212鉴定生物组织中的糖类脂肪和蛋白质yxl.ppt

一一.实验原理：实验原理： 某些某些化学试剂化学试剂能够使生物组织中的有关能够使生物组织中的有关有机有机化合物化合物产生特定的产生特定的颜色反应颜色反应如：①.还原性糖的鉴定：还原性糖的鉴定：还原性糖还原性糖+②.脂肪的鉴定：脂肪的鉴定： 　　　　　　 脂肪脂肪+ 脂肪脂肪+ 　　　　　　 ③.蛋白质的鉴定：蛋白质的鉴定：蛋白质蛋白质+ +④淀粉 +斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀苏丹苏丹ⅢⅢ橘黄色橘黄色苏丹苏丹ⅣⅣ红色红色双缩脲试剂双缩脲试剂紫色紫色碘碘蓝色蓝色水浴加热水浴加热水浴加热水浴加热50——65˚C50——65˚C50——65˚C50——65˚C二二. .目的要求：目的要求： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质肪和蛋白质1 1、还原糖的检测和观察：、还原糖的检测和观察： 选材选材 应该选择含应该选择含 量高量高. .颜色为颜色为 植物组织植物组织 以以苹果苹果. .梨梨为最好。

为最好糖糖白色或近于白色白色或近于白色制备组织样液：制备组织样液：三三. .实验过程实验过程: :制浆：去皮、切块、研磨制浆：去皮、切块、研磨过滤：（用单层纱布）过滤：（用单层纱布）取液：取液：（２（２mL））可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀，程中生成砖红色沉淀，说明植物组织说明植物组织样液中含有还原糖样液中含有还原糖注入注入2mL2mL苹果组苹果组织样液织样液注入注入1mL1mL刚配制好的刚配制好的斐林试剂斐林试剂水浴加热约水浴加热约2min2min检测步骤检测步骤变成变成砖红色砖红色50----650C的温水的温水结论：结论：甲乙液等量混匀甲乙液等量混匀振荡、混振荡、混合摇匀合摇匀呈呈现蓝色现蓝色 ①还原糖有还原糖有 ②试剂：试剂： . （甲液：（甲液：0.1g/ml 的的 , 乙液：乙液：0.05g/ml的的 .））甲乙液必须甲乙液必须 后再加入样后再加入样 液中，液中， 。

③必须必须 葡萄糖，果糖，麦芽糖葡萄糖，果糖，麦芽糖用水浴加热用水浴加热斐林试剂斐林试剂NaOHCuSO4 等量混合均匀等量混合均匀现配现用现配现用注意事项：注意事项：④颜色变化：颜色变化：浅蓝色浅蓝色棕色棕色砖红色砖红色2 2、脂肪的检测和观察：、脂肪的检测和观察：圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在方法一：方法一：待测组织样液待测组织样液+ +苏丹苏丹ⅢⅢ染液染液→→橘黄色橘黄色取材：取材：花生种子花生种子( (浸泡浸泡3 3～～4h4h），将子叶削成薄片），将子叶削成薄片方法二：制作子叶临时切片，用显微镜观察方法二：制作子叶临时切片，用显微镜观察 子叶细胞的着色情况子叶细胞的着色情况制片制片①①取最理想的薄片取最理想的薄片②②在薄片上滴苏丹在薄片上滴苏丹ⅢⅢ染液（染液（2 2～～3min3min））③③去浮色（用去浮色（用50﹪50﹪酒精）酒精）④ ④ 制成临时装片制成临时装片观察观察低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察然后用高倍镜观察结论：结论：脂肪微粒脂肪微粒 注意事项：注意事项： ① ①切片要薄，切片要薄，如厚薄不均就会导致观察如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。

