨均匀，置于直径为 13mm 的压电模中，使铺布均匀，抽真空约 2min，加压约 8～10T/cm 2，保持压力 2min，撤去压力并放气后取出制成样品片，目视检测，片子应呈透明状，其中样品分布均匀，并无明显的颗粒状样品。

将供试片置红外分光光度计的样品光路中，另一参比光路中置一按同法制成的溴化钾空白片作为补偿，在 4000-400cm-1 范围内扫描检测，录制光谱图样品的红外光吸收图谱吸收应与对照的图谱一致2.5.4 有机氟化物鉴别2.5.4.1 试剂和仪器：500ml 燃烧瓶、无灰滤纸、刻度吸管等 2.5.4.2 溶液制备2.5.4.2.1 样品溶液制备：取样品约 7mg，置于无灰滤纸中心，折叠后固定于燃烧瓶铂丝下端螺旋处，使尾部露出；在燃烧瓶内加入水 20ml 与 0.01mol/L 氢氧化钠溶液 6.5ml 为吸收液，并将瓶口用水湿润，小心急速通入氧气约 1 分钟，立即用表面皿覆盖瓶口，移至他处；点燃包有样品的滤纸尾部，迅速放入燃烧瓶内，按紧瓶盖，用少量水封闭瓶口，俟燃烧完毕（应无黑色碎片），充分振摇，使生成的烟雾完全吸入吸收液中，放置约 15 分钟2.5.4.2.2 空白溶液制备：取空的无灰滤纸，按上述同样的方法制备吸收液即可2.5.4.3 测定取吸上述样品和空白的吸收液各 2ml 分别置 10ml 刻度试管中，各加茜素氟蓝试液 0.5ml，再加 12%醋酸钠的稀醋酸溶液 0.2ml，用水稀释至 4ml，加硝酸亚铈试液0.5ml，样品溶液应显蓝紫色，空白溶液不得显色。

2.6 有关物质2.6.1 仪器：高效液相色谱仪、分析天平（十万分之一）、电脑、微量注射器、 50 ml 棕色容量瓶、50 ml 烧杯等2.6.2 试剂：地塞米松对照品、倍他米松对照品、甲醇、乙腈、纯化水2.6.3 色谱参数：色谱柱： C18，250mm×4.6mm，5um 文件名称：地塞米松检验操作规程 文件编号：SOPQC-CP014-00 制订部门：QC 起 草 人： 日期： 替代文件：N/A审 核 人： 日期： 颁发部门：QAQA 审 核： 日期： 生效日期：批 准 人： 日期： 页数：第 5 页 共 20 页分发部门 ：QA、QC检测波长：240 nm 柱温：30℃ 流速：1.0 ml/min 流动相：乙腈：水 28：72 (V/V) 稀释剂：甲醇（AR） 进样量：20μ l 2.6.4 积分参数：斜率灵敏度 =1.000 最小峰宽 =0.100 最小峰高=0.000 肩峰 = 关闭2.6.5 有关物质溶液的制备2.6.5.1 样品溶液制备：精密称取地塞米松样品约 25mg 置 50mL 容量瓶中，加入约20ml 甲醇，超声 1 分钟使溶解，再用甲醇稀释至刻度（C=0. 5mg/ml），摇匀。

2.6.5.2 对照溶液制备：精密称取倍他米松对照品约 25mg 置 50mL 容量瓶中，加入约 20ml 甲醇，超声处理 1 分钟使溶解，再用甲醇稀释至刻度，摇匀精密量取上述溶液 1.0ml 和样品溶液 1.0ml 置 100ml 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度( 倍他米松C=0. 005mg/ml；地塞米松 C=0. 005mg/ml），摇匀2.6.6 测定：俟仪器稳定后，按上述色谱条件，取对照溶液 20ul 注入液相色谱仪，调节检测器灵敏度，使地塞米松色谱峰的峰高约为满量程的 20%将对照溶液进样2 次；随后，在同样色谱条件下，将样品溶液进样 2 次，运行时间为主成分保留时间的 2 倍2.6.7 验收标准：样品溶液色谱图中如出现与对照溶液中倍他米松相应的色谱峰和其他杂质的色谱峰，按平均峰面积根据下列外标法计算各杂质倍他米松含量不得过 0.5%；其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液中地塞米松峰面积（1.0% ）；各杂质峰面积的和不得大于对照溶液中地塞米松峰面积的 2 倍（2.0%）； 文件名称：地塞米松检验操作规程 文件编号：SOPQC-CP014-00 制订部门：QC 起 草 人： 日期： 替代文件：N/A审 核 人： 日期： 颁发部门：QAQA 审 核： 日期： 生效日期：批 准 人： 日期： 页数：第 6 页 共 20 页分发部门 ：QA、QC样品溶液色谱图中任何小于对照溶液中地塞米松峰面积 0.01 倍的峰可以忽略不计。

2.6.8 计算：2.6.8.1 XSBCAP倍 他 米 松 含 量式中：A BX为样品溶液中倍他米松平均峰面积；ABS为对照溶液中倍他米松的平均峰面积；CX为样品溶液的浓度， mg/ml；CBS为对照品溶液中倍他米松的浓度， mg/ml；PB为倍他米松对照品纯度，%2.6.8.2 XSCA10其 他 杂 质 含 量式中：A X为样品溶液中各其他杂质平均峰面积；As 为对照溶液中地塞米松的平均峰面积；Cx 为样品溶液的浓度，mg/ml；Cs 为地塞米松对照溶液的浓度， mg/ml；2.6.8.3 总（ 杂 质 总 ））总 杂 质 （ A10%式中：A （杂质总）： 为样品溶液中各其他杂质的总峰面积；A 总 为样品溶液中总的峰面积2.7 干燥失重2.7.1 仪器：扁形称量瓶、分析天平（万分之一）、电热恒温干燥箱、干燥器等 2.7.2 测定：将扁形称量瓶至 105℃电热恒温干燥箱中干燥至恒重，精密称定后，取样品约 1.0g，混合均匀，平铺在上述已干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm，精密称定然后置于同样条件下的干燥箱中进行干燥 3 小时，取出置干燥器中，放冷至室温，再称定称重，并计算减失重量。

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