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肝肾阴虚证大鼠下丘脑—垂体—甲状腺轴的变化及中药对其调节作用2001 年 l0 月第 8 卷第 10 期中国中医药信息杂志 21肝肾阴虚证大鼠下丘脑一垂体一甲状腺轴的变化及中药对其调节作用△樊蔚虹岳广欣任小巧卢跃卿唐柬(河南中医学院郑州 450008)一目的:探讨肝肾阴虚证太鼠下丘脑一垂体一甲状腺轴的变化及中药对其调节作用方法:H 激怒法制遣大鼠肝肾阴虚模型.研究下丘脑一垂体一甲状腺轴(NPT)各项指标的变化结果:肝肾阴虚模型太鼠下丘脑 TRH 增高,血清 TSB,FT3.FT.水平均降低(,0.05). 而血清 rT3 浓度升高{P0.05):运用滋补肝肾方能够减轻这种激怒应激反应,滋补肝肾方药组各指标与模型组比差异显着{,0.O5),与正常组比较无显着差异,而柴胡疏肝散无明显作用结论:下丘脑一垂体一甲状腺轴的部分抑制是肝肾阴虚证形成的关键.一肝肾阴虚征下丘脑一垂体一甲状腺轴ChangeWhichaRatModelwithYin-diffiencyofLiverandKidneyInducedbySlowIrritationonHypothalamus-Pituitary-thalamus——pituitarythypoidglandandregulatoryeffectofherbs.M 嘲:TostudychangeofvariousindexeswhicharatmodelwithYin—diffiencyofliverandkidneywasmadebywayofslowirritation.R∞●l 缸:IheTRH(thyrotropin—releasing—hormone)ofsecretionfromhypothalamusincrease.FT(3,3’,5-traiodothyron]ne),FT4(3,5,3’,5 一tetraiodotbyr0nine)andTSHinblooddecreased(P0.05),butrTinbloodincreased(O.05).variousindexesofnourishing1iverandkidneyfangyaocontrolgroupcouldimprovedmoreeffectiwewithmodelgroup,butitcouldprovedmoreeffectivewithnormol,butchaihushugansancouldimprovedmoreeffectire.(耐_:ThekeytothequestionofYin—diffiencyof1iverandkidneyiSapartofrestraininHPT.Ke,WYin—diffiencyofliverandkidney~HPT肝肾阴虚证是临床上常见的复台证型,对于其本质的研究有诸多报道,但都只反映了这种状态的一个侧面,而从整体 上,本质上反映肝肾阴虚证内涵的研究则鲜有报道.肝肾阴虚证临床见多汗,喜凉怕热,消瘦,颧红,烦躁不安,多梦,肌肉震颤等症状,此与现代医学下丘脑一垂体一甲状腺轴功能紊乱相关.故我们从下丘脑一垂体一甲状腺轴方面较全面探索该证的本质.1 实验材料1.1 实验动物健康 sD 太鼠.雄性,体重 220g±20g,共 33 只 ,河南医科大学实验动物中心提供,饲养条件为室温 20~28℃,每天黑暗 12h,光照 12h,普通饲料喂养△河南省教委自然科学基金项目(№.98360003)1.2 药品滋补肝肾方:生地黄,熟地黄,北沙参,当归,麦冬,川楝子,丹参,生麦芽,山药,山萸肉,牡丹皮等;柴胡疏肝散:柴胡,陈皮,香附,JI『芎,枳壳,白芍,甘草.上药均由河南省药材公司提供,滋补肝肾方常规煎煮 3 次,滤渣,浓缩至 2.Og/ml(含原药材 ).