时有的地方清晰有的地方模糊 ② ②酒精的作用是：酒精的作用是： ③ ③需使用显微镜观察需使用显微镜观察 ④ ④ 使用不同的染色剂染色使用不同的染色剂染色时间时间不同，不同，颜色变化：颜色变化： 洗去浮色洗去浮色橘黄色或红色橘黄色或红色3 3、蛋白质的检测和观察：、蛋白质的检测和观察： 选材选材 应该选择含应该选择含 丰富的丰富的豆浆豆浆或或鸡鸡 蛋清蛋清溶液避免材料自身的颜色对溶液避免材料自身的颜色对 实验变化颜色的掩盖）实验变化颜色的掩盖）蛋白质蛋白质黄豆浆滤液或蛋清稀释液黄豆浆滤液或蛋清稀释液制备组织样液制备组织样液呈色反应呈色反应组织组织样液样液2mL2mL双缩脲试双缩脲试剂剂A A液液1mL1mL双缩脲试双缩脲试剂剂B B液液4 4滴滴摇匀后变摇匀后变成紫色成紫色结论：结论：说明组织样液中存在蛋白质说明组织样液中存在蛋白质。

（（3 3）注意事项：）注意事项： ① ①试剂：试剂： （（A液液:0.1g/ml的的 ；； B液：液： 0.01g/ml的的 ）） 先加先加 ，再加，再加 B液要求量适中，否则液要求量适中，否则多余的多余的B液液将会将会与与A液液发生发生反应生成反应生成Cu（（OH））2显色而遮盖原有的颜色显色而遮盖原有的颜色 ② ② 鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比双缩脲试剂双缩脲试剂A A液液1ml1mlB B液液4 4滴滴NaOH③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免实验后粘住试管壁，不易洗刷实验后粘住试管壁，不易洗刷CuSO4蛋白质的检测结果斐林试剂与双缩脲试剂的比较：斐林试剂与双缩脲试剂的比较：A A液液:0.1g/mLNaOH:0.1g/mLNaOHB B液液: :0.010.01g/mLCuSOg/mLCuSO4 4甲液甲液:0.1g/mLNaOH:0.1g/mLNaOH乙液乙液: :0.050.05g/mLCuSOg/mLCuSO4 4紫色物质生成紫色物质生成砖红色沉淀砖红色沉淀先加先加A A液液，，再加再加B B液液，，不不需加热需加热甲液与乙液甲液与乙液先混再用先混再用，，且且现配现用现配现用，需，需加热加热蛋白质蛋白质还原性糖还原性糖试剂试剂组成组成检验检验结果结果试剂试剂用法用法检测检测对象对象双缩脲试剂双缩脲试剂斐林试剂斐林试剂问题探讨问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？一部分样液？作对照作对照2、使用双缩脲试剂时为什么、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加液只能加3～～4滴而不能滴而不能过量？过量？ 过量的双缩脲试剂过量的双缩脲试剂B B会与试剂会与试剂A A反应，使溶液呈蓝反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。

色，而掩盖生成的紫色3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？ 时间太长，时间太长，Cu(OH)Cu(OH)2 2悬浊液就沉淀在试管底部而悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应无法参与反应l深化深化4 4、淀粉的检测和观察：、淀粉的检测和观察： 取材：取材：马铃薯匀浆马铃薯匀浆检测检测组织组织样液样液2mL2mL碘液碘液2 2滴滴结论：结论：说明组织样液中存在淀粉说明组织样液中存在淀粉注意：注意：常用材料：马铃薯常用材料：马铃薯 试剂：试剂： 颜色变化：颜色变化： 碘液碘液变蓝变蓝摇匀后变摇匀后变成蓝色成蓝色回顾：实验的材料的选择和处理有什么要求？回顾：实验的材料的选择和处理有什么要求？材料的选择材料的选择材料的处理材料的处理还原性糖的鉴定还原性糖的鉴定脂肪的鉴定脂肪的鉴定含糖高，颜色为含糖高，颜色为白色的植物组织，白色的植物组织，如苹果和梨如苹果和梨富含脂肪的种富含脂肪的种子，如花生子，如花生浸泡浸泡3~4小时小时/蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定富含蛋白质的富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清黄豆或鸡蛋清黄豆需浸泡黄豆需浸泡1-2天，天，鸡蛋清要先稀释鸡蛋清要先稀释淀粉的鉴定淀粉的鉴定马铃薯马铃薯/ 各种可供实验的材料各种可供实验的材料梨梨 黄桃黄桃 胡萝卜胡萝卜 黄豆黄豆 花生种子花生种子 小麦种子小麦种子 ①①其中适合于鉴定其中适合于鉴定可溶性还原糖可溶性还原糖的是的是 ，理由是，理由是梨的组织细胞梨的组织细胞 ，，你打算用什么试剂鉴定你打算用什么试剂鉴定? 。

