医药生产企业传递窗验证方案.doc

传递窗验证方案Validation protocol of the delivery windows编号Code：版本 Version：编写 Prepared by:日期Date:审核人 日期Reviewed by Data批准 Approved by:日期Date:变更记录Change Log版本号 Version变更描叙Description变更细节Section changed批准日期 Release Date目录Contents1简介 42 实施计划 43 验证小组成员 44 仪器及用具 45 菌株和培养基 56 安装确认 57 运行确认 58 性能确认 69 再验证 810修改事项 811 相关 SOP 812附件 81 简介传递窗是一种洁净室的辅助设备，主要用于洁净区与洁净区之间，洁净区与非洁净区 Z间小件物品的传递，以减少洁净室的开门次数，使洁净室的污染降低到最低程度传递窗内安装有紫外灯，物品经紫外线照射消毒后进入洁净区紫外线是一种电磁辐 射，波长190〜350nm,其中以253. 7nm的杀菌力最强，可使DNA链上相邻症碱基Z 间形成二聚体，抑制DNA的复制，导致突变或死亡。

紫外线的杀菌力与紫外线强度、 照射时间、温度和湿度等因素有关本方案包括该设备的安装确认、运行确认和性能确认等内容在确认过程中出现任何 偏差，必须及时解决偏差之后再进行下一步的确认2 实施计划实施内容时间安排安装确认运行确认性能确认验证小组成员部门姓名职贲QA负责验证方案、验证报告的批准负责验证方案、验证报告的审核QC负责验证方案、验证报告的审核，指导和监督方案的实施负责验证方案、验证报告的起草，参加方案的实施负责验证方案、验证报告的审核，协助方案的实施4 仪器及用具名称型号或规格校验单位校验编号有效期细菌培养箱GNP-9270 型广州市计最所霉菌培养箱SHP-150 型广州市计量所数显式温湿度计DWS508D广州市计皐所紫外线强度测定仪TN-2254广州市计量所净化工作台HS-1300-V 型电动混匀器G560E移液器0.5 〜10ul移液器lOO-lOOOul:ru3名称批号生产厂家营养琼脂培养基改良马丁琼脂培养基营养肉汤培养基改良马丁培养基金黄色葡萄球[CMCC (B) 26003]枯草芽砲杆菌 [CMCC (B) 63501]大肠杆菌[CMCC (B) 44102]白色念珠菌[CMCC (F) 98001]6 安装确认由供应商技术人员作为主要安装人员，工程部人员协助安装。

安装过程中对装置及 其工作状态进行检杳若确认过程中发现因为紫外灯管不符合要求而造成偏茅，T. 程部人员负责紫外灯管的中购与更换将安装确认结果记录于附件1和附件2确认项H描叙丁•作环境确认传递窗应安装在非洁净区（培养室）与洁净区（洁净走廊）Z间非洁净区温度应为18°C〜27°C；相对湿度应为40%〜80%o电源确认设备的电源应正确连接，工作电源：AC （220+22） Vo装置确认确认紫外灯管功率紫外灯管应正常，无损坏，匹配，紧密连接传递窗侧门垫圈应配套、密合、完好传递窗内部与紫外灯管表面应清洁，表而无尘土传递窗内表面材质应为不锈钢，平整光洁耐磨备件确认是否有相同型号规格的紫外灯管备用7 运行确认运行确认在安装确认之品进行，若安装确认出现偏差，须在解决偏差Z后进行通 过对传递窗进行试运行，以证明设备备项技术参数和功能能达到木公司设定要求 将运行确认结果记录于附件3和附件47.1 SOP确认:确认是否有传递窗使用的SOP,作为传递窗使用操作的技术支持与指导 验证全过程必须严格按照此SOP对传递窗进行操作7.2 设备操作功能确认：逐项确认各项操作功能，结果均应符合要求7. 3 互锁确认：两侧门设有互锁装置，确保两侧门不能同时处于开启状态。

7.4 辐照强度测定：开启紫外灯5min后，用中心波长为253.7nm的紫外线强度测定仪 在灯管下方垂直中心操作面处测最其辐照度值(uW/cm2)0普通型或低臭氧型宜管 紫外灯,新灯管的辐照度值应为:功率10W, N65 uW/cnr ；功率15W, $145 uW/cm2 o使用中的灯管其辐照度值：功率10W, ^45 uW/cm2 ；功率15W, >100 uW/cm2 ,低于此值者应予以更换7.5 紫外强度分布：开启紫外灯5min后，在传递窗底部测量中央及四角5个位置的紫 外线强度(uW/cm2),确定紫外线强度最弱位置以紫外线强度最弱位置达到所需 照射剂帚的时间作为消毒合格时间洁净区非洁净区8 性能确认确认紫外灯对细菌及其芽抱和真菌的杀灭效果性能确认在运行确认Z示进行，若 运行确认出现偏差，须在偏差解决Z后进行8.1 培养基的制备8.1.1 营养琼脂培养基配方：营养琼脂培养基粉 31.0g纯化水 1000ml配制：称取营养琼脂培养基粉置适宜容器中，按配方比例加入纯化水，水浴加热 使溶解，调pH至7.1±0.2,分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌12rCxl5 分钟8.1.2 改良马丁琼脂培养基配方：改良马丁琼脂培养基粉 42.0g纯化水 1000ml配制：称取改良马丁琼脂培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解， 调pH至6.4±0.2,分装于适宜容器，置高压火菌器火菌I15°Cx20分钟。

