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疟原虫检技术ppt课件.ppt

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    • 疟原虫镜检技术疟原虫镜检技术: 疟原虫的基本形态特征疟原虫的基本形态特征血片制作与染色血片制作与染色疟原虫计数疟原虫计数显微镜的使用与维护显微镜的使用与维护:     疟疾是由蚊子传播的寄生虫病,它的病原疟疾是由蚊子传播的寄生虫病,它的病原体是疟原虫体是疟原虫   寄生于人体的疟原虫有寄生于人体的疟原虫有4 种种: 疟原虫基本结构疟原虫基本结构n疟原虫基本构造为核、细胞质〔胞浆〕和疟疟原虫基本构造为核、细胞质〔胞浆〕和疟色素n原虫经姬氏原虫经姬氏GiemsaGiemsa或瑞氏或瑞氏WrightWright染色:染色:n 核呈红色核呈红色, ,胞质呈兰色,疟色素为本色胞质呈兰色,疟色素为本色胞浆胞浆疟色素疟色素核核: 1.1.核核 呈鲜红色,呈圆形或椭圆呈鲜红色,呈圆形或椭圆形核的结构致密,只有在个形核的结构致密,只有在个别发育阶段较为疏松,例如间别发育阶段较为疏松,例如间日疟原虫雄配子体的核日疟原虫雄配子体的核疟原虫基本结构疟原虫基本结构: 2.2.细胞浆细胞浆 蓝色或深蓝色,随着虫体发育长大,蓝色或深蓝色,随着虫体发育长大,细胞浆逐渐增多。

      细胞浆逐渐增多疟原虫基本结构疟原虫基本结构胞浆胞浆: 疟原虫基本结构疟原虫基本结构n不着色,颜色和颗粒的形状,因疟原虫种类而不着色,颜色和颗粒的形状,因疟原虫种类而异,疟色素在虫体内散在分布或聚集成团块异,疟色素在虫体内散在分布或聚集成团块n间日疟原虫--呈短棒状,黄褐色;间日疟原虫--呈短棒状,黄褐色;n恶性疟原虫--呈细砂状,黑褐色;恶性疟原虫--呈细砂状,黑褐色;n三日疟原虫--呈砂粒状,深褐色;三日疟原虫--呈砂粒状,深褐色;n卵形疟原虫--与间日疟原虫相似卵形疟原虫--与间日疟原虫相似3.3.疟色素疟色素: 滋养体期:滋养体期:早期、晚期滋养体早期、晚期滋养体裂殖体期:裂殖体期:未成熟、成熟裂殖体未成熟、成熟裂殖体配子体期:配子体期:雌、雄配子体雌、雄配子体疟原虫在疟原虫在RBCRBC内各期形态各不相同内各期形态各不相同疟原虫在红细胞内按照生长发育繁殖的阶段不同疟原虫在红细胞内按照生长发育繁殖的阶段不同疟原虫基本结构疟原虫基本结构: 红细胞通常涨大红细胞通常涨大 薛氏点明显薛氏点明显 环状体较粗大环状体较粗大滋养体胞浆有阿米巴样伪滋养体胞浆有阿米巴样伪足足血片中可见各期的原虫形血片中可见各期的原虫形态态成熟裂殖体约含成熟裂殖体约含12-24个裂个裂殖子,排列不规则殖子,排列不规则 间日疟〔间日疟〔P. vivax P. vivax )) 鉴定要点鉴定要点: n虫体约占虫体约占RBCRBC直径的直径的1/31/3,一个,一个RBCRBC含有一个原虫,含有一个原虫,偶尔偶尔2 2个个n核红色,核红色,1 1个,位于虫体个,位于虫体一侧,颇似戒指的红宝一侧,颇似戒指的红宝石。