柴胡疏肝散经蒸馏,提取挥发油后,浓缩至 0.75g/ml(含原药材),兑入挥发油 .1.3 主要试荆游离 3.3’,5-三甲碘原氨酸(FT) 试剂盒,游离甲碘原氨酸 VT)放射免疫试剂盒,3,3’,5- 三碘甲状腺原氨酸(rT)放射免疫试剂盒,血清甲状腺(TSH)放射免疫试剂盒,促甲状 腺激素释放激素(TRH)放射免疫试剂盒,均由北京生物技术所生产,批号 9809.2 实验方法22 中国中医药信息杂志 2001 年 10 月第 8 卷第 10 期2.1 分组及造模按随机数字法将大鼠分为空白对照组(8 只), 肝肾阴虚模型组(9 只), 滋补肝肾方治疗组(8 只)柴胡疏肝散治疗组(8 只 ).除空白对照组外.余组大鼠均双后肢束缚固定于盖网上,每 2 只一笼以引起明显激怒,表现为粗叫,扭打和嘶咬,每日 1 次,首次维持应激 20mi[】1 以后隔日增加 lOmin.共20d.对照组除不固定后肢外,余处理同其他组2.2 给药方法按人和大鼠体表面积系数换算方法计算,滋补肝肾方治疗组从造模第 1 天起以 20g/(kg?d)剂量灌服滋补肝肾方浓缩液,柴胡疏肝散治疗组以 75g/(kg?d)剂量灌服柴胡疏肝散,空白对照组和肝肾阴虚模型组灌服生理盐水剂量为1Ore]/【kg?d),共 20d.2.3 取材与样表制备断给予铃声刺淝 Omin 每 0mi[】1 做为新异刺激为避免时差,把各蛆动物配组处死断头取血.①粟血分 2 管,一管中预先加入 TP,H 抗灭活剂 5OuL 故入冰水浴中,粟血 1～2m1 后,摇动. 迅速放回冰水浴中.15min 内低温离心取上清液,故一 40”(2 冰箱保存.待测 TP,H.另一管取血 3~4m],低温下退缩后离心.取血清,低温冰箱保存,待测 TSH,FT3,FT,rT②大鼠处死后迅速打开颅脑,分离出垂体和大脑.置沸腾的生理盐水中烧 5rain,用小打孔器在大脑腹侧视交叉后,打孔取组织柱2～3 咖【即下丘脑),称重后加入 ItC]1mo]/L2M,匀浆 lmin,以 NaOIt1mo]/L2m]中和.离心后取上清液置一 40~C 冰箱保存.待测下丘脑 TRH;将垂体去除后叶后称重,加入 lmol/L]tellm],匀浆 lmin,以 ltaol/LNaOHlm]中和,离心后,取上清波置一 40℃冰箱保存,待测垂体 TSI][.3 结果(见表 1)于第 21,22d9:00～11:O0 将动物处死,处死前 2h 问 4 讨论表 1 长期激怒大鼠 FT3’FT,rTa,TSH,IRH 的变化及滋补肝肾方对其影响(sn=8/9)注:与空白组比较,△ P005普遍认为在应激状态下,各种刺激通过传入神经通路进入大脑皮层边缘系统再通过下丘脑一垂体一肾上腺皮质轴使肾上腺皮质激素分泌增加,儿茶酚胺,皮质酮水平升高并抑制生长和生殖轴,以适应机体需要.最近资料表明,急性脑血管疾病应激状态下,血清 T3,FT,TSI]均下降.T,FT 无显着变化,.有实验证明,束缚应激状态下,大鼠血浆中 T,L 明显下降,注入 TRH 后血浆中 L,T 浓度恢复正常本 实验结果显示长期激怒状态下血清 FTFT,TSH 均下降,rT升高,与以上报道相似,本研究还显示肝细胞核 T3RBmax 增高(另文发表), 表明应激状态下存在着 HPT 轴的紊乱.提示各种环境,心理应激不仅影响下丘脑肾上腺系统(tIPA),而且也影响到了 tIPT 系统现代研究表明.肾上腺功能与中医学之肾脏的某些功能十分相似,应用糖皮质激素塑造肾虚模型的成功及临床应用糖皮质激素所出现阴虚内热的副反应也说明了这一点另外,情绪心理应激从中医脏象理论分析,当主要责之于肝,肝主疏泄最主要的生理作用之一是和情绪调节相关_5;肝脏亦通过影响甲状腙激素的运转,储备,代谢而调节着循环血中甲状腙激素水平,显示肝脏在影响甲状腺内分泌中占重要地位,.应激状态下 HPT,HPA 两个系统同时受累,这也许就是肝肾同源的本质所在.奉实验中,在长期激怒应激状态下,低水平 FT,FL 与低水平 TSH 同时存在.