②②小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪，这是小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪，这是因为因为 ，你打，你打算用什么试剂鉴定算用什么试剂鉴定? . [例例] 做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的实质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的实验材料请根据下表所列各种材料回答问题：验材料请根据下表所列各种材料回答问题：梨梨 颜色为白色，并且糖含量较高颜色为白色，并且糖含量较高 斐林试剂斐林试剂脂肪含量不如花生高，也不容易做切片脂肪含量不如花生高，也不容易做切片 用苏丹用苏丹ⅢⅢ或苏丹或苏丹ⅣⅣ试剂试剂③小麦种子中糖类化合物小麦种子中糖类化合物 含量很高，却不适合用含量很高，却不适合用来鉴定来鉴定 __________，这是因为，这是因为 ________________________________________。

④适合于鉴定蛋白质的是适合于鉴定蛋白质的是 ，理由是，理由是 ，鉴定所用的试剂是，鉴定所用的试剂是 蛋白质含量高蛋白质含量高 黄豆和花生黄豆和花生 双缩脲试剂双缩脲试剂淀粉淀粉 可溶性还原糖可溶性还原糖 淀粉是非还原糖且不溶于水淀粉是非还原糖且不溶于水 以下植物器官中最好选哪几种做为实验材料？为什么？以下植物器官中最好选哪几种做为实验材料？为什么？√ √ √ √ √ √ √ √ ╳ ╳有色素有色素,会会掩盖颜色反掩盖颜色反应的结果应的结果╳ ╳蔗糖不是还蔗糖不是还原糖原糖没有颜色或颜色较浅；分别富含可溶性还原没有颜色或颜色较浅；分别富含可溶性还原糖糖（葡萄糖、麦芽糖、果糖）（葡萄糖、麦芽糖、果糖）、淀粉、蛋白质、脂肪淀粉、蛋白质、脂肪知识结构1.在下列四支试管中分别加入一些物质，在下列四支试管中分别加入一些物质，甲试管甲试管:豆浆豆浆;乙试管乙试管:氨基酸溶液氨基酸溶液;丙试丙试管管:牛奶和蛋白酶牛奶和蛋白酶;丁试管丁试管:人血液中的红人血液中的红细胞和蒸馏水细胞和蒸馏水.上述四支试管中加入双上述四支试管中加入双缩脲试剂振荡后缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是有紫色反应的是( ) A.甲、丁甲、丁 B.甲、乙、丁甲、乙、丁C.甲、乙、丙甲、乙、丙 D.甲、丙甲、丙 对应训练对应训练D2.2.下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是Ａ．用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，Ａ．用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定可直接用于蛋白质的鉴定ＢＢ. .脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴脂肪滴 C.C.鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液再加入乙液Ｄ．用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂Ｄ．用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A A液与液与B B液要混合均液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现配现用匀后，再加入含样品的试管中，且必须现配现用ＢＢ3、、青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合林试剂作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合理的是理的是 ( ) A．青苹果汁中有淀粉，不含还原糖．青苹果汁中有淀粉，不含还原糖 B．熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉．熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉 C．苹果转熟时，大量淀粉水解成还原糖．苹果转熟时，大量淀粉水解成还原糖 D．苹果转熟时单糖聚合成淀粉．苹果转熟时单糖聚合成淀粉 C4、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国，引起、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国，引起世人注目。

鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产世人注目鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，肯定不需要用到的化学试剂是品，肯定不需要用到的化学试剂是 ( ) A.斐林试剂斐林试剂 B. 红墨水红墨水　　C.双缩脲试剂双缩脲试剂 D.苏丹苏丹ⅣⅣ染液染液 B5(2005.广东广东)生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中，以下操作错误的是物的鉴定实验中，以下操作错误的是( )A、可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红、可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀色沉淀B、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜C、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用A 。