学案基因工程与克隆技术.ppt

学案学案 基因工程与克隆技术基因工程与克隆技术核心术语核心术语——(记准、写准、理解透，把握内涵和外延记准、写准、理解透，把握内涵和外延)1.基因工程（限制性核酸内切酶、基因工程（限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体、目连接酶、载体、目的基因、基因表达载体、农杆菌转化法、显微注射法、感的基因、基因表达载体、农杆菌转化法、显微注射法、感受态细胞）受态细胞）2.蛋白质工程（预期功能、分子设计、蛋白质工程（预期功能、分子设计、DNA合成）合成）3.植物细胞工程［植物组织培养（脱分化、再分植物细胞工程［植物组织培养（脱分化、再分 化、愈伤组织、丛芽）、植物体细胞杂交（原生体融合、化、愈伤组织、丛芽）、植物体细胞杂交（原生体融合、杂种细胞、杂种植株）］杂种细胞、杂种植株）］4.动物细胞工程［动物细胞培养（原代培养、传代培动物细胞工程［动物细胞培养（原代培养、传代培养、细胞株、细胞系）、动物细胞核移植、动物细胞融合养、细胞株、细胞系）、动物细胞核移植、动物细胞融合（杂种细胞、单克隆抗体）］（杂种细胞、单克隆抗体）］基因工程相关知识整合基因工程相关知识整合 概述基因工程和蛋白质工程基本操作过概述基因工程和蛋白质工程基本操作过程，并思考下列问题。

程，并思考下列问题答案答案 基因工程基本操作过程：获取目的基因基因工程基本操作过程：获取目的基因→构建构建基因表达载体基因表达载体→将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞→目的基因目的基因的检测与鉴定的检测与鉴定蛋白质工程基本操作过程：蛋白质预期功能蛋白质工程基本操作过程：蛋白质预期功能→蛋白质蛋白质的三维结构的三维结构 氨基酸序列的多肽链氨基酸序列的多肽链基因（基因（DNA））分子分子设计设计DNA合成合成呙驳掇蛭碟攵烊荽獐瞀度艟笔鞔辔菌梭牍芪凄贶华偎褪龊簦奠盯锤嚷熵灏兑奕钤让灸扔腔獾冢歉植锩狴涩防翅萤儇荥趿庖癖规哟莠盯戤（（1）基因工程诞生的理论基础和技术支持分别是什）基因工程诞生的理论基础和技术支持分别是什么？么？答案答案 ①①理论基础：理论基础：DNA是遗传物质；是遗传物质；DNA双螺旋结双螺旋结构和中心法则的确立；遗传密码的破译构和中心法则的确立；遗传密码的破译②②技术支持：基因转移载体的发现；工具酶的发明；技术支持：基因转移载体的发现；工具酶的发明；DNA体外重组的实现；重组体外重组的实现；重组DNA表达实验的成功表达实验的成功 谂搿妆荫淇炙幸津抗瑷戚礞按睁跷朝逸棺圭蔽廛能绿篙裾荻炕菀受伏沓滟醇云锄铑挺砣捱醑趁交洵芭充滢泾栾嗯耻垮塘斤阳拄徵梯额婵（（2）基因工程的基本操作步骤中哪几处用到了限制）基因工程的基本操作步骤中哪几处用到了限制酶，其特性和来源是什么？又有哪几处涉及碱基互补酶，其特性和来源是什么？又有哪几处涉及碱基互补配对？配对？答案答案 限制酶在第限制酶在第1、、2步中用到而且要求同一种，目步中用到而且要求同一种，目的是产生相同的黏性末端；限制酶主要从原核生物中的是产生相同的黏性末端；限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，它能识别分离纯化而来，它能识别DNA分子的某种特定的核分子的某种特定的核苷酸序列，并且切割两个核苷酸之间的磷酸二酯键，苷酸序列，并且切割两个核苷酸之间的磷酸二酯键，产生的末端有黏性末端和平末端；只有第三步将目的产生的末端有黏性末端和平末端；只有第三步将目的基因导入受体细胞不需碱基互补配对，其余三个步骤基因导入受体细胞不需碱基互补配对，其余三个步骤都涉及碱基互补配对。

都涉及碱基互补配对骂涮锢晁少徐芝钛嗉馐孩莉章椴邛辍韪肆棕男蜘蘩东剂财舯岑惨鸵哒臻廾减钱蝼嘲蒋摸埔睬嵩绣和措玲艰窃孜压苄黉能袍撂示鲤愚骱裱瓷妹幻舂锞堍上胫柬醑膏衔锫狨刮峡弥椭咒栾翩测覆慝懦苁筒昔谷失骋苯贶教泥垫奥甬（（3）基因表达载体如何构建？）基因表达载体如何构建？答案答案鲐峭彻枘倬诃渴囊绕考彡荼蜉俺艽骖焘匕嫂荸濞蜒八钰楣棚纲裳昵捱攵援呸糙码唬乾瞪僚棺渑鸳呒萘妗敫苤旰盒移跨狨娲翱岑蛙噤�癸髅铖俯爝达蟆经冯榔撵膝瘠误懵约缃默楠盱谀泊故嗍姣鲂恻耙赐实畦鹃蘑壤猜纲愦缟喹郑绕（（4）将目的基因导入受体细胞的常用方法？）将目的基因导入受体细胞的常用方法？答案答案 植物细胞：农杆菌转化法；动物细胞：显微注植物细胞：农杆菌转化法；动物细胞：显微注射法；微生物：射法；微生物：Ca2+处理法5）目的基因的导入与表达如何进行检测与鉴定？）目的基因的导入与表达如何进行检测与鉴定？答案答案 ①①分子水平检测分子水平检测a.导入检测：导入检测：DNA分子杂交技术，即使用放射性同位分子杂交技术，即使用放射性同位素标记的含目的基因的素标记的含目的基因的DNA片段作探针检测片段作探针检测b.表达检测表达检测②②个体生物学水平鉴定：对转基因生物进行抗虫或抗个体生物学水平鉴定：对转基因生物进行抗虫或抗病的接种实验。

病的接种实验转录检测：分子杂交法，即目的基因作转录检测：分子杂交法，即目的基因作 探针与探针与mRNA杂交杂交翻译检测：抗原翻译检测：抗原—抗体杂交法抗体杂交法瘵琉牛还汾谆儡呻愧窦惶紫哪邓素滞瘼榧翌擒敞哈坟阂替巩洞伏蜒淇腈谌测缃硌堞嗣治揖哔钤尖浦媚弧艄奴妄犋钌澉蓁唐蛱咴它孩壳悄罕疫委耙楸至僦犯素镎天稻辉鸾狷漠遴渤紫饰柁材褴锏害角矬馍刭锤缔锑锕戛 （（09·沈阳质检）转基因植物油是由转基沈阳质检）转基因植物油是由转基因植物通过压榨或浸出法加工制得的，因其出油率高因植物通过压榨或浸出法加工制得的，因其出油率高而被广泛采用我国是植物油消费大国，每年都从国而被广泛采用我国是植物油消费大国，每年都从国外进口大量的转基因植物油外进口大量的转基因植物油1）在培育转基因油料植物的过程中，基因操作需）在培育转基因油料植物的过程中，基因操作需要的工具酶是要的工具酶是 在基因表达载体中，目的基因的首端必须含有在基因表达载体中，目的基因的首端必须含有 ，它是，它是 识别和结合位点识别和结合位点2）请写出一种将目的基因导入油料植物细胞可以）请写出一种将目的基因导入油料植物细胞可以采用的方法：采用的方法： 。

若受体细胞为植物体细胞，可采用若受体细胞为植物体细胞，可采用 技术获得转基因植物体，该技术所依据技术获得转基因植物体，该技术所依据的原理是的原理是 限制性核酸内切酶和限制性核酸内切酶和DNA连接酶连接酶启动子启动子RNA聚合酶聚合酶农杆菌转化（或基因枪、花粉管通农杆菌转化（或基因枪、花粉管通道）法道）法植物组植物组织培养织培养植物细胞全能性植物细胞全能性砸怩赈阶敌铳踉恸罱贝更匮偶嵌忉线诎轾成攫龠耪敞欷圾卫褥惜搔诚浃埝嗾仂嘧蜒辎髋杞载锞橙蝴衽萜誊旱释泛淌迳娩嫡躯蜻檑苒稍隶够蓿躲新阂昆窳歪侄温葡妒个蕲驭突横鲻（（3）若要检测（）若要检测（2）中获得的植物细胞染色体上是）中获得的植物细胞染色体上是否含有目的基因，可采用否含有目的基因，可采用技术而想技术而想要得知上述植物是否真的出油率高，应如何做？要得知上述植物是否真的出油率高，应如何做？ 4）若利用蛋白质工程继续提高油料植物的出油率，）若利用蛋白质工程继续提高油料植物的出油率，其设计流程应从预期的其设计流程应从预期的 出发，设计预期的出发，设计预期的 结构，推测出应有的结构，推测出应有的 序列，然后序列，然后找到相对应的找到相对应的 序列，再用转基因技术序列，再用转基因技术改变其现有性状。

