番茄红素和β-胡罗素教案.docx

名师归纳总结 精品word资料 - - - - - - - - - - - - - - -学习必备 欢迎下载教 案课程名称：有机化学试验授课老师 丁长江等 所在单位 公共化学教学与讨论中心课程类型 必修基础课 授课时间 春季学期授课对象 医学五年制、七年制教学内容提要番茄红素和 β - 胡萝卜素的提取、分别和鉴定（ 8 学时）番茄红素和 β - 胡萝卜素：均属四萜类化合物，分子式为 C40H56 , 为植物胡萝卜素类，是脂溶性色素，易溶于氯仿、二氯甲烷等极性较小的有机溶剂中；因分子内含一系列共轭双键发色基团， 故具有颜色， 自然类胡萝卜素多为反式构型，呈黄色或红色，遇三氯化锑试剂呈蓝色反应，即 Car- Price 反应；此外，这类物质多有荧光，据此可定性鉴别该类物质；结构式如下： 番茄红素β - 胡萝卜素1. 二氯甲烷：沸点低 〔40 ℃ 〕 ，易挥发，具有高毒性；二氯甲烷密度为 1.325 ；2. 苯：为致癌物，使用后要准时盖好瓶塞，防止吸入其蒸气，必要时可在通风橱中进行操作；3. 石油醚：沸点低（ 30-60 ℃， 60-90 ℃），易挥发，易燃烧；一、试验原理：1. 提取： 利用这两种色素的脂溶性的特点， 即易溶于氯仿、 二氯甲烷等极性较小 的有机溶剂的特性， 选用二氯甲烷作溶剂从番茄酱中提取番茄红素和 β- 胡萝卜素；得到混合提取液；2 ．分别及鉴定： 由于这两种色素的结构相像，故难以用萃取，蒸馏、重结晶、升华等方法分别； 利用层析的方法可以将两者分别开； 故采纳柱层析分别两者；采纳薄层层析进行鉴别；二、试验材料仪器：具塞锥形瓶 〔100mL〕 两个 、分液漏斗 〔250mL〕 、小层析柱、硅胶 G 板两块、毛细管三根、漏斗蒸馏装置、层析缸两个时间安排及备注讲授 30 分钟，其余时间学 生动手操作 第 1 页，共 4 页 - - - - - - - - -名师归纳总结 精品word资料 - - - - - - - - - - - - - - -学习必备 欢迎下载药品：番茄酱、 95％乙醇、二氯甲烷、 环己烷、 石油醚 〔b.p30 ～60℃，60～ 90℃ 〕 、苯、饱和氯化钠溶液、无水硫酸钠、氧化铝、硅胶、三氯化锑试剂其它：电水浴锅、滤纸、脱脂棉、剪刀、天平、紫外灯三、试验内容[2][3]1. 提取：称取 5g 番茄酱于 100mL烧瓶中，加 10mL 95％乙醇回流加热 5min ，冷却后过滤 ，滤液储存于锥形瓶中，再将固体残渣每次用 10mL 二氯[4]甲烷回流提取两次，每次回流 3～ 5min ；将三次滤液合并倒入分液漏斗中，加 10mL饱和氯化钠溶液萃取，静止分层后分出有机层，于一干 燥的 100mL锥形瓶中，加适量无水硫酸钠，塞紧瓶塞干燥；2. 分别：柱层析（ 1）样品处理 取过滤的提取液 3～ 4mL于小烧杯中，加入 1g 氧化铝，搅拌匀称后在水浴上蒸干；（ 2）干法装柱 取干燥层析柱，柱下端塞一小团脱脂棉并压紧；加入吸附[5]剂氧化铝，同时用木棒小扣击柱身，使之紧密匀称 ；柱高 5～ 6cm，上一略小于内径的滤纸片；（ 3）上样 将样品加于柱上，用木棒小扣击柱身，使之紧密匀称上面再盖一滤纸片，之后预备进行洗脱；（ 4）洗脱 先用滴管沿柱的四壁加少量石油醚于柱上， 待柱内石油醚液面接近吸附剂表面时，连续加入石油醚；[7]（ 5）接收流出液：浅黄绿色的 β - 胡萝卜素先向柱下移动，接收；至该浅黄 绿色带全部洗脱下来；更换另一种极性大的洗脱剂苯 ，用另一容器接收两色带间的杂质色带， 待红色的番茄红素开头滴出时， 更换另一干燥的锥形瓶接收至该组分全部洗脱下来；3. 