      石n胞质较少,淡蓝色,呈胞质较少,淡蓝色,呈环状,中间为大空泡环状,中间为大空泡1.1.早期滋养体早期滋养体----环状体环状体间日疟原虫间日疟原虫薄血膜: 2 2 间日疟原虫间日疟原虫----晚期滋养体晚期滋养体n虫体由小渐大,活动显著,虫体由小渐大,活动显著,充满充满RBCRBCn胞质变形,有伪足伸出,形胞质变形,有伪足伸出,形态不规则有数个空泡态不规则有数个空泡 n核红色,增大核红色,增大n疟色素增多,呈黄褐色疟色素增多,呈黄褐色n红细胞胀大,颜色变淡,出红细胞胀大,颜色变淡,出现淡红色的薛氏小点现淡红色的薛氏小点 薄血膜: 3 3 间日疟原虫间日疟原虫----未成熟裂殖体未成熟裂殖体 n虫体变圆,空泡消失虫体变圆,空泡消失n核开始分裂核开始分裂n胞浆未分裂胞浆未分裂n疟色素黄棕色,开始集疟色素黄棕色,开始集中中薄血膜: 4.4.间日疟原虫间日疟原虫- -成熟裂殖体成熟裂殖体大小:体积大,不规则的大小:体积大,不规则的圆形圆形裂殖子:数目为裂殖子:数目为12-2412-24不不等等, ,平均平均 16 16个左右,排列个左右,排列不规则不规则核核 分裂分裂胞浆:分裂胞浆:分裂疟色素:位于中央或一边疟色素:位于中央或一边薄血膜: 5.1 5.1 间日疟原虫间日疟原虫----雌配子体雌配子体n虫体较大,占满胀大的红细胞虫体较大,占满胀大的红细胞n胞质致密,色深蓝胞质致密,色深蓝n核小致密,深红色,多位于虫核小致密,深红色,多位于虫体一侧体一侧n疟色素分散疟色素分散 5.2 5.2 间日疟原虫间日疟原虫----雄配子体雄配子体n虫体较小,胞质蓝色而略虫体较小,胞质蓝色而略带红带红n核大疏松,淡红色,多位核大疏松,淡红色,多位于虫体的中央。