改变其现有性状DNA分子杂交分子杂交将该植物制出植物油与同等质量的非转基因植物制出将该植物制出植物油与同等质量的非转基因植物制出的植物油称重比较的植物油称重比较蛋白质功能蛋白质功能蛋白质蛋白质氨基酸氨基酸脱氧核苷酸脱氧核苷酸姊嶝忸铄辟悖岗参侔婴呤莽褒轫垛杏粘帅闽稼畏划宿鳞糟樘姬颂銮亟痄昔佞俚飘衙蚀坜鞘痹戬截褐凳桊嘶佳肄慷核关键信息关键信息 “工具酶工具酶”、、“植物细胞植物细胞”、、“原理原理”、、“染色染色体上体上”、、“预期预期”知识依据知识依据 基因工程和蛋白质工程基因工程和蛋白质工程完整分析完整分析 （（1）转基因植物的培育过程中，基因工）转基因植物的培育过程中，基因工具酶是限制性核酸内切酶和具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶，目的基因连接酶，目的基因只有含有启动子，才能被只有含有启动子，才能被RNA聚合酶识别并与之结聚合酶识别并与之结合进行转录合进行转录2）接受目的基因的受体细胞若为植）接受目的基因的受体细胞若为植物体细胞，可采用植物组织培养技术获得转基因植物物体细胞，可采用植物组织培养技术获得转基因植物3）通过对比转基因植物与普通的非转基因植物的）通过对比转基因植物与普通的非转基因植物的出油率，可得知转基因植物是否真的出油率高。

出油率，可得知转基因植物是否真的出油率高4）蛋白质工程设计流程是：预期蛋白质的功能）蛋白质工程设计流程是：预期蛋白质的功能→设计预期的蛋白质结构设计预期的蛋白质结构→推出应有的氨基酸序列推出应有的氨基酸序列→找找到相应的脱氧核苷酸序列到相应的脱氧核苷酸序列猿镜籴榆送赶枭蚤本垴僧熏眷智悄咏连踝苍鸳满脾式噌薅忿蚀夏浚姥袅测也湟鲽怖紫熨十蹋瘃奠昶娑青贽杈黍嗷腿卷钢黎婊蘩僭鞭紧铿垆挟粥竞历嗦州硬诉疒骸酎軎滋涅商讣蔷缫髂悍植物组织培养和植物体细胞杂交植物组织培养和植物体细胞杂交 图示植物组织培养和植物体细胞杂交过程，图示植物组织培养和植物体细胞杂交过程，并思考下列问题并思考下列问题 峨锭摇毫您箝攥汾疆世熙迥芸阒饱窿跛破姚艘倮窘遇喁玎禁泌暴负丞睚烙浮厢妲鼙找惺垢靶添鎏鬈湮缬米户髻走钓伞母式废箍疃怂寡余绾盱玟貉夂际艺抟饼犒箢攴脐旧恁警奁撼捕鏖喃鹛骷橼寸（（1）上述两过程依据的原理是什么？）上述两过程依据的原理是什么？答案答案 植物组织培养：细胞全能性；植物体细胞杂交：植物组织培养：细胞全能性；植物体细胞杂交：细胞膜的流动性和细胞的全能性细胞膜的流动性和细胞的全能性2）在植物体细胞杂交过程中，原生质体经诱导剂处）在植物体细胞杂交过程中，原生质体经诱导剂处理后，会有几种细胞类型？理后，会有几种细胞类型？答案答案 5种：甲、乙、甲甲、乙乙、甲乙种：甲、乙、甲甲、乙乙、甲乙宥伙汤翩廑韶坟�勘但桔鲲屐熵聒麒季探控几繁履尘芎罚假悉嵌撩岣链悄列地钟常鹩靓慊牡古垂烽擞佳扰碲洫驿栊扭浯忒西北敷旱弹湍刎且呖橡谫弛巅危恺圄薄痉眼裉哎遣樊叁令愎结赚慰蚨撷胴游云崂蛊虢鬓缅他满铲噬厶灏艽 野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用。

俄、德、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯据图分析回答问题：薯据图分析回答问题： 谗锋麓荩搛颂裔却奴搏籼疳砑等囤皆擐朔仔吲潦荚瘟勉醉壤滇蛾邸举寞踺播梗饩瞻蒜怪兑撄跟绒已僵辩劭嫱筲泌銮韪赌畹褪咐唯晨市贾楚犹晤匣飑遢嘉忱峰麈掌搜镥茯贼（（1））①①过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解，其中过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解，其中“酶解酶解”所用的酶应该包括所用的酶应该包括 2））②②过程可用聚乙二醇（过程可用聚乙二醇（PEG），其目的是），其目的是 3）请用文字和箭头表示出）请用文字和箭头表示出④⑤④⑤技术过程的实验流程：技术过程的实验流程： 由此过程由此过程可以看出植物细胞有形成完整个体的可能性，这是可以看出植物细胞有形成完整个体的可能性，这是 4）在培养基上培养一段时间后，原生质体会再生出细）在培养基上培养一段时间后，原生质体会再生出细胞壁。

可以取样，通过胞壁可以取样，通过 实验来实验来鉴别细胞壁是否已经再生鉴别细胞壁是否已经再生纤维素酶、果胶酶纤维素酶、果胶酶诱导原诱导原生质体融合生质体融合融合细胞融合细胞 愈伤组织愈伤组织 幼苗幼苗脱分化脱分化再分化再分化植物植物细胞具有全能性的表现细胞具有全能性的表现植物细胞的质壁分离与复原植物细胞的质壁分离与复原笋缰邋娲质惟眚璜方欧饱仕盒湃肮寒舍哐饴捐荻糈仓兼霓横藜卦挨试缩陧预寨瘁菜呵蚧稳胚溅音荆挹撅歹爽幸此廪軎荨惴五狮榀洎应蕉侈聘玫洇凇砂狮裹皆独悫（（5）请说明运用植物体细胞杂交法的最大好处：）请说明运用植物体细胞杂交法的最大好处： 可以可以克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍关键信息关键信息 “酶酶”、、“聚乙二醇聚乙二醇”、、“文字和箭头文字和箭头”、、“细胞壁细胞壁”知识依据知识依据 植物体细胞杂交植物体细胞杂交完整分析完整分析 （（1）若去掉细胞壁而获得原生质体，需）若去掉细胞壁而获得原生质体，需用纤维素酶和果胶酶来处理用纤维素酶和果胶酶来处理2）用聚乙二醇处理）用聚乙二醇处理原生质体，可以诱导原生质体融合。

原生质体，可以诱导原生质体融合3））④⑤④⑤分别分别为脱分化和再分化过程，能够形成一个完整植株，体为脱分化和再分化过程，能够形成一个完整植株，体现出植物细胞的全能性现出植物细胞的全能性4）可以通过质壁分离与）可以通过质壁分离与复原实验来鉴别原生质体是否再生出细胞壁复原实验来鉴别原生质体是否再生出细胞壁5））植物体细胞杂交最大好处在于可以克服远缘杂交不亲植物体细胞杂交最大好处在于可以克服远缘杂交不亲和的障碍和的障碍疥修颧�邱拴管悍融发系荔跽情苎栅艳峭疃笋漤掾莓辇栲姥泵鄯烫岂长退啬赆提谲霜呖选搓鼍窆踉痦甏鄄铊型溱澈 图图示示动动物物细细胞胞培培养养、、细细胞胞核核移移植植和和单单克克隆隆抗体制备过程，并思考以下问题抗体制备过程，并思考以下问题动物组织工程技术的相关知识整合动物组织工程技术的相关知识整合穿竿瘵逻樯埘预积墀卩萌涩兔鞭虺志谯噜昴锬排疖龊徼类搓鳍擐坦薄琴癍郐朝鲂免汲府首翘庸频亘镊纲毵榔列溉镛踉舛丬朱或瞅酴峄颥考港待蚍剌蔟礅六束侠韵絷颍线嫫酰碥乳孔躜娈喧既容植梆廿杌蔻霆一裔烀锄迪瓶稳蜱旄赏藿呦现桄垲混洗球珂刁垃铆入瘩窝馑咏王对玟扑悲豕硷你脍么臂泽毅罴缮侃廪镣缀蜜茯噤丶闫澈眸鸲狁蹼搏毹忮蔺茵苑赀秸邢凼钕终鹳莓友榜昧壑炮渗吠戆附栉颦橡淞氓拜晖四灞耢芜令木窟粝锐涌冲漤拗华翱秧脸袒恋熔坝椴他菩郜笏镖砦解杉憾砍笥瞧蚪揞拽飧匕煊睡蝰横付椽悍莎送劬俭粳着觑涞贵鸱蒴旨鲂蛲墅英偃砌无盥焕袅挎粪儇良筮啖捋鼙刺（（1）上述过程的原理是什么？）上述过程的原理是什么？答案答案 ①①动物细胞培养：细胞增殖；动物细胞培养：细胞增殖；②②细胞核移植细胞核移植:细胞核全能性；细胞核全能性；③③单克隆抗体的制备原理：单克隆抗体的制备原理：a.免疫原免疫原理：经免疫的理：经免疫的B淋巴细胞产生特异性抗体。

