寄生虫实验指导.docx

人体寄生虫学部分第1部分 医学蠕虫（Medical helminthes ）第1单元 线虫（nematode）实验一、似蚓蛔线虫 CAscaris lumbricoides）（蛔虫 roundworm）一、 目的要求1. 掌握蛔虫卵（受精卵、未受精卵及感染期蛔虫卵）的形态特征2. 掌握常用的虫卵检查方法一一粪便生理盐水直接涂片法3. 熟悉蛔虫成虫的形态特点，并能区分雌虫和雄虫4. 观察病理标本，以深入了解蛔虫对人体的致病作用二、 实验内容（一） 标本观察（自学）1. 受精蛔虫卵（玻片标本）从大小、形态、颜色、卵壳结构和内含物等五个方面仔细观察虫卵呈宽 椭圆形，大小为45~75umX35~50um,卵壳厚，表面有一层凸凹不平的蛋白质膜, 新鲜粪便排出的虫卵常被宿主胆汁染成棕黄色，内含有一个大而圆、未分裂的受精 卵细胞，与卵壳之间形成半月形间隙，如粪便放置过久或者患者便秘，那么虫卵内 的半月形间隙可消失图1 — 12, 未受精蛔虫卵（玻片标本）虫卵呈长椭圆形或不规则形，大小为88~94u mX39~44ii m,卵壳和蛋白质 膜均较受精蛔虫卵薄，呈淡黄色，内含有许多大小不等的屈光颗粒图1 — 1。

3. 感染期虫卵（玻片标本）受精蛔虫卵在外界适宜条件下，经过一段时间卵壳内的卵细胞可发育成一 条卷曲的幼虫4. 脱蛋白膜受精卵（玻片标本）蛔虫卵排出体外后，由于摩擦等外力等因素作用，有时蛋白质膜会完全或 部分脱落，此时虫卵颜色变浅或无色透明，可见清晰的卵壳，仍较厚，常易与无色 透明的钩虫卵相混淆，观察时应注意显微镜光线不要太强5. 蛔虫头端结构标本（玻片标本）将蛔虫成虫切片后，卡红染色后呈粉红色低倍镜下观察，在虫体顶端口 孔周围可见有3个“品”字形排列的唇瓣，背侧的一个较大，唇瓣的内缘有细齿图1 — 2成虫图1 — 1 蛔虫卵（二）示教1. 雌雄成虫（大体标本）肉眼观察，新鲜虫体呈淡红色，死后或经福尔马林固定保存后呈灰白色成虫为线状、长圆柱状，中间稍膨大，两端逐渐变细，体表有■横纹和两条侧线, 形似蚯蚓，雌虫大小为20~35um,尾部尖直，雄虫大小为15〜31cm,后端向腹 部卷曲，有时可见2根交合刺图1 — 22. 雌雄成虫内部结构解剖标本（大体标本）观察体内生殖与消化器官肉眼观察可见，虫体体腔内除一条直的消化管 外，其余均为生殖器官，细长如线，迂回盘曲，并且雌性生殖系统为双管型，由卵 巢、输卵管、子宫、阴道和阴门等组成。

近端为子宫，两侧子宫会合为阴道，远端 为卵巢游离在原体腔内因此，蛔虫的产卵量非常大，繁殖能力相当强雄性生殖 器官为单管型：由睾丸、储精囊、输精管、射精管和交合刺等组成，游离端为睾丸3. 蛔虫横切面染色标本（玻片标本）观察下列结构：体壁：表皮为角皮层，其下为皮下层和纵肌层，皮下层伸 入原体腔内并增厚，背腹及两侧分别形成四条纵索肠管：肠壁由单层柱状上皮细 胞组成原体腔：即体壁和消化道之间的腔隙，腔内充满液体，内部器官，如生殖、 消化器官浸浴其中4. 蛔虫性机械性肠梗阻（病理标本）可见较多蛔虫扭结成团，完全或部分阻塞肠道5. 胆道蛔虫症（病理标本）肝门胆管内嵌塞有1条蛔虫6. 蛔虫性肠穿孔（病理标本）可见蛔虫穿透患者肠壁7. 蛔虫钻入阑尾（病理标本）可见蛔虫钻入阑尾三）操作1. 粪便直接涂片法查虫卵（操作）1） 材料：生理盐水，载玻片，盖玻片，棉签棍或牙签，2） 方法：滴一滴生理盐水于洁净的载玻片，用棉签棍或牙签挑取绿豆大小的 粪便块，在生理盐水中涂抹均匀；涂片的厚度以透过涂片约可辨认书上的字迹为宜, 加盖玻片一般在低倍镜下查到蛔虫卵，换用高倍镜观察应注意虫卵与粪便中异 物的鉴别虫卵都具有一定形状和大小；卵壳表面光滑整齐，具固有色泽；卵内含 卵细胞。