      于虫体的中央n疟色素均匀散在疟色素均匀散在薄血膜: 1.1.红细胞不涨大红细胞不涨大2.2.1 1个个RBCRBC内内2 2个以上原虫个以上原虫常见,环状体内可有常见,环状体内可有2 2个核个核 3.3.环状体可贴在红细胞环状体可贴在红细胞边缘边缘 4.4.血片中除血片中除R R、、G G外没有外没有其他发育期其他发育期5.5.配子体呈新月形或腊配子体呈新月形或腊肠形肠形6.6.成熟裂殖体约含成熟裂殖体约含16-3216-32个裂殖子,排列不规个裂殖子,排列不规则则7.7.可出现茂氏点可出现茂氏点恶性疟〔恶性疟〔P.falciparumP.falciparum)) 鉴定要点鉴定要点: 恶性疟原虫恶性疟原虫----环状体环状体nRBCRBC不胀大不胀大n可见数粒,大小不一,红色粗大的茂氏点可见数粒,大小不一,红色粗大的茂氏点n核核1 1个,但个,但2 2个常见个常见n红细胞常含红细胞常含2 2个以上原虫个以上原虫n虫体常位于红细胞的边缘虫体常位于红细胞的边缘 ,呈,呈““鸟飞状鸟飞状””薄血膜: 恶性疟原虫恶性疟原虫——大滋养体大滋养体 n一般不出现在外周血中一般不出现在外周血中n体小结实,圆形,不活体小结实,圆形,不活动动n疟色素集中一团,黑褐疟色素集中一团,黑褐色色n原虫此时开始集中在内原虫此时开始集中在内脏毛细血管脏毛细血管薄血膜: 恶性疟原虫恶性疟原虫——成熟裂殖体成熟裂殖体 n裂殖子裂殖子8 8~~3636个,通常个,通常1818~~2424个,排列不规则个,排列不规则n疟色素集中成一团疟色素集中成一团n虫体占红细胞体积的虫体占红细胞体积的2/32/3至至3/4 3/4 薄血膜: 恶性疟原虫恶性疟原虫n新月形,两端较尖新月形,两端较尖n核致密,深红色,常位于核致密,深红色,常位于中央中央n疟色素黑褐色,分布于核疟色素黑褐色,分布于核周围周围n胞浆呈蓝色胞浆呈蓝色雌配子体雌配子体雄配子体雄配子体n腊肠形,两端钝圆腊肠形,两端钝圆n胞质色蓝而略带红胞质色蓝而略带红n核疏松,淡红色,位于中央核疏松,淡红色,位于中央n疟色素黄棕色,小杆状,在核周围较多疟色素黄棕色,小杆状,在核周围较多 薄血膜: 1.1.红细胞不涨大或略红细胞不涨大或略小小2.2.环状体中等大小,环状体中等大小,核较大,胞浆粗厚核较大,胞浆粗厚3.3.胞浆不活跃呈带状胞浆不活跃呈带状形形 4.4.成熟裂殖体呈菊花成熟裂殖体呈菊花状状, ,内含内含6-126-12个裂殖个裂殖子子 5.5. 5. 5. 雌雄配雌雄配子体小于子体小于6.6. 正正 常常 红细胞,疟色红细胞,疟色7.7. 素呈素呈深褐色深褐色8.8. 6. 6. 常可查常可查见各阶段见各阶段 9.9. 的疟的疟原虫原虫三日疟〔三日疟〔P.malariaeP.malariae)) 诊断要点诊断要点: 与间日疟原虫的与间日疟原虫的环状体颇相似环状体颇相似三日疟原虫三日疟原虫--环状体环状体: 三日疟原虫三日疟原虫—大滋养体大滋养体虫体常呈带状虫体常呈带状胞浆蓝色,胞浆蓝色,: 三日疟原虫三日疟原虫—裂殖体裂殖体虫体小于正常红细虫体小于正常红细胞胞裂殖子裂殖子6~~12个,个,排列呈菊花状排列呈菊花状疟色素呈深褐色,疟色素呈深褐色,常聚集在中央常聚集在中央: 虫体小于正常红虫体小于正常红细胞细胞,呈圆形呈圆形核红,偏于一侧核红,偏于一侧胞浆呈蓝色胞浆呈蓝色疟色素深褐色疟色素深褐色三日疟原虫三日疟原虫--大配子体大配子体: 虫体小于正常虫体小于正常红细胞红细胞三日疟原虫三日疟原虫---小配子体小配子体: 卵形疟〔卵形疟〔P. ovaleP. ovale)) 诊断要点诊断要点1.1.红细胞略涨大或正红细胞略涨大或正常,卵圆形或边缘常,卵圆形或边缘呈锯齿状呈锯齿状2.2.环状体中等大小,环状体中等大小,核较大,胞浆粗厚核较大,胞浆粗厚3.3.薛氏点出现较早粗薛氏点出现较早粗大,量多大,量多4.4.成熟裂殖体约含成熟裂殖体约含6-6-1212个裂殖子个裂殖子5.5. 5. 5. 常可查见常可查见各阶段的各阶段的 6.6. 疟原虫疟原虫7.7. :  被寄生的红细胞被寄生的红细胞 间日疟原虫间日疟原虫 大小大小 斑点斑点胀大胀大 滋养体期开始滋养体期开始出现薛氏点出现薛氏点(Schuffner‘(Schuffner‘s dots )s dots ),出,出现稍晚,鲜红现稍晚,鲜红色,细小数多色,细小数多 恶性疟原虫正常或略缩小正常或略缩小 常见有茂氏点常见有茂氏点(Maurer‘s (Maurer‘s dots) dots) ,紫褐,紫褐色,粗大数少色,粗大数少 三日疟原虫三日疟原虫正常或缩小正常或缩小 常见有齐氏点常见有齐氏点(Ziemann‘s dots ),淡红,淡红色,微细色,微细卵形疟原虫卵形疟原虫略大或正常略大或正常感染红细胞感染红细胞边缘呈距齿边缘呈距齿状状常见有薛氏常见有薛氏点点,出现较早,出现较早,环状体阶段环状体阶段可见,可见,红色,微粗红色,微粗疟原虫基本结构疟原虫基本结构:     寄寄生生的的红红细细胞胞:  经经染染色色后后,,因因细细胞胞内内血血红红蛋蛋白白溶溶解解,,轮轮廓廓消消失失,,但但有有时时尚尚留留下下残残骸骸的的“影影子子〞或点彩。