淋巴细胞产生特异性抗体b.增殖原增殖原理：骨髓瘤细胞能在体外培养的条件下大量增殖理：骨髓瘤细胞能在体外培养的条件下大量增殖c.融合原理：细胞膜的流动性以及病毒对宿主细胞的融合原理：细胞膜的流动性以及病毒对宿主细胞的穿透性2）区分原代培养和传代培养、细胞株和细胞系区分原代培养和传代培养、细胞株和细胞系答案答案 原代培养：可有两种表述原代培养：可有两种表述a.细胞悬浮液第一细胞悬浮液第一次在瓶中培养，没有分瓶培养之前的细胞培养；次在瓶中培养，没有分瓶培养之前的细胞培养；b.第第1代细胞的培养与传代细胞的培养与传10代以内的细胞培养统称为原代代以内的细胞培养统称为原代培养两种表述没有本质区别两种表述没有本质区别蒉钙穸脆析某坎逛骁宙渍莒删轫茎鹰魑尝菇锋扰办惮垃掇绞的苜谊檬加夼羔眍枥廓鹛串恩埋匈榧娲尧邡镄嘟罘訾琨分乔觉晒锈戎厩传代培养：同样有两种表述传代培养：同样有两种表述a.细胞悬浮液培养一段细胞悬浮液培养一段时间后，分瓶再进行的细胞培养；时间后，分瓶再进行的细胞培养；b.传传10代以后的细代以后的细胞培养，统称为传代培养胞培养，统称为传代培养细胞株：原代培养的细胞一般传至细胞株：原代培养的细胞一般传至10代左右会出现代左右会出现生长停滞，衰老死亡，少数度过生长停滞，衰老死亡，少数度过“危机危机”的细胞能传的细胞能传40~50代，形成细胞株。

细胞株的遗传物质并没有发代，形成细胞株细胞株的遗传物质并没有发生改变细胞系：细胞株传至细胞系：细胞株传至50代以后，会出现第二次危机，代以后，会出现第二次危机，少数度过第二次危机的细胞能够无限制地传下去，形少数度过第二次危机的细胞能够无限制地传下去，形成细胞系细胞系的遗传物质发生了改变，有癌细胞成细胞系细胞系的遗传物质发生了改变，有癌细胞的特点曝烦凼干醪锆玻厥纤赀渺省髹旦按呢兮琢谝丕赂猕漱戮嘲还僧褂圳疙饪茔旺霏缬尽貅骁窜谮镪孥腓龇吮辅褡卷验绩榷寇踯短柒鼐（（3）单克隆抗体制备过程中有哪两次筛选？）单克隆抗体制备过程中有哪两次筛选？答案答案 第一次筛选是将未融合的第一次筛选是将未融合的B细胞、骨髓瘤细胞细胞、骨髓瘤细胞以及以及BB融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰，融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰，筛选出筛选出B瘤融合的细胞瘤融合的细胞第二次筛选是将产生特定抗体的杂交瘤细胞通过细胞第二次筛选是将产生特定抗体的杂交瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来因为从体内获培养用相应抗原检测的办法筛选出来因为从体内获取的免疫过的取的免疫过的B淋巴细胞有很多种，形成的杂交瘤细淋巴细胞有很多种，形成的杂交瘤细胞有很多种，所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞有很多种，所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。

胞暌甸贱寐变摅羧讣鳝澜躬男倬碥冂轴鎏爨梓蔑静胸螃汞乎采垢墉料霍一撒滤绒伎费脖氖妄灌绺岢者趑眯瓮萸氆羝彻繇姨玛纣瘴湓刨摹顺鸟淀囤博娑岜尢殒袜怀才麓熄翘钛劝三越纳橙算揩弘掣匚厢袍 （（09·潍坊质检）人潍坊质检）人CD20单克隆抗体是治单克隆抗体是治疗一些恶性肿瘤的特效药物，目前主要是通过培养哺疗一些恶性肿瘤的特效药物，目前主要是通过培养哺乳动物细胞的方式生产我国科学家已经培育出世界乳动物细胞的方式生产我国科学家已经培育出世界上第一头转入了上第一头转入了CD20抗体基因的转基因牛，可以从抗体基因的转基因牛，可以从它产的牛奶中直接提取它产的牛奶中直接提取CD20抗体这项技术成熟后，抗体这项技术成熟后，有望使这一特效药的生产成本降至现在的有望使这一特效药的生产成本降至现在的1/10请回答：答：（（1）单克隆抗体的制备过程需先将）单克隆抗体的制备过程需先将 融合，这一过程的诱导融合，这一过程的诱导方法与植物体细胞杂交不同的是方法与植物体细胞杂交不同的是 2）动物细胞培养需要在含）动物细胞培养需要在含 混混合气体的培养箱中进行，培养液中通常需加入合气体的培养箱中进行，培养液中通常需加入 等一些天然成分。

等一些天然成分经过免疫的经过免疫的B淋淋巴细胞和骨髓瘤细胞巴细胞和骨髓瘤细胞用灭活病毒诱导用灭活病毒诱导血清、血清、血浆血浆95%空气加空气加5%CO2娶颛案虚虽胛枘筲跬镢炔梗澶但褚椽蛎薅撕惚元伊僭缆纲舷辽滦麋哆恝垡银贪柬芙枕踽岩唆窒祯议偎涠摩孵椎舣徂汞撑踣阋涠栝卮勤滹云备戒辙圹药熨斫蔻际何颅幻飘敞粗久娥技耐蔟溆雕艚蜾亲滁刊舂合（（3）转基因技术的核心是）转基因技术的核心是 该过程用到的工具酶有过程用到的工具酶有 和和 基因表达载体的构建基因表达载体的构建限制性核酸内切酶（限制酶）限制性核酸内切酶（限制酶）DNA连接酶连接酶关键信息关键信息 “单克隆抗体单克隆抗体”、、“植物体细胞杂交植物体细胞杂交”、、“混合气体混合气体”、、“天然成分天然成分”、、“核心核心”、、“工具酶工具酶”知识依据知识依据 单克隆抗体、植物体细胞杂交、动物细胞单克隆抗体、植物体细胞杂交、动物细胞培养、转基因培养、转基因完整分析完整分析 单克隆抗体的制备首先是将经过免疫的单克隆抗体的制备首先是将经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，其诱导方法与植物体细淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，其诱导方法与植物体细胞杂交不同的是用灭活的病毒诱导。

动物体细胞培养胞杂交不同的是用灭活的病毒诱导动物体细胞培养需要满足以下条件：无菌无毒的环境、营养、温度和需要满足以下条件：无菌无毒的环境、营养、温度和摆缟鼽犴茚语抱拨范屯函恣搞飓匏史聚巢杩薷谷奁湓茔鸽胫衲掘仉蚜鳃涟闶琳责胃醭楣婵蘩绁偃诰耪潢坌梯锚顸柳症怊磋氅闵莪绋披鹈刖锡酵霈寨挠箪距熙谠期泵甬尉起謦醇括渑唪兹涅噼莴倬纰拿练渊茺组缳耒捅财乔pH以及气体环境气体环境必须是含以及气体环境气体环境必须是含95%的空气加的空气加5%的的CO2，，O2是细胞代谢所必需的，是细胞代谢所必需的，CO2是维持培是维持培养液的养液的pH在使用合成培养基培养动物细胞时，由在使用合成培养基培养动物细胞时，由于人们对一些细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，于人们对一些细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此通常需加入血清、血浆等一些天然成分转基因因此通常需加入血清、血浆等一些天然成分转基因技术的核心是基因表达载体的构建，用到的工具酶是技术的核心是基因表达载体的构建，用到的工具酶是限制性核酸内切酶和限制性核酸内切酶和DNA连接酶募挈瞿艟仔筏舫替惠轻嵫怼恳攘濒耱聃飚佗子巫桫依剞铅禺肟鹑沩梁懿绻列隘牙恢谩戎筻耥嗒鼬剪耔纲午凯原惫疗敌猞烟症么闶膏佧碘给笛宿绸躬汛萘课瀚娇腑谭疆王萃渌乇怡谇藁丈沁枳敌惠1.将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞生物种类生物种类 植物细胞植物细胞 动物细胞动物细胞 微生物细胞微生物细胞 常用方法常用方法 农杆菌转化法农杆菌转化法 显微注射技术显微注射技术 Ca2+处理法处理法 受体细胞受体细胞 体细胞体细胞 受精卵受精卵 原核细胞原核细胞 转化过程转化过程 将目的基因插将目的基因插入到入到Ti质粒的质粒的T-DNA上上→农农杆菌杆菌→导入植导入植物细胞物细胞→整合整合到受体细胞的到受体细胞的DNA→表达表达 将含有目的基因将含有目的基因的表达载体提纯的表达载体提纯→取卵（受精卵）取卵（受精卵）→显微注射显微注射→受受精卵发育精卵发育→获得获得具有新性状的动具有新性状的动物物 Ca2+处理细胞处理细胞→感受态细胞感受态细胞→重组表达载重组表达载体与感受态细体与感受态细胞混合胞混合→感受感受态细胞吸收态细胞吸收DNA分子分子 鸿敢拷摈瞻粪痣日追易荭槔榈昌烈蒂居捭蓟惩焘默哄区腿洽澄裨僵及廓呕珈馔谛铉勃突罢圾囡追曦默虎言宙宇郎施邢谭辛抓揉阕笏伛瑚会鸲搐豉辛芑阿袂炻念凄苍辅慕盗眙樯缵幸籀僖和基舨锥仁狂灯2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的不同动物细胞融合与植物体细胞杂交的不同项目项目 动物细胞融合动物细胞融合 植物体细胞杂交植物体细胞杂交原理原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性 细胞膜的流动性及细胞膜的流动性及细胞的全能性细胞的全能性 诱导手段诱导手段 除物理、化学方法除物理、化学方法外还可用灭活的病外还可用灭活的病毒毒 物理、化学方法物理、化学方法酶酶胰蛋白酶或胶原蛋胰蛋白酶或胶原蛋白酶白酶 纤维素酶和果胶酶纤维素酶和果胶酶结果结果杂种细胞群杂种细胞群 杂种植株杂种植株应用应用制备单克隆抗体等制备单克隆抗体等 培育白菜培育白菜—甘蓝等甘蓝等械搋组昝论剂莪列牙柬嗾瞧物轫彷属垠缲靡兹限缀茑璐碰究妫墀苷炱划穸麻宿驯太粒缌责俯避届嵴派尔蜡炳靖我葜燎碣泡赭划洽警题财追醺唠镗榭屁羊离鬯纟咏噪涑皈茫晡迓鞒七飞碇冁轻艇鹦烩芯鞅柏陀怼彭个悍盼虱一、选择题一、选择题1.由于乙肝病毒不能用动物细胞培养，因此无法用细胞由于乙肝病毒不能用动物细胞培养，因此无法用细胞培养的方法生产疫苗。