而下丘脑 TRH 含量却升高,在运用滋补肝肾药后,大鼠皮毛光泽,活动能力增强.FT,FL,TSH 恢复正常或接近正常,说明滋补肝肾方对该轴的功能紊乱有调整作用.亦说明此轴功能紊乱可能是肝肾阴虚证本质之一.然TRH 变化不明显,可能为激怒应激原长期存在,仍对 TRH 释放起抑制作用有关.从中医学角度看情志以脏腑气血为物质基础,激怒刺激则主要伤及”肝血”, 一方面使肝脏有形之质耗伤,进而影响甲状腺激素的代谢;另一方面疏泄失常,导致 精神情志的改变,通过神经内分泌系统.进一步影响 HFT 系统,说明 tIPT 轴紊乱是肝肾阴虚证的关键所在实验中低水平FT.,FT 未刺激 TSH 升高,亦可能与下丘脑,垂体 T 受体(T,R)数量增多,亲合力增高,而 II 型 5’…脱碘酶活性下降有关故激怒模型组大鼠呈现出 HPT 轴受抑翩的现象.奉实验显示长期激怒状态下,血清 FL,FT 水平降低.与推测的结果相反,可能是由于机体细胞核 TR 数目增加,亲和力提高使 L 效应加强的结果,故表现出一种虚性亢奋状态,其中机理有待进一步研究.参考文献1 张新民.沈自尹,土立健.等补肾对神经内分泌者化调节作用研究(I]中医杂志.1991.37(11):432 刘俊艳.赵淑蓉.王汝圭,等.急性脑血管病患者下丘脑一垂体一甲状腺轴的功能改变中华神经精神科杂志,1993.26(1):313 彭康乌龙丹治疗脑梗塞及对下丘脑一垂体一甲状腺轴的影响中国中西医结台杂志.1998.18(3):1352001 年 l0 月第 8 卷第 10 期中国中医药信息杂志 23乙肝Ⅱ号对小鼠免疫性慢性肝损伤的抗自由基损伤作用△钱涯邻孙沛毅孙云 (江苏省苏北人民医院扬州 225001)一目的:研究乙肝 II 号对免疫性肝损伤小鼠抗自由基的作用及其机理方法:取异种动物的肝提取物作为抗原免疫纯系小鼠产生抗肝抗体,形成慢性实验性免疫性肝损伤,观察小鼠血清丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肤过氧化物醇(GSH—PX)活力的变化取及乙肝Ⅱ号对 MDA,SOD 和 GSB-PX 变化的影响结果:乙肝 II 号组与模型纽相比,小鼠血清 MDA 含量下降,SOD 活力上升,GSH—PX 活力上升,变化的程度与用药量呈量效关系,且抗自由基作用优于阳性对照乙肝宁颗粒荆组.结论:乙肝 II 号对免疫性肝损伤 d,鼠具有抗自由基损伤的作用一免疫性肝损伤乙肝Ⅱ号谷胱甘肤过氧化物醇丙二醛超氧化物歧化酶AntioxidationofPrescription№.ⅡforAnti-hepatitisBinExperimentalMicewithChronicInununo-HepaticInjuryQiaaYalinSunPeiyiSunYun(JiangsuProvinceSubei’~ospftalYangzhou22500ij/~tract0MedlTe:Prescription№.I1foranti-hepatitisB(PIIAffB),wasstudiedforitsantioxidationinimmono—hepaticinjury.Method:Thechronichepaticinjurywasinduced byinjectionwithantigenfrom1iverextractionofheterogenousanima1.ThebloodsamplesweretakenandmeasuredforthelevelofmalonyldialdgestedthatthetherapeuticalactionofPIIA 船onhepatitisBbeasSOCiatedwithitsantioxidation■Wor 山 hepaticinjury~PrescriptionWIforanti—hepatitisB;glutathioneperoxidase:malonyldiadehyde;superoxidedismuase本实验采用 zl 肝 II 号。