      〞或点彩     厚厚血血膜膜由由于于用用血血量量多多,,血血膜膜小小,,细细胞胞重重迭迭,,干干燥燥缓缓慢慢,,各各期期疟疟原原虫虫的的体体积积都都略略为为缩缩小小,,其其中中大大、、小小滋滋养养体体的的形形态态有有较较大大改改变变,,裂裂殖殖体体和和配配子体的形态则变化不大子体的形态则变化不大厚血膜中疟原虫的形态:厚血膜中疟原虫的形态:厚血膜: 间日疟原虫间日疟原虫 厚血膜厚血膜环状体环状体配子体配子体滋养体滋养体裂殖体裂殖体: 恶性疟原虫恶性疟原虫厚血膜RingsGametocytes: PM 三日疟原虫三日疟原虫厚血膜配子体配子体滋养体滋养体裂殖体裂殖体: 由由于于在在血血膜膜制制备备过过程程中中红红细细胞胞溶溶解解,,因因而而其其原原形形态态消消失失,,且且染染液液和和玻玻片片上上可可能能存存在在杂杂质质等等,,要要根根据据疟疟原原虫虫的的三三个个基基本本要要素素仔仔细细加加以以鉴别1)1)疑疑似似疟疟色色素素 厚厚血血膜膜在在制制作作和和染染色色过过程程中中,,血血膜膜上上的的染染料料残残渣渣及及空空气气中中或或耳耳垂垂上上的的尘尘埃埃,,有时可误认为疟色素。

      有时可误认为疟色素疟原虫与其他异物的鉴别疟原虫与其他异物的鉴别: n((2 2〕疑似疟原虫核〕疑似疟原虫核n细菌尤其是球菌或白细细菌尤其是球菌或白细胞碎裂后散出的颗粒,胞碎裂后散出的颗粒,常染成红色小点,常与常染成红色小点,常与疟原虫的核相似疟原虫的核相似n((3 3〕疑似疟原虫胞浆〕疑似疟原虫胞浆 n网织红细胞的残骸和白细胞的残骸,常被染网织红细胞的残骸和白细胞的残骸,常被染成蓝色,颇似疟原虫的胞浆,有时因与上述红成蓝色,颇似疟原虫的胞浆,有时因与上述红点巧合一起,而容易误认为疟原虫的大滋体,点巧合一起,而容易误认为疟原虫的大滋体,可依据疟色素的特点加以区别可依据疟色素的特点加以区别疟原虫与其他异物的鉴别疟原虫与其他异物的鉴别: 薄血膜中常见的血液成分薄血膜中常见的血液成分血小板中性粒细胞中性粒细胞单核细胞单核细胞淋巴细胞淋巴细胞嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞((4〕血液成份与分析〕血液成份与分析: ((5 5〕杂质〕杂质------类似疟原虫的物质类似疟原虫的物质疟原虫与其他异物的鉴别疟原虫与其他异物的鉴别: ((6 6)) 形态失常形态失常疟原虫成份丢失疟原虫成份丢失成成份份增增加加。