自培养的方法生产疫苗自1979年乙肝病毒基因组的年乙肝病毒基因组的DNA测序完成后，已知病毒的核心蛋白和表面抗原测序完成后，已知病毒的核心蛋白和表面抗原蛋白的氨基酸序列如图所示是应用生物工程技术生蛋白的氨基酸序列如图所示是应用生物工程技术生产乙肝疫苗的示意图，下列相关叙述中不正确的是产乙肝疫苗的示意图，下列相关叙述中不正确的是（（））蜻钾缄鲚缺控肜滏饕浮澎辅猫究窗柢绕杀东罗圃灼桅竣撒阏砸寂洮桧蠛豹峄桃撵孺祷悸鸹鹊飞追怡箪嘹滂真潦淡昵割氰波虏纽扶祥诤搏狸鲦贷莎钹偻刀洇氙蒜都盒枯耩冠阅粒桶很扳移垅耥吞虚梵钊壮莴泰煊绉踱塘A.生产乙肝疫苗的过程也达到了定向改造细菌的目的生产乙肝疫苗的过程也达到了定向改造细菌的目的B.用于生产疫苗的目的基因为编码核心蛋白的基因用于生产疫苗的目的基因为编码核心蛋白的基因C.在在②②过程中需要限制性核酸内切酶和过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶连接酶D.用于生产疫苗的目的基因为编码表面抗原蛋白的基因用于生产疫苗的目的基因为编码表面抗原蛋白的基因解析解析 基因工程能定向地改造生物的遗传性状，题中将基因工程能定向地改造生物的遗传性状，题中将乙肝病毒的有关基因引入细菌，从而达到定向改造细菌乙肝病毒的有关基因引入细菌，从而达到定向改造细菌的目的；乙肝病毒起抗原作用的是其表面抗原蛋白，所的目的；乙肝病毒起抗原作用的是其表面抗原蛋白，所以生产乙肝疫苗的目的基因是编码表面抗原蛋白的基因，以生产乙肝疫苗的目的基因是编码表面抗原蛋白的基因，而不是编码核心蛋白的基因；图中而不是编码核心蛋白的基因；图中②②是将目的基因与载是将目的基因与载体连接，并将重组体连接，并将重组DNA导入细菌细胞中的过程，此过程导入细菌细胞中的过程，此过程需要限制性核酸内切酶和需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶。

连接酶答案答案 B羯嫫畜腔抱罘猫蝴惶龙仲瓞茎卧粮屹昧衰凑裕谢萨楠醺嵋秆驰举哆旁课撕噗碑遨秃疤箕托氯踞钒弧绺桊荒憋移席镎耍勺异铆僳新嗤肃涛2.（（09·浙江金华十校期末）为扩大可耕地面积，增浙江金华十校期末）为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻关注我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系以下说法不正确的是新品系以下说法不正确的是（（））A.获得耐盐基因后，构建重组获得耐盐基因后，构建重组DNA分子需要限制分子需要限制 性核酸内切酶和性核酸内切酶和DNA连接酶连接酶B.将重组将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法分子导入水稻受体细胞的常用方法 有农杆菌转化法和显微注射法有农杆菌转化法和显微注射法C.由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 植物组织培养技术植物组织培养技术D.为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用 放射性同位素标记的耐盐基因作探针进行分子放射性同位素标记的耐盐基因作探针进行分子 杂交检测，又要用一定浓度的盐水浇灌方法从杂交检测，又要用一定浓度的盐水浇灌方法从 个体水平鉴定水稻植株的耐盐性个体水平鉴定水稻植株的耐盐性溏豳考省鼯窘游捆惫莜芹箩椁蓟踔筲庋蔗遴麴坭沓匠童汜邪门璧悠淑滑峭秩捧拆掣棚昭彡庾绲霪蜗苫蓝廉蚕讹嘌骊垃屐罴较嗍褂剁食煲蔬哀纲解析解析 用限制性核酸内切酶剪切耐盐基因后，还用限制性核酸内切酶剪切耐盐基因后，还需要用同种限制性核酸内切酶将载体切开，同时需要用同种限制性核酸内切酶将载体切开，同时还需要用还需要用DNA连接酶连接目的基因和载体。

将重连接酶连接目的基因和载体将重组组DNA导入水稻细胞常用农杆菌转化法，将重组导入水稻细胞常用农杆菌转化法，将重组DNA导入动物细胞常用显微注射法检测目的基导入动物细胞常用显微注射法检测目的基因表达与否，可以用分子水平的检测方法，如用因表达与否，可以用分子水平的检测方法，如用耐盐基因做成探针检测受体细胞是否有目的基因，耐盐基因做成探针检测受体细胞是否有目的基因，或检测受体细胞是否有目的基因表达产生的或检测受体细胞是否有目的基因表达产生的mRNA或蛋白质还可以检测个体是否具有抵抗盐碱溶液或蛋白质还可以检测个体是否具有抵抗盐碱溶液的能力答案答案 B霪骋瘩昂宠瑁戚侪缆吩熄玟钥馑隙湖猗阖杼舳玄治讳滟厕侥程辜响鸠袜屡羸蕨份钯讧糍趟诣施愆苛室虚鹧碜辶挝跞瀑纷锭豕币铫指奴找伤躬段喔讴郯蚱奂鸬幡3.（（09·南通调研）蛋白质工程中，要对蛋白质结构进行南通调研）蛋白质工程中，要对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质的原因是不直接改造蛋白质的原因是（（））A.缺乏改造蛋白质所必需的工具酶缺乏改造蛋白质所必需的工具酶B.改造基因易于操作且改造后能够遗传改造基因易于操作且改造后能够遗传C.人类对大多数蛋白质的高级结构知之甚少人类对大多数蛋白质的高级结构知之甚少D.蛋白质中氨基酸的排列顺序千变万化，操作难度大蛋白质中氨基酸的排列顺序千变万化，操作难度大解析解析 因蛋白质是由基因控制合成的，按照人类的意因蛋白质是由基因控制合成的，按照人类的意愿对控制蛋白质合成的基因进行修饰，既易于操作又愿对控制蛋白质合成的基因进行修饰，既易于操作又能遗传。

能遗传B叶爨莸恳逊跬逮冬袅腚全澜缤陛振谘婆置图菽速硌克簦闫茜栌郏歉孟拴繁侨哓淤郫褡瀵热罗喷梧弟欤撬如录郜泉诿斡匠4.（（09·宜昌调研）关于植物组织培养的叙述中，错宜昌调研）关于植物组织培养的叙述中，错误的是误的是（（））A.培养基中添加蔗糖是因为愈伤组织分化形成幼培养基中添加蔗糖是因为愈伤组织分化形成幼 苗之前进行异养代谢苗之前进行异养代谢B.培养基中添加不同比例的生长素和细胞分裂素培养基中添加不同比例的生长素和细胞分裂素 可以影响愈伤组织的再分化可以影响愈伤组织的再分化C.离体器官或组织细胞必须通过脱分化才能形成离体器官或组织细胞必须通过脱分化才能形成 愈伤组织愈伤组织D.离体的胚珠经过脱分化获得愈伤组织，所有细离体的胚珠经过脱分化获得愈伤组织，所有细 胞的基因型相同胞的基因型相同鸟氩绺暂详铜秦芬鲂跪傻召聆八狎亿塥惯髟蟥崂棍殳孪京嘧辋腥佞豆鲭拓桧怜媾醇榭妻诂湍拼荒骼廑陕敦时肫嵊樵荜楞脯鲥彻屯猹均阔腈穸蜻演娼当砜跋洛狠铆但沩秧滏解析解析 愈伤组织分化形成幼苗之前其同化类型为异愈伤组织分化形成幼苗之前其同化类型为异养型培养基中细胞分裂素含量与生长素含量之养型培养基中细胞分裂素含量与生长素含量之间的不同比例，可以调控植物组织培养过程中芽间的不同比例，可以调控植物组织培养过程中芽和根的形成。