3）注意：① 粪便量要适中粪便过多，则涂片太厚不利于观察；粪便太少，则涂片薄影响检出率制好的涂片以透过水膜能隐约看到课本的字体为适宜② 粪便中含有各种植物细胞，酵母菌、花粉、植物纤维和未完全消化的食物残渣等，容易与虫卵混淆，必须注意鉴别③ 制好的涂片不能干燥，否则不易辨认虫卵2. 浓聚法A清水沉淀法（示教）1） 原理：原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底，有助于提高检出率2） 材料：小烧杯，铜筛（或塑料纱网），大试管3） 方法：取粪便约5〜10克置小烧杯内，加水少许，用玻璃棒搅成糊状，并加水 稀释倒入铜筛（或塑料纱网）内过滤，滤去粪渣，并把滤液倾入大试管内，加水 至将满静置10〜15分钟倾去上层液4/5,留粪渣，加水，静置5 — 10分钟, 如此换水数次，直到上清液澄清为止，最后倾去上层液体，吸取沉渣镜下检查B离心沉淀法：（示教）将上述滤去粗渣的粪液离心（1500~2000rpm/min） 1~2分钟，倒去上液，注 入清水，再离心沉淀，如此反复沉淀3〜4次，直至上液澄清为止，最后倒去上液, 取沉渣镜检3. 厚涂片透明法（改良加藤法）（示教）：1）材料：定量板及刮棒；100目尼龙或金属筛网片（大小约4X4cm）；亲水玻璃纸 条（约5.2X2. 6cm）,浸泡于甘油孔雀绿液（3 %孔雀绿1ml,甘油50ml,水49ml） 中过夜后用；压板（厚玻璃或有机玻璃制品，大小为5X3cm,可连续使用）；载玻 片及显微镜。

2）操作步骤① 滤取粪便：将筛网覆盖在送检标本上，自筛网上用刮棒刮取挤溢到网面上的粪便② 模板取样：将定量板放在载玻片上，使小边突紧贴玻片的一边，用一手的两指压住定量板的一端，将刮棒上取得的粪便填满模孔，刮去多余部分, 然后自一端掀起定量板，再松开压住的两指把板取去，玻片上即留 下二个长条形粪样③ 盖纸压片：在粪条上覆盖含孔雀绿甘油液的玻璃纸条，展平后用压板加压，粪样即在玻璃纸与载玻片间铺开成长椭圆形，小心取下压板（一指固定 压板外的玻璃纸的一端，另一手平拖移去压板，以免玻璃纸与压板同 时揭起）O④ 透明读片：约1〜2小时粪膜透明后即可读片钩虫卵不宜透明过久图1 — 3粪便沉淀及毛蝴孵化法表1 — 1蠕虫卵及包囊的比重虫卵或包囊比重华支睾吸虫卵1. 170—1. 190姜片吸虫卵1. 190肝片形吸虫卵1.200日本血吸虫卵1.200带绦虫卵1. 140微小膜壳绦虫卵1.050钩虫卵1. 055—1. 080鞭虫卵1. 150蝶虫卵1. 105 〜1. 115受精蛔虫卵1. 110—1. 130未受精蛔虫卵1. 210—1. 230毛圆线虫卵1. 115—1. 130溶组织内阿米巴包囊1. 060—1. 070结肠内阿米巴包囊1.070微小内蜒阿米巴包囊1.065 〜1.070蓝氏贾第鞭毛虫包囊1.040 〜1.060表1 — 2各种蠕虫每条雌虫每日排卵数虫名产卵数/日/条（平均数）华支睾吸虫1600〜4000 (2400)姜片虫15000〜48000 (25000)卫氏并殖吸虫10000〜20000日本血吸虫1000〜3500猪带绦虫30000〜50000 / 孕节牛带绦虫97000〜124000 / 孕节十二指肠钩虫10000〜30000 (24000)美洲钩虫5000〜10000 (9000)蛔虫234000〜245000 (240000)鞭虫1000〜7000 (2000)（四）实验报告绘受精和未受精虫卵形态图。