      如如在在多多虫虫感感染染、、多多核核以以及及多多虫虫重重叠叠时时疟疟原原虫虫形形态态构构造造会会有异于正常有异于正常形态改变恶性疟粗大的环状体形态改变恶性疟粗大的环状体 l药物影响药物影响l 服氯喹后服氯喹后, ,大滋养体胞浆停滞发育,失去大滋养体胞浆停滞发育,失去阿米巴样形态,并发生碎解和色泽加深阿米巴样形态,并发生碎解和色泽加深. .l 服伯喹后服伯喹后, ,配子体的核和胞浆破碎,疟色配子体的核和胞浆破碎,疟色素粗大并相对集中等素粗大并相对集中等 : 血片的制作与染色血片的制作与染色 : n载玻片的清洗:载玻片的清洗:n新新玻玻片片的的清清洗洗方方法法 用用加加有有洗洗洁洁精精或或洗洗衣衣粉粉的的热热水水洗洗涤涤,,浸浸于于95% 95% 的乙醇中的乙醇中1 1小时以上小时以上n已已用用过过的的玻玻片片::用用加加有有洗洗衣衣粉粉的的热热水水洗洗涤涤,,浸浸于于95% 95% 的的乙乙醇醇中中1 1小时以上小时以上 载玻片载玻片: 取血部位取血部位: 指尖指尖 耳垂耳垂血片制作血片制作: 标准的推片姿势标准的推片姿势: 血片制作 厚血膜的涂制: 取血液4-5μl 血滴置于载片的中央偏右1/3, 由里向外划圈涂成直径为0.8-1厘米 厚薄均匀、圆形厚血膜.血片制作血片制作: 薄血膜的涂制:薄血膜的涂制:取血液取血液1-1.5μl1-1.5μl血滴置于载玻片的中央,血滴置于载玻片的中央,将推片的一端置于血滴之前,当血将推片的一端置于血滴之前,当血液在载玻片与推片之间向两侧扩展液在载玻片与推片之间向两侧扩展至约至约2cm2cm宽时,两玻片保持宽时,两玻片保持20-30°20-30°角,角,推成舌状薄血膜,长约推成舌状薄血膜,长约2-2.5CM2-2.5CM。

      血片制作血片制作: 每张载玻片上分别做每张载玻片上分别做1 1个薄血膜,个薄血膜,1 1个厚血膜标准血膜的位置如个厚血膜标准血膜的位置如下图所示下图所示血片制作血片制作: 厚、薄血膜优缺点厚、薄血膜优缺点 厚血膜厚血膜 薄血膜薄血膜 优点优点血量多,面积小,血量多,面积小,原虫检原虫检出率高出率高红细胞完整,原虫形红细胞完整,原虫形态改变不大,态改变不大,原虫易原虫易于辨认于辨认 缺点缺点原虫在干燥过程中皱缩,原虫在干燥过程中皱缩,红细胞消失,原虫变形较红细胞消失,原虫变形较大,大,原虫鉴定困难原虫鉴定困难血量比厚血膜少许多,血量比厚血膜少许多,面积比厚血膜的大面积比厚血膜的大检查费时,检查费时,原虫检出原虫检出率较低率较低 用途用途用于疟疾病人检查用于疟疾病人检查原虫虫种、虫期鉴定原虫虫种、虫期鉴定及初学者教学标本及初学者教学标本: 血片染色血片染色两种染色方法两种染色方法: :吉氏染色法吉氏染色法瑞氏染色法瑞氏染色法常用吉氏染色法常用吉氏染色法: 血片的染色血片的染色n待血片完全干燥后才可染色待血片完全干燥后才可染色n1 1.血膜的固定.血膜的固定----甲醇甲醇: 吉氏染液:染色方法吉氏染液:染色方法薄血膜经甲醇固定干燥后,薄血膜经甲醇固定干燥后,将血片平放,将血片平放,用用PH7.0-7.2PH7.0-7.2的磷酸缓冲液的磷酸缓冲液或蒸馏水将吉氏原液稀释,或蒸馏水将吉氏原液稀释,原液与缓冲液为原液与缓冲液为1:201:20。

      混混匀匀染色染色20-3020-30分钟,晾干镜检分钟,晾干镜检 厚血膜溶血染色厚血膜溶血染色 放置多时未染色的血片〔放置多时未染色的血片〔2 2天以上,薄天以上,薄片已用甲醇固定),在染色之前,须在片已用甲醇固定),在染色之前,须在厚血膜上用清水进行溶血,待血膜全部厚血膜上用清水进行溶血,待血膜全部溶解后倒掉,用吉氏染液染色溶解后倒掉,用吉氏染液染色, ,清水漂清水漂洗干净洗干净, ,晾干 n 染色用水和冲洗用水染色用水和冲洗用水npH7.0pH7.0~~pH7.2pH7.2缓冲蒸馏水效果最佳缓冲蒸馏水效果最佳n先制备好两种贮备液先制备好两种贮备液n贮贮备备液液I I 1/15M1/15M磷磷酸酸氢氢二二钠钠〔〔Na2HPO4Na2HPO4〕溶液〕溶液 n Na2HPO4 Na2HPO4 9.5 g9.5 gn 蒸馏水蒸馏水 1000 ml 1000 mln贮贮 备备 液液 Ⅱ Ⅱ 1/15M1/15M磷磷 酸酸 二二 氢氢 钾钾 ((KH2PO4 KH2PO4 )溶液)溶液 n KH2PO4 9.07 g KH2PO4 9.07 gn 蒸馏水蒸馏水 1000 ml 1000 ml: n缓冲蒸馏水配制缓冲蒸馏水配制nPH PH M/15 M/15 Na2HPO4 Na2HPO4 M/15 M/15 KH2PO4 DW KH2PO4 DW n (ml) (ml) ( ml) (ml)( ml) (ml)n7.0 7.0 63 63 37 90037 900n7.1 7.1 68 68 32 90032 900n7.2 7.2 73 73 27 90027 900n缓冲蒸馏水宜用时新鲜配制为好。