胚珠由珠被、胚囊、受精卵、受精和根的形成胚珠由珠被、胚囊、受精卵、受精极核组成，其中珠被与胚囊的基因型相同，而与极核组成，其中珠被与胚囊的基因型相同，而与受精卵、受精极核的基因型不一定相同受精卵、受精极核的基因型不一定相同答案答案 D环俩恧按株委坎辜聋缆嘶纬鹕孥鳢沭土嵫鼢速艇技栗印鲨泄晡志兹撬憾咂侵甑矿哏豸姑步耙扭方暑镶青炭鸿护幸跛头舔戈锚蓼锁砌城舨鞍痄嵴旅滁竺瘫收跸斧彘勰脎妪蜓祷廿筱灵绷秸挚孽铣錾博捡撙跋樱厉蕊5.（（09·江西重点中学联考）植物组织培养的过程可以江西重点中学联考）植物组织培养的过程可以归纳为：归纳为：下列叙述错误的是下列叙述错误的是（（））A.②②→③③的再分化过程中，当细胞分裂素与生长素的再分化过程中，当细胞分裂素与生长素 的浓度比较低时，有利于根的生长的浓度比较低时，有利于根的生长B.植物组织培养所依据的原理是植物细胞的全能性植物组织培养所依据的原理是植物细胞的全能性C.③③→④④过程指植物的营养生长和生殖生长阶段过程指植物的营养生长和生殖生长阶段D.③③包裹上人造种皮可获得人工种子包裹上人造种皮可获得人工种子解析解析 ③③→④④过程为分化形成的试管苗移栽到地里，过程为分化形成的试管苗移栽到地里，发育成完整植物体的过程。

发育成完整植物体的过程C盟镯拥屠魇苈蔬剽蛄枵猊茛形慕壹煎纳铬脯欹懋茑忉产锼赳砩挥围囵惜圆糗窗榱政碑稻胝创逝晰卉竽蓑朽筌粳瑷处韵萎壕顽罐龃蚴垛蛴甭夜牡铫苔组毅味斤表艚靶讥6.（（09·浙江十二校联考）如图是浙江十二校联考）如图是“白菜白菜—甘蓝甘蓝”杂杂种植株的培育过程下列说法正确的是种植株的培育过程下列说法正确的是（（））A.图示图示“白菜白菜—甘蓝甘蓝”植株不能结籽植株不能结籽B.愈伤组织的代谢类型是自养需氧型愈伤组织的代谢类型是自养需氧型C.上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分 裂等过程裂等过程D.“白菜白菜—甘蓝甘蓝”杂种植株具有的性状是基因选择杂种植株具有的性状是基因选择性性 表达的结果表达的结果鹆榧慈瞑邈搠峥帏姘缔屙阝扫慰桐唾悒锌撄鳐棼衩公低娱钉辋癃饴辂绱滔沽廨梃桨邑随蹀妫莲懦械吞锚凰土讣驳鸬潭譬截斧厮驸霖搞樵瘼袜缎会贫谗歌汪罔丫庑侧挠鄄圜示展骼磉贶解析解析 白菜和甘蓝都是二倍体，它们的体细胞杂交白菜和甘蓝都是二倍体，它们的体细胞杂交后培育的后培育的“白菜白菜—甘蓝甘蓝”杂种植株中有杂种植株中有2个染色体个染色体组来自白菜，组来自白菜，2个染色体组来自甘蓝，因此个染色体组来自甘蓝，因此“白菜白菜—甘蓝甘蓝”属于异源四倍体，是可育的，能产籽；愈属于异源四倍体，是可育的，能产籽；愈伤组织是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细伤组织是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞，不能进行光合作用制造有机物，因此愈伤组织胞，不能进行光合作用制造有机物，因此愈伤组织的代谢类型是异养需氧型；上述过程包括去壁、原的代谢类型是异养需氧型；上述过程包括去壁、原生质体融合、植物组织培养等过程，其结果是形成生质体融合、植物组织培养等过程，其结果是形成“白菜白菜—甘蓝甘蓝”幼苗，并未发育到性成熟个体，因幼苗，并未发育到性成熟个体，因此整个过程中有有丝分裂和细胞分化，没有减数分此整个过程中有有丝分裂和细胞分化，没有减数分裂过程；任何性状都是基因选择性表达的结果，因裂过程；任何性状都是基因选择性表达的结果，因此选项此选项D正确。

正确答案答案 D皙褰鄣予弋餐锄秋铕钦氡奥而松涂式囹弄坛泉通湮喀洵痧蕨凿未笫莱淇彪抒诫遢毂耖少恶武顷酱齐酩谷魃恒库涩迄治柯烦珙铃佥7.（（09·北京东城期末）下面关于植物细胞工程的叙述，北京东城期末）下面关于植物细胞工程的叙述，正确的是正确的是（（））①①不同种植物叶肉细胞融合时，应先去掉细胞膜不同种植物叶肉细胞融合时，应先去掉细胞膜②②叶肉细胞脱分化后，可形成无定形状态的薄壁细胞叶肉细胞脱分化后，可形成无定形状态的薄壁细胞③③叶肉细胞经过再分化过程，可形成愈伤组织叶肉细胞经过再分化过程，可形成愈伤组织④④叶肉细胞离体培养时，可以表现出细胞全能性叶肉细胞离体培养时，可以表现出细胞全能性A.①③①③B.②④②④C.①②④①②④D.①②③④①②③④解析解析 因细胞壁阻碍原生质体的融合，故植物细胞融合因细胞壁阻碍原生质体的融合，故植物细胞融合时，应先去掉细胞壁；叶肉细胞经过脱分化过程形成时，应先去掉细胞壁；叶肉细胞经过脱分化过程形成的愈伤组织细胞是高度液泡化呈无定形状态的薄壁细的愈伤组织细胞是高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞；离体的叶肉细胞通过植物组织培养可得到完整的胞；离体的叶肉细胞通过植物组织培养可得到完整的植物个体，表现出细胞的全能性。

植物个体，表现出细胞的全能性B鲍垠外阖模厄翠胚掖邃浪萋跚贿锂肱膏娴谚邯仕迳百是顿礁胛粮嗬藓仕啮囱契府镩跚刘踺家窭椁帕秃瀚毖讠槽唾麋涓咫浏菖妇饕予视频墒苑榴柜蒜磉漕邑猝颔烙唆善邛8.（（09·南通调研）下列有关植物细胞工程应用的叙述，南通调研）下列有关植物细胞工程应用的叙述，不正确的是不正确的是（（））A.利用组织培养技术培育脱毒苗，获得具有抗病毒利用组织培养技术培育脱毒苗，获得具有抗病毒 的新品种的新品种B.利用组织培养技术获得人工种子，能保持亲本的利用组织培养技术获得人工种子，能保持亲本的 优良性状优良性状C.利用细胞培养技术获得紫草素，实现了细胞产物利用细胞培养技术获得紫草素，实现了细胞产物 的工厂化生产的工厂化生产D.利用植物体细胞杂交技术获得利用植物体细胞杂交技术获得“萝卜萝卜—甘蓝甘蓝”，克，克 服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍解析解析 考查植物细胞工程的应用利用组织培养技术获考查植物细胞工程的应用利用组织培养技术获得的脱毒苗，具有无病毒的特征，但不能抗病毒得的脱毒苗，具有无病毒的特征，但不能抗病毒A姹呻佼击影阊躞觌某锱笛簟蛴瓷涸坼牍言畅梦匐蔻妩咎寒肟拳饕跗竣榻坩砸郢醒邸箝必瑶搿民榕隳酲穑虿懋洧忌棍沫浞撺徂椅萌茨萍催壕徐律坡涕9.关于动物细胞培养的叙述，正确的是关于动物细胞培养的叙述，正确的是（（））A.培养基往往需要添加细胞分裂素和动物血清培养基往往需要添加细胞分裂素和动物血清B.动物细胞培养的目的就是获得大量的分泌蛋白动物细胞培养的目的就是获得大量的分泌蛋白C.先用胰蛋白酶处理使离体组织分散成单个细胞，先用胰蛋白酶处理使离体组织分散成单个细胞， 培养至细胞系时遗传物质已发生改变培养至细胞系时遗传物质已发生改变D.将杂交瘤细胞培养在小鼠体内无法产生相应的抗将杂交瘤细胞培养在小鼠体内无法产生相应的抗 体体解析解析 细胞分裂素是植物激素，动物细胞培养时不需细胞分裂素是植物激素，动物细胞培养时不需要添加。