要求：用平行线标注层次结构名称铅笔描绘，以点和线构成轮廓图，线条要平滑，不涂阴影，不涂彩色，注意用铅笔描形态和大小的比例，绘出特征郭俊杰）实验二、毛首鞭形线虫（Trichuris trichiura）（鞭虫 whipworm）一、 目的和要求1. 掌握鞭虫卵的形态特征2. 熟悉鞭虫成虫的形态特征3. 了解鞭虫对人体的致病作用二、 实验内容（一）标本观察（自学）1. 虫卵（玻片标本）先在低倍镜下观察，可见虫卵 较小，50-54P mX22-23um,纺锤 形或腰鼓形，黄褐色，卵壳较厚， 换高倍镜，可见卵壳两端各有一个 透明的塞状突起一盖塞，从粪便排 出的新鲜虫卵内含有一个受精卵细 胞图l-4o（二）示教1. 鞭虫成虫标本（大体标本）新鲜鞭虫呈肉红色，固定后为乳白色，外形似马鞭，前3/5细长，后2/5 粗短雄虫较小，长30〜45mm,尾部向腹面卷曲，雌虫较大，长35〜50mm, 尾端顿圆图1一42. 鞭虫寄生于肠壁（病理标本）10%甲醛固定，瓶装标本可见成虫以其细长的头端钻入肠壁粘膜层，粗 短的后部则游离于肠腔，由于成虫吸食宿主血液，故体内为黑褐色三）实验报告绘鞭虫卵形态图郭俊杰）实验三、十二指肠钩口线虫（十二指肠钩虫）（Ancylostoma duodenale）＞美洲板口线虫（美洲钩虫）（Necator americanus）一、目的和要求1. 掌握虫卵的形态特征。

2, 掌握钩虫卵的常用诊断方法一饱和盐水浮聚法2. 熟悉两种钩虫形态的鉴别要点3. 了解钩虫对人体的致病作用二、实验内容（一）标本观察（自学）1.钩虫卵（玻片标本）十二指肠钩虫卵与美洲钩虫卵 极为相似，不易区分先在低倍镜 较暗光线下找到椭圆形、无色透明 或淡黄色的虫卵，大小较蛔虫卵稍 小，为36〜40p mX56〜76u m,换 高倍镜观察，卵壳很薄，内含2~8 个卵细胞或多细胞期，若患者便秘 或粪便放置过久，虫卵细胞可继续 分裂为多细胞期，有时可见桑根期 2.丝状蝴（玻片标本）甚至含蝴卵卵壳与细胞间有明显 的空隙图1—5虫卵图1 — 5钩虫卵由于两种钩虫对人体的致病作用及地理分布存在差异，因此，有必要对二者进行鉴别两种钩虫的丝状蝴的鉴别要点见表1 — 3表1 — 3寄生人体两种钩虫丝状蝴的鉴别鉴别要点十二指肠钩虫美洲钩虫外形圆柱形，虫体细长，头端略扁平， 尾端较钝长纺锤形，虫体较短粗，头端略圆， 尾端较尖鞘横纹不显著显著口矛透明丝状，背矛较粗，两矛间距 宽黑色杆状，前端稍分叉，两矛粗细相 等，两矛间距窄肠管管腔较窄，为体宽的％,肠细胞颗粒丰富管腔较宽，为体宽的3/5,肠细胞颗粒少（二）示教1. 成虫（大体标本）成虫体长约1cm左右，半透明，肉红色，死后呈灰白色。

细长圆柱形，虫 体前端较细，顶端有■一发达的口囊，由坚韧的角质构成前端向背侧仰屈，雄 虫末端膨大形成交合伞，雌虫尾部尖细，十二指肠钩虫头部及尾部均向背面弯 曲，呈"C"形；美洲钩虫头部向背部弯曲，尾部向腹面弯曲，呈"S"形十 二指肠钩虫与美洲钩虫的形态鉴别要点见表1—42. 十二指肠钩虫口囊染色标本（玻片标本）十二指肠钩虫顶端有一发达的口囊，由坚韧的角质构成因虫体前端向背 面仰曲，口囊的上缘为腹面、下缘为背面十二指肠钩虫的口囊呈扁卵圆形， 其腹侧缘有钩齿2对，外齿一般较内齿略大，背侧中央有一半圆形深凹，两侧 微呈突起3. 美洲钩虫的口囊染色标本（示教）美洲钩虫口囊呈椭圆形其腹侧缘有板齿1对，背侧缘则有1个呈圆锥状 的尖齿表1—4寄生人体两种钩虫成虫的鉴别鉴别要点十二指肠钩虫美洲钩虫大小(mm)早：10-13X0. 6。