      缓冲蒸馏水宜用时新鲜配制为好 血片制作注意事项血片制作注意事项((1 1〕在制作血片前,首先要核对患者的〕在制作血片前,首先要核对患者的 姓名、年龄和住址姓名、年龄和住址((2 2〕载玻片必须清洁无油污,理想的薄〕载玻片必须清洁无油污,理想的薄 血膜是一层血细胞均匀分布不重血膜是一层血细胞均匀分布不重 叠、无裂缝、无皱折和空泡,血膜叠、无裂缝、无皱折和空泡,血膜 末端呈舌状末端呈舌状 ((3 3〕厚血膜厚度以一个油镜视野内可见〕厚血膜厚度以一个油镜视野内可见5-5-1010个白细胞为宜个白细胞为宜4 4〕制成的血片在未干前不能倾斜放置,〕制成的血片在未干前不能倾斜放置,待其自然干燥,不要加热,加热会使原虫待其自然干燥,不要加热,加热会使原虫变形,影响镜检结果.变形,影响镜检结果.血片制作注意事项血片制作注意事项: ((1 1〕染料溶剂的质量〕染料溶剂的质量 ((2 2〕染液的新旧〕染液的新旧((3 3〕染液稀释后使用时间〕染液稀释后使用时间原液必须临用时稀释,随配随用原液必须临用时稀释,随配随用4 4〕染液的稀释浓度〕染液的稀释浓度((5 5〕染色时间〕染色时间 (6) (6) 染色稀释用水染色稀释用水:Ph7.0-7.2:Ph7.0-7.2 染色质量影响因素染色质量影响因素: n((7 7〕血膜在制备后应尽量能在当天染色,一般夏〕血膜在制备后应尽量能在当天染色,一般夏天不超过天不超过4848小时,冬天也不能超过小时,冬天也不能超过7272小时小时, ,放置时放置时间越久,厚血膜越不易脱血,染色效果也差。

      间越久,厚血膜越不易脱血,染色效果也差n新制血片染色时厚血膜无需溶血新制血片染色时厚血膜无需溶血n放置多时的血片,在染色之前先用清水滴加在厚放置多时的血片,在染色之前先用清水滴加在厚血膜上进行溶血,以防厚血膜染色后颜色发黑,血膜上进行溶血,以防厚血膜染色后颜色发黑,影响镜检影响镜检. .: 疟原虫密度计算疟原虫密度计算: 原虫密度计数用途原虫密度计数用途l 确定患者原虫感染程度确定患者原虫感染程度l 抗疟药的疗效抗疟药的疗效l 疟疾科研研究疟疾科研研究疟原虫密度计算疟原虫密度计算: 疟原虫密度计算疟原虫密度计算 计算疟原虫密度的三种方法:计算疟原虫密度的三种方法:● ● 白细胞原虫密度计数法白细胞原虫密度计数法 ( (厚血膜厚血膜 WHO)WHO)● ● 半定量计数法半定量计数法 ( (厚血膜厚血膜) )● ● 红细胞感染密度计算法红细胞感染密度计算法( (薄血膜薄血膜) ): 白细胞原虫密度计数法白细胞原虫密度计数法n镜检厚血膜,按视野顺序,记录镜检厚血膜,按视野顺序,记录200200个白细胞中的个白细胞中的疟原虫数,如果原虫密度较低,可增加白细胞,计疟原虫数,如果原虫密度较低,可增加白细胞,计数数500-1000 500-1000 个。