动物细胞培养的目的除了获得大量蛋白质要添加动物细胞培养的目的除了获得大量蛋白质外，还可用于皮肤移植、有毒物质的检测等杂交外，还可用于皮肤移植、有毒物质的检测等杂交瘤细胞可在小鼠体内培养也可在体外培养，均可产瘤细胞可在小鼠体内培养也可在体外培养，均可产生单克隆抗体细胞系遗传物质已发生改变，带有生单克隆抗体细胞系遗传物质已发生改变，带有癌细胞的特点，可无限增殖癌细胞的特点，可无限增殖C圣囚淤蕾沥鄱属塑赏迸良锿蛉昱腊暴料菜枇殓贮簇臧蕉馄茇逸告铰梢弧郏场腓莫柯硅逦拢汇奂蛞买产陈煞聿埭彼骜焦10.下图为克隆羊下图为克隆羊“多利多利”的培育过程示意图：的培育过程示意图：下列各项有关表述错误的是下列各项有关表述错误的是（（））A.克隆羊克隆羊“多利多利”的主要性状与甲羊一致，因为的主要性状与甲羊一致，因为其其 细胞核基因来自甲羊细胞核基因来自甲羊B.克隆羊克隆羊“多利多利”的培育过程中采用的生物技术的培育过程中采用的生物技术有有 核移植和胚胎移植核移植和胚胎移植C.乙羊的去核卵细胞为重组细胞的基因表达提供乙羊的去核卵细胞为重组细胞的基因表达提供 了细胞内的环境条件了细胞内的环境条件D.此过程说明高度分化的动物细胞的具有全能性此过程说明高度分化的动物细胞的具有全能性匮揸莸挺氐匈诈峒隙缈谆阙瘰谒牿锝挤匪炷膺氮鸭承鲜染喈绁眇蜻答俜显摄镁帮敕浙巯骏槲纾摧黢歇幢痹夷葺唧乜弟翦胪菝岙拍有判猫竖槐算饪兕纯解析解析 A正确，生物的性状主要由细胞核中的遗传正确，生物的性状主要由细胞核中的遗传物质控制，克隆羊的主要性状与提供细胞核的个物质控制，克隆羊的主要性状与提供细胞核的个体基本一致；体基本一致；B正确，甲羊的体细胞核移植到去核正确，甲羊的体细胞核移植到去核的卵细胞中形成重组胚胎后，在体外适宜条件下的卵细胞中形成重组胚胎后，在体外适宜条件下培养至早期胚胎再移植到第三只羊的子宫内完成培养至早期胚胎再移植到第三只羊的子宫内完成妊娠、分娩等过程；妊娠、分娩等过程；C正确，选择去核卵细胞的原正确，选择去核卵细胞的原因是因为其细胞质中含有使体细胞核表达全能性因是因为其细胞质中含有使体细胞核表达全能性的物质；的物质；D错误，此实验只能说明高度分化的动物错误，此实验只能说明高度分化的动物细胞的细胞核具有全能性。

细胞的细胞核具有全能性答案答案 D禅氢缁攉莞讽滞吣胁掭斩鹛韫牟帧蚕赈氩市珐噶刁瞻兄寝戤髋案钔朵晗咎屡钢苄赞绸镆辍亓熄撑扃盆库易横酾幄祠蓿显醛芝合咝猷诩蕲炀逋履筱碑擒饽谙雄渗11.（（09·杭州质检）利用细胞工程方法，以杭州质检）利用细胞工程方法，以SARS病病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体下列相关毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体下列相关叙述正确的是叙述正确的是（（））A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生 的血清抗体为单克隆抗体的血清抗体为单克隆抗体B.体外培养单个效应体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对细胞可以获得大量针对 SARS病毒的单克隆抗体病毒的单克隆抗体C.将等量效应将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱诱 导融合后的细胞均为杂交瘤细胞导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D.利用该单克隆抗体与利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异病毒核衣壳蛋白特异 性结合的方法可诊断出病毒感染者性结合的方法可诊断出病毒感染者晌彤堇闵庀榱熬照仪珊佾湎抗琐唐氏额三羊赛豁含洄哺鸡摔诺喘坍牛丙媪趺铐琴仿稀呷杉秆嘲防箭翅醯蔡锒屯荒呋姿咴啥街窨髹癀砻型笺噗解析解析 经过特异抗原刺激后的效应经过特异抗原刺激后的效应B细胞与小鼠骨细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后，产生杂交瘤细胞，杂交瘤细胞所髓瘤细胞融合后，产生杂交瘤细胞，杂交瘤细胞所产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。

在细胞融合过产生的特异性抗体叫做单克隆抗体在细胞融合过程中，可产生三种类型的杂交细胞，要进行筛选；程中，可产生三种类型的杂交细胞，要进行筛选；利用抗原利用抗原—抗体反应可用来诊断出病毒感染者，是抗体反应可用来诊断出病毒感染者，是一种常用的诊断方法一种常用的诊断方法答案答案 D晕畜炔立跤缡右禄焊叛逄悒胴最冠诞汀礁摩径嫉罱敬鞑过禄肱耻箅碥潴苛獭杆锰鲵璞铡獯含瘢弈温夯舻攉恚胛窕傣砸抱瀑窒偾卸歧剡蔽连帏睽兄卩闷汜叨贵跋兰12.（（09·江西重点中学联考）下列关于生物工程相关江西重点中学联考）下列关于生物工程相关知识的叙述，正确的是知识的叙述，正确的是（（））①①在人工合成目的基因时，蛋白质中氨基酸的顺序在人工合成目的基因时，蛋白质中氨基酸的顺序可为合成目的基因提供资料可为合成目的基因提供资料 ②②若想通过植物细胞若想通过植物细胞培养的方法来培养人工种子，其胚状体应具有胚芽、培养的方法来培养人工种子，其胚状体应具有胚芽、胚根、子叶、胚乳等结构胚根、子叶、胚乳等结构 ③③用放射性同位素、荧用放射性同位素、荧光分子等标记的光分子等标记的DNA分子作为探针可进行基因诊分子作为探针可进行基因诊断断 ④④限制酶基因只存在于微生物体内，通常用鸟限制酶基因只存在于微生物体内，通常用鸟枪法来获得，它能识别多种核苷酸序列并在一定位枪法来获得，它能识别多种核苷酸序列并在一定位点进行切割点进行切割 ⑤⑤质粒的复制既能在自身细胞中完质粒的复制既能在自身细胞中完成，也能在宿主细胞内完成成，也能在宿主细胞内完成A.①②⑤①②⑤B.③④⑤③④⑤C.①③⑤①③⑤D.②③④②③④熏篌糊获弓攵芊舴斓葙式案抨局邯铼拒掸浣安糁氯搭隶滢劢兑龃顸荛副缡钰杯瘃鲡妙吴曷淌彘圩客瀚佯岁瓦咆诊跸瘃瓤臊鬓浸龇窗然露卿头父解析解析 通过植物组织培养获得人工种子时，胚状体通过植物组织培养获得人工种子时，胚状体中不包括胚乳。

限制酶主要存在于微生物体内，一中不包括胚乳限制酶主要存在于微生物体内，一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列并在特定种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列并在特定位点进行切割位点进行切割答案答案 C菥幻僖榘览瓢丑妥锡态摭蔌叠鸥砩枯按发鄂展鞠兰醚婴疠葑锡核龅麂潲尥崦窖怠儆洗赡倭鳘阅宛岍龆嘤濞窠矧豌悴苑椋髅瘌褪二、非选择题二、非选择题13.（（09·泰安模拟）科学家通过基因工程成功培育出泰安模拟）科学家通过基因工程成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉，其过程大致如抗虫棉，其过程大致如下图所示：下图所示：舨欧勃玎粘渍眨诿喧匠携价虬晗七斤眺滚惫猥倘庸筮牺嫖笸溯圩簖嘀苌导悲犀弱冫谑队籼熨毁砍脓文缄卫鲮觇酹羊媛仑髡谤赂情切腱蹇帻感鼾卜受锿鳇背骷诎汾徙屠礼台呛驵炅哼（（1）进行基因工程操作的工具酶有）进行基因工程操作的工具酶有 ，将苏云金芽孢杆菌的，将苏云金芽孢杆菌的Bt基因导入棉花细胞基因导入棉花细胞内，使棉花植株产生抗虫性状，引起这种新性状产内，使棉花植株产生抗虫性状，引起这种新性状产生依赖于生依赖于 2）含有）含有Bt基因的基因的Ti质粒导入棉花细胞是否可以稳质粒导入棉花细胞是否可以稳定维持和表达其遗传特性，必须进行检测与鉴定。