鉴定：（ 1）取两种洗脱液各几滴，用三氯化锑试剂鉴定；（ 2）薄层层析a. 薄层板的制备 b.点样 c.绽开 , 绽开剂 A、B 两种绽开剂 A：环己烷（极性小）绽开剂 B：苯 - 环己烷 〔1 ∶ 9〕 （极性较大）d. 去处 e. 画出溶剂前沿 f. 运算比移值绽开剂样品 Rf环己烷 苯- 环己烷 〔1 ：9〕番茄红素β - 胡萝卜素提取液斑点 1斑点 2 第 2 页，共 4 页 - - - - - - - - -名师归纳总结 精品word资料 - - - - - - - - - - - - - - -学习必备 欢迎下载四、试验装置图..图一：提取 图二：分别 图三：绽开剂 A 图四：绽开剂B留意事项：[1] 用乙醇先提取之目的是将番茄酱脱水，由于下步使用的提取剂二氯甲烷不与水混溶，故只有除去水后它才能有效地从组织中提取出类胡萝卜素；[2] 有机物过滤，因其不象过滤无机物那样简单，故常用折叠滤纸过滤；[3] 装柱是关键，柱装不好会使样品洗脱时参差不齐，分别成效不好；操作时防止吸入氧化铝或硅胶的粉尘；[4] 洗脱时， 不能让空气进入柱内， 否就会影响分别成效； 石油醚是易燃液体应远离火焰；[5] 样品浓度不能过稀，否就薄层层析时的颜色会很浅，不利于观看样品斑点；[6] 点样时样品点布局要符合要求，否就易显现边缘现象和样品绽开时相互扩散而纷乱， ；[7] 绽开时层析缸壁可贴几条沾有绽开剂的滤纸条，防止显现边缘现象；另外也要留意在绽开剂配制时，勿混入其它试剂，如水等；[8] 如观看荧光，留意勿过多吸入溶剂蒸气；时间长，会观看不到荧光；荧光物质不肯定是被分别物质，可能会有其它荧光点；摸索题1 ．为何用饱和 NaCl 溶液萃取，萃取目的是什么 .2. 用柱层析法分别番茄红素和 β - 胡萝卜素开头不用石油醚而直接用苯洗脱是否可以？3 ．为什么番茄红素与 β - 胡萝卜素相比，在柱层析中移动较慢， Rf 值较小 .4 ．番茄红素与 β- 胡萝卜素薄层层析时，在环己烷和苯 - 环己烷（ 1： 9）中分别绽开的结果，它们的 Rf 值有何不同？从两种物质结构上能否判定哪个极性大些 . 第 3 页，共 4 页 - - - - - - - - -名师归纳总结 精品word资料 - - - - - - - - - - - - - - -学习必备 欢迎下载教学 目 的及 要 求教学重点 与 难 点1. 明白萜类物质的提取分别方法；2. 学习结构相像的两种物质的提取、分别方法；3. . 把握柱层析、薄层层析的技术原理和应用以及回流、萃取和干燥等试验技术；重点： 1. 柱层析、薄层层析的原理和技术及应用2 结构相像的两种物质的提取、分别方法；教学手段 讲授、演示和现场指导相结合教材 有机化学试验，丁长江主编，科学出版社， 2006；课后小结本试验第一次采纳柱层析对自然化合物进行分别，并用薄层层析进行鉴定；讲清它们的优缺点和相宜分别的化合物；结合以前学过的学问帮忙同学准时地总结用来分别的方法及适应的范畴； 第 4 页，共 4 页 - - - - - - - - -。