      个n密度单位密度单位: :原虫数原虫数/μl/μln计算公式:疟原虫数计算公式:疟原虫数 ÷ ÷ 计数的白细胞数计数的白细胞数 × × 患者患者每微升血白细胞数每微升血白细胞数 = = 疟原虫数疟原虫数/μl/μl血n如果不知患者的白细胞数,则每微升血以如果不知患者的白细胞数,则每微升血以80008000个白个白细胞计数细胞计数( (国际标准国际标准) ) 疟原虫密度计算疟原虫密度计算厚血膜的疟原虫计数厚血膜的疟原虫计数: n从血膜的左上角开始,横向从血膜的左上角开始,横向n计数计数1 1个视野后,每次间隔个视野后,每次间隔5 5个视野个视野, ,再计数厚血膜厚血膜疟原虫密度计算疟原虫密度计算: 显微镜的使用与维护显微镜的使用与维护: 熟悉显微镜的基本构造,使用方法和维修与保养熟悉显微镜的基本构造,使用方法和维修与保养显显微微镜镜的的机机械械装装置置包包括括镜镜座座、、镜镜筒筒、、物物镜镜转转换换器器、、载载物物台、推动器、粗调螺旋、微调螺旋等部件台、推动器、粗调螺旋、微调螺旋等部件 : 2.2.疟原虫的厚薄血片都必须在油镜下观察,显疟原虫的厚薄血片都必须在油镜下观察,显微镜用光要充足,包括反光镜、光圈、聚光器微镜用光要充足,包括反光镜、光圈、聚光器要达到油镜使用的最佳限度。

      要达到油镜使用的最佳限度3.3.如果不出现物象或者目标不理想要重找,在如果不出现物象或者目标不理想要重找,在加油区之外重找时应按:低倍加油区之外重找时应按:低倍→→高倍高倍→→油镜程油镜程序在加油区内重找应按照:低倍序在加油区内重找应按照:低倍→→油镜程序,油镜程序,不得经高倍镜,以免油沾污镜头不得经高倍镜,以免油沾污镜头注意保护镜头,切不可压碎标本被片,损坏镜注意保护镜头,切不可压碎标本被片,损坏镜头 : 4.4.视野模糊不清视野模糊不清 显微镜问题:显微镜问题: 镜头镜油用量、沾污灰尘或含有气泡;镜头镜油用量、沾污灰尘或含有气泡; 油镜头破损、进油或有霉斑、灰尘;油镜头破损、进油或有霉斑、灰尘; 显微镜用光调整不足显微镜用光调整不足 血片问题:血片问题: 载玻片不洁、毛玻璃样或有霉斑;载玻片不洁、毛玻璃样或有霉斑; 血片染色过度或血膜过厚血片染色过度或血膜过厚 5.5.对熟练的镜检员一般以镜检厚血膜为主对熟练的镜检员一般以镜检厚血膜为主, ,以提高阳性检出率,薄血膜可作虫种鉴以提高阳性检出率,薄血膜可作虫种鉴定及形态识别之用。

      定及形态识别之用6. 6. 油镜使用完毕,需用擦镜纸沾取少量二油镜使用完毕,需用擦镜纸沾取少量二甲苯将油擦去,并将残留的二甲苯擦甲苯将油擦去,并将残留的二甲苯擦: n7.7.使显微镜的各部件恢复回原位,下降镜筒,使使显微镜的各部件恢复回原位,下降镜筒,使物镜呈物镜呈““八〞字形置于载物台上;八〞字形置于载物台上;n8 8 显微镜应存放在干燥阴凉的地方,不要放在强显微镜应存放在干燥阴凉的地方,不要放在强烈的日光下暴晒,如长时间不用,则光学部分应烈的日光下暴晒,如长时间不用,则光学部分应卸下放在干燥器中,以免受潮生霉;卸下放在干燥器中,以免受潮生霉;: 。

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