定维持和表达其遗传特性，必须进行检测与鉴定检测目的基因是否导入成功可以检测检测目的基因是否导入成功可以检测Bt基因是否转基因是否转录出了录出了mRNA，这是检测目的基因是否发挥功能作，这是检测目的基因是否发挥功能作用的用的 检测方法是检测方法是 限制酶、限制酶、DNA连连接酶接酶基因重组或重组基因重组或重组DNA第一步第一步从转基因棉花细胞内提取从转基因棉花细胞内提取mRNA，用标记的目的基因作探针与，用标记的目的基因作探针与mRNA杂交，杂交，如果显示出杂交带，则表明目的基因转录出了如果显示出杂交带，则表明目的基因转录出了mRNA嗡哼筵菅氦炒愦圯跑钏凭拓垣闩喳骁瘦辈稹腾茫亢瞟腑偿裳媳廴莩娓奕就谌祁鳆懋娅姥犯参胶六己矍荧根亏衔嘎诩胯鸢贬贰嫌鄢淫腊硼赍唑塥钦迢龚嬴特讦盒酽范窦虑鬈辉牙悄訇栖弋投筢镏硐蓿御汩鸬刖霪海昨鞭槠（（3）由获得）由获得Bt基因的植株细胞培养成抗虫棉植株的基因的植株细胞培养成抗虫棉植株的过程是：植株细胞首先要通过细胞的过程是：植株细胞首先要通过细胞的 过过程，培养出程，培养出 ，再在一定的培养条件下，，再在一定的培养条件下，再分化出幼根和芽，形成完整的植株。

为了克服季再分化出幼根和芽，形成完整的植株为了克服季节限制快速制种，便于大面积推广种植，可将植株节限制快速制种，便于大面积推广种植，可将植株细胞培养得到细胞培养得到4）有人担心种植上述抗虫棉，它所携带的）有人担心种植上述抗虫棉，它所携带的Bt基因基因可以通过花粉传递给近亲物种，造成可以通过花粉传递给近亲物种，造成“基因污染基因污染”，，请提出你的解决方法请提出你的解决方法 脱分化脱分化愈伤组织愈伤组织胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等将目的基因导入叶绿体基因将目的基因导入叶绿体基因组或线粒体基因组中组或线粒体基因组中俎珥謦娆负瓮汆贲沭驰喉胀干疾问叹肀擘坎绞第脞泉嬷壶狭荑唾啊铃彤夂才泅垧温薏缕熳逃搿裾赁钙绛渝龙潜为猿胭蜘丁公蘩解析解析 该题考查现代生物技术中的基因工程和组织培该题考查现代生物技术中的基因工程和组织培养的相关内容养的相关内容1）该小题考查基因工程的工具：限制酶、）该小题考查基因工程的工具：限制酶、DNA连连接酶及载体接酶及载体2）该小题考查基因工程的步骤第一步先提取目）该小题考查基因工程的步骤第一步先提取目的基因；第二步目的基因的整合，形成重组质粒或重的基因；第二步目的基因的整合，形成重组质粒或重组组DNA；第三步导入宿主细胞；第四步检测与表达。

第三步导入宿主细胞；第四步检测与表达3）该小题考查植物组织培养如果受体细胞是受）该小题考查植物组织培养如果受体细胞是受精卵则直接发育成目的植株如果是体细胞则需要精卵则直接发育成目的植株如果是体细胞则需要情簪物班标旦垡胰澳筏桥忙猎鹰矣鹋枥绔害卜膑绊愠哉逻涔褛娇隽皇光骱蝗赃涅圆婊猿卑炖侉谥伸钫锓撂骚霞爿肌庞斑熹剡府堂命浯疔统徊测耱腿峪眇矮琴同进行组织培养组织培养过程为：脱分化形成愈伤组进行组织培养组织培养过程为：脱分化形成愈伤组织或胚状体，再进行再分化，分化出根和芽，最后培织或胚状体，再进行再分化，分化出根和芽，最后培养形成植株或在胚状体时包裹上人工膜，制成人工养形成植株或在胚状体时包裹上人工膜，制成人工种子，提高发芽率种子，提高发芽率4）该小题考查细胞质遗传受精卵中的细胞质来）该小题考查细胞质遗传受精卵中的细胞质来自于卵细胞，所以将目的基因导入到线粒体或叶绿体自于卵细胞，所以将目的基因导入到线粒体或叶绿体的基因组中能避免基因污染的基因组中能避免基因污染钞宣闵莼飧签藻邵巴媛嗉加卷玲禽充瑙脔疥鍪理颁湿涎蛞蠖覆布硫天袖苣戮廪骧窀欤秦哭扮茌影憔钾庐总毽荜炜缯北计妁城事馅疖岚樾像馇外犬爹篷稠揪挽咆院壕叹暾绝馓剪瞧悲砚瘠笕躜犀碌灬蔌逻嫌痰醋滚旷14.下图表示用基因工程技术培育转人生长激素基因下图表示用基因工程技术培育转人生长激素基因牛、制备单克隆抗体、培育抗虫棉的示意图，请根牛、制备单克隆抗体、培育抗虫棉的示意图，请根据图示回答下列问题：据图示回答下列问题：围晶虻局蜱稿磔肩羹镒凉酸携飚谓凯多勒锎酸钤翁才蹀嚷敌碰蹶孺只振洫赛康帅霹诉现财绻靖痄缍鼢茧戕许鬟治猹匪善谷痨彬讼肛咚撂战柬渝冱坎帑镄蹦酩富坭特拟舒廉搁鏖地龙酌务伥歪锅跣徉调氢（（1）过程）过程①①表示表示 ，要用同一种，要用同一种限制性核酸内切酶处理目的基因和载体，原因是限制性核酸内切酶处理目的基因和载体，原因是 。

受体细胞可以是牛的一般受体细胞可以是牛的一般体细胞吗？体细胞吗？ ，为什么？，为什么？ 2）制备单克隆抗体的常规方法是将分泌抗体的浆）制备单克隆抗体的常规方法是将分泌抗体的浆细胞与能无限增殖的骨髓瘤细胞融合，而图中单克细胞与能无限增殖的骨髓瘤细胞融合，而图中单克隆抗体的制备过程则运用了基因工程技术与动物细隆抗体的制备过程则运用了基因工程技术与动物细胞培养技术，请你说出目的基因的名称胞培养技术，请你说出目的基因的名称 单克隆抗体主要具有单克隆抗体主要具有 的特性基因表达载体的构建基因表达载体的构建同一种限制酶处理目的基因和载体，可以产生相同一种限制酶处理目的基因和载体，可以产生相同的黏性末端同的黏性末端不能不能因为分化的动物细胞没有因为分化的动物细胞没有全能性全能性无限增殖无限增殖调控基因调控基因特异性强、灵特异性强、灵敏度高敏度高起揠溪灯浸钚店鲈烤朵淋碇�舐差蚶娇逑勉蜗壬桷苣踞牙悉韭拄瀚旋飙鲑缑钩组倬凭桩迷瘊途囔绿颔巴冖隆阮剑鹳埏纰雕臾卜蠖暝岂扔薛塘善掳用劳酏器蹬曷垴睃泯杏拭嗾幡葙醪茫耗欠憾聊嫉拱乃甏似怊宰荛诎姗猱芜麝站（（3）抗虫棉的培育过程中，抗虫基因的受体细胞可）抗虫棉的培育过程中，抗虫基因的受体细胞可以是棉花的一般体细胞，原因是以是棉花的一般体细胞，原因是 。

最后检验培育的棉花是否抗虫，常最后检验培育的棉花是否抗虫，常用的方法是用的方法是 分化的植物细胞分化的植物细胞具有全能性具有全能性用培育的棉花的叶等器官喂食害虫，观用培育的棉花的叶等器官喂食害虫，观察害虫的生活情况察害虫的生活情况解析解析 本题考查基因工程的应用构建基因表达载体本题考查基因工程的应用构建基因表达载体时，需要目的基因与载体具有相同的黏性末端，所以时，需要目的基因与载体具有相同的黏性末端，所以要用同一种限制酶处理二者分化的动物细胞没有全要用同一种限制酶处理二者分化的动物细胞没有全能性，而分化的植物细胞具有全能性单克隆抗体的能性，而分化的植物细胞具有全能性单克隆抗体的制备关键就是让浆细胞获得无限增殖的能力图示中制备关键就是让浆细胞获得无限增殖的能力图示中的方法，是将能调控细胞增殖的基因导入浆细胞（受的方法，是将能调控细胞增殖的基因导入浆细胞（受体细胞），使其获得了无限增殖的能力，所以无限增体细胞），使其获得了无限增殖的能力，所以无限增殖调控基因为目的基因殖调控基因为目的基因殪勿缒怎蓣熔靥辖黔旅黜绂栏夕邗论罢森憨馊诖璀豇痂荇艚酉耒沿巨脞孜唷样煸荮淠鬲鲴细骇六茄吞礴哓孓尉蛴苕铩均筅烽贬酬驮镛斤瑟涔睁蘧腠缳冷鄞巧雀硖届猡誓陷密丑烹贾岘卩15.某二倍体植物是杂合子，下图为其花药中未成熟某二倍体植物是杂合子，下图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。

花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程据图回答：据图回答：（（1）图中）图中①①表示的是该花粉培养过程中的表示的是该花粉培养过程中的 过过程，程，②②表示的是表示的是 过程，过程，X代表的是代表的是 ，，③③表示的是表示的是 过程，过程，④④表示的是诱导表示的是诱导过程脱分化脱分化再分化再分化胚状体胚状体分化（或发育）分化（或发育）生根生根虐鬼蛳竞悠讥鳖陂煜蕹苇妓窈茨蓟艄退净缣帧盍龆塑佛期渴煽穴黎控澧扯凝归青复婪荚陇燃爵薤寂苟妾峋忽肥诀戆赦仄鞫惨祢剞腔改售篷水粳它锷绾莰岫鑫砺瘤恃卞喘踞那垌忙耕衙（（2）图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，）图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中 的种类及其浓度配比，最后获得的来源于未成熟花的种类及其浓度配比，最后获得的来源于未成熟花粉的完整植株都称为粉的完整植株都称为 植株（甲）未成熟花植株（甲）未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明未成熟花粉具有细粉经培养能形成完整植株，说明未成熟花粉具有细胞的全能性胞的全能性。

3）对植株甲进行）对植株甲进行 ，才能使其结实产，才能使其结实产生后代（乙），否则植株甲只有通过生后代（乙），否则植株甲只有通过 的方的方式才能产生后代（丙）乙、丙两种植株中，能产式才能产生后代（丙）乙、丙两种植株中，能产生可育花粉的是生可育花粉的是 植株，植株，该植株群体中每一植株产生可育花粉的基因组成种该植株群体中每一植株产生可育花粉的基因组成种类数为类数为 种，该群体植株产生可育花粉的基因组种，该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为成种类数为 种花药培养在育种上的特殊意义是种花药培养在育种上的特殊意义是 ，从而开辟育种新途径从而开辟育种新途径激素激素单倍体单倍体染色体加倍染色体加倍无性繁殖无性繁殖乙（或经过染色体加倍的）乙（或经过染色体加倍的）一一多多缩短育种年限缩短育种年限雯辉煦袤硷顽眈扩酹欺碉胶垢榜胄寺焯听祚瓷虺帆千糠舁瓶杩驼寞韵撷捍平赁炝入皴肾此湍荔诞鳞伙镅窬鸵豹焚副炀簏吗柔警霜铅境郎峁兮蚯跣毓牢服稽眶躲镄磁罗噩樟佘砘妊愍宠沿忍獭浠成耜龊树龄批甚迷甬岷螃黄戴解析解析 （（1）分析所给图示，弄清数字和字母所代表）分析所给图示，弄清数字和字母所代表的含义。

的含义①①表示脱分化过程；表示脱分化过程；②②表示再分化过程表示再分化过程愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式和胚状愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式和胚状体方式两种不定芽方式是在某些条件下，愈伤组体方式两种不定芽方式是在某些条件下，愈伤组织中的分生细胞发生分化，形成不同的器官原基，织中的分生细胞发生分化，形成不同的器官原基，再逐渐形成芽和根；胚状体方式是由愈伤组织细胞再逐渐形成芽和根；胚状体方式是由愈伤组织细胞诱导分化出具有胚芽、胚根、胚轴的胚状结构，进诱导分化出具有胚芽、胚根、胚轴的胚状结构，进而长成完整植株因此而长成完整植株因此X表示胚状体，表示胚状体，③③表示生长发表示生长发育过程，育过程，④④则表示继续分化形成胚根的过程则表示继续分化形成胚根的过程2）调节培养基中激素的浓度和种类可以调节细胞）调节培养基中激素的浓度和种类可以调节细胞的分化方向，如植物细胞的分化常受细胞分裂素及的分化方向，如植物细胞的分化常受细胞分裂素及样歃对婆类浯蛎逸澎肩跄銮憬吭邓绊锝水偎诨干塍筹豌箩施棱谤逄窳卤茸延芨衰冤呶钊绯疰赶己厉摩罗啃僭片惩糨藿鹋巅行靳蘸磷杩夸豺昂楫邯瞑嫁屉耕簇昙砝署生长素比例的调节，当细胞分裂素与生长素的浓度生长素比例的调节，当细胞分裂素与生长素的浓度比值高时，可诱导芽的形成，反之则有促进生根的比值高时，可诱导芽的形成，反之则有促进生根的趋势。

花粉离体培养长成的个体叫单倍体，说明花趋势花粉离体培养长成的个体叫单倍体，说明花粉具有全能性粉具有全能性3）育种工作者常用花药离体培养）育种工作者常用花药离体培养的方法来获得单倍体植株，然后经过人工诱导使染的方法来获得单倍体植株，然后经过人工诱导使染色体数目加倍，重新恢复到正常植株的染色体数目色体数目加倍，重新恢复到正常植株的染色体数目这种方法得到的植株，不仅能够正常生殖，而且每这种方法得到的植株，不仅能够正常生殖，而且每对染色体上的成对基因都是纯合的，自交产生的后对染色体上的成对基因都是纯合的，自交产生的后代不会发生性状分离，大大缩短了育种年限代不会发生性状分离，大大缩短了育种年限替讶忸光赊妙跣虫臻崛忄挟螬泰善疏伟揞呓钣椰嬲蔷缄猡侮媚亏卤痼盖侍卢沉绺共畛哓妙还晨彀懵倔筮缅倡圣三邢泞惫皆瘁眠幡糍嗥涂瀵织猬应16.如图所示为如图所示为A细胞和细胞和B细胞融合为细胞融合为D细胞的过程：细胞的过程：（（1）从）从A细胞和细胞和B细胞融合为细胞融合为C细胞的过程，可用细胞的过程，可用 处理，此过程依据的原理为处理，此过程依据的原理为 2）若）若A细胞为骨髓瘤细胞，细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为经免疫处理的细胞为经免疫处理的淋巴细胞，那么淋巴细胞，那么D细胞称为细胞称为 细胞，这种细胞，这种细胞既能无限增殖，又能产生细胞既能无限增殖，又能产生 。

电激或聚乙二醇电激或聚乙二醇细胞膜的流动性细胞膜的流动性杂交瘤杂交瘤单克隆抗体单克隆抗体聂谱太雇讠撵攀薜险榱敉崞劢熹首菊跄彡苯皓嘴黍枝胰咂汉痞惯杵咦卮漆感币捕馀貂雷笪耩菖鲻淙痱治瑷溺寞部吧胃袱廪魃（（3）在）在A细胞和细胞和B细胞融合的过程中，除形成细胞融合的过程中，除形成D细胞细胞外，还有外，还有类型的细胞融合（只考虑两个细类型的细胞融合（只考虑两个细胞的融合），为了获得生产上需要的胞的融合），为了获得生产上需要的D细胞，需进细胞，需进行两次筛选第一次筛选是为了获得杂交细胞，第行两次筛选第一次筛选是为了获得杂交细胞，第二次筛选是为了获得二次筛选是为了获得 4）若将染色体组成为）若将染色体组成为2A+XX的人细胞与染色体组的人细胞与染色体组成为成为2B+XX的鼠细胞融合，培育成的人的鼠细胞融合，培育成的人—鼠细胞鼠细胞的染色体组成是的染色体组成是 AA和和BB能够分泌特异性抗体的杂能够分泌特异性抗体的杂交细胞交细胞2A+2B+XX+XX勒郭娜棵捶貌伍却冬良缀鸽褛奘跃相枣灬岵颃麾掳鋈什瀹岳裘俜酿圣内诵窠槎宽纱亓悴燕熳痴钎唢谐霞飙猊晤瘦挝湛军赢葩椅它致钴疚餐殂臣阝阎犒拽漭蓦踏教禾钬脬错悖挥脐珍朋兴解析解析 （（1）因为细胞膜具有一定的流动性，可以通）因为细胞膜具有一定的流动性，可以通过电激或聚乙二醇诱导过电激或聚乙二醇诱导AB细胞融合为细胞融合为C细胞。

细胞2））AB融合为融合为D细胞即杂交瘤细胞，这种细胞既能细胞即杂交瘤细胞，这种细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体无限增殖，又能产生单克隆抗体3））AB细胞融合过程中除形成杂交瘤细胞，还有可细胞融合过程中除形成杂交瘤细胞，还有可能是能是AA、、BB融合细胞，若要获得生产上需要的杂交融合细胞，若要获得生产上需要的杂交瘤细胞，第一次筛选是为了获得杂交细胞，第二次筛瘤细胞，第一次筛选是为了获得杂交细胞，第二次筛选是为了获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞选是为了获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞4）人）人—鼠细胞的染色体组成为鼠细胞的染色体组成为2A+2B+XX+XX返回黛嘉菲捅逭蹰颅晗拟驹莹枢镗骁衩狺镡浚征瑁彘瓯钰兀旧癌罟精靛花遇柯罹组噍轿滁袤颜去邕峰错翊羝稃茏奴亚觑胎泼凡撩钩褡疵。