8.1.3 营养肉汤培养基配方：营养肉汤培养基 20g纯化水 1000ml配制：称取营养肉汤培养基20克，加1000ml纯化水，加热溶解，加热至沸，冷却至常温，分装于适宜容器，置高压灭菌器火菌12TCX15分钟8.1.48.28.2. 18.1.1.2&LI.38.28.38.3.18.3.28.3.38.4改良马丁培养基配方：改良马丁培养基粉 28.0g纯化水 1000ml配制：称取改良马丁培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调 pH至6.4±0.2,分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115°Cx20分钟菌悬液的制备接种金黄色徜萄球菌和大肠杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中,30〜35°C培 养18〜24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中,23〜28°C培 养18〜24小时细菌芽砲悬液的制备：取枯草芽砲杆菌增菌液适最至营养琼脂培养基斜面，使菌液布满营养琼脂培养基 斜面，30〜35°C培养5〜7天用接种环取菌样少许涂于玻片上，固定后以改良 芽砲染色法染色，并在显微镜（油镜）下进行镜检当芽砲形成率达95%以上 时，即可进行以下处理否则，应在室温下放置一定时间，直至达到上述芽砲形 成率后再进行以下处理。

取适最无菌水于营养琼脂培养基斜面，以L棒轻轻推刮下菌苔吸出笫一批洗下 的菌悬液，再取适最无菌水于营养琼脂培养基斜面，重复洗菌一遍将第一和第 二批洗下的菌悬液集中于一含玻璃珠的无菌三角烧瓶内，振摇5min,打碎菌块, 使成均匀的芽砲悬液将芽砲液放于80°C水浴中10min （或60°C, 30min）,以杀灭残余的细菌繁殖体 待冷至室温后，保存于4°C冰箱中备用有效使用期为半年稀释液1%蛋白腺一PBS溶液：取磷酸二氢钾1.36g、磷酸氢二钠2.83g、蛋白腺10.0g, 加水1000ml,微温溶解,分装，置高压灭菌器121630分钟灭菌菌片的制备试验中使川的菌片是以菌液滴加于载体上制成（l.OcmX 1.0cm的不锈钢片）所 川载体染菌前应进行脱脂处理脱脂方法如下：①将载体放在含肥皂的水中煮沸 30min；②纯化水洗净；③纯化水点沸lOmin；④用纯化水漂洗至pll呈中性；⑤ 晾干备用载体经灭菌麻使用滴染法染菌将灭菌载体平放于灭菌平皿内，每个载体滴注 10ul菌悬液,用10ul移液器接灭菌塑料吸头，滴染菌液，并用接种环涂匀整个 载体表面滴染菌液示，染菌载体可置超净台上晾干示使川每个菌片的染菌量即冋收菌最应为1 X "〜5X If/5 cfu/片。

载体定最消毒试验8.4.1 取4种菌染菌载片各4个开启紫外灯5min后，将16个染菌载片平放于无菌平111L内，水平放于紫外线强度最弱的位置处照射，于4个不同间隔时间(15min、30 min> 45 min. 60min)各取出1个染菌玻片，分别投入4个盛有10ml稀释液 的试管中，用电动混匀器震荡20s或振打80次，洗脱载片上的菌体8.4.2 取洗脱液或其稀特液lml,作平板倾注细菌放30〜35°C培养48小时做活菌计 数，真菌放23〜2FC培养72小时做活菌计数8.4.3 阳性对照，除不做照射处理外，操作同上8. 4. 4 杀灭对数值计算杀灭对数值(KL)=对照组活菌浓度对数值-试验组活菌浓度对数值& 4. 5 消毒合格时间在照射强度故弱处，对细菌及其芽砲和真菌的杀火对数值$3所需的时间即为消 毒合格时间其它传递窗，确定授弱照射强度后，根据所需照射剂量确定消毒合 格时间照射剂量(uW • s/cm2 )=紫外线照射强度(uW/cm2) X时间(s) 将性能确认结果记录于附件59 再验证9.1 传递窗构造或紫外灯管安装位置发生改变时，需进行再验证9.2 若无任何改变或偏差时，每6个月对该系统进行紫外灯强度确认。

10 修改事项在实施过程中，如果方案需要修改，必须提交书面报告，阐述修改的原因、修 改的内容，并经过相关部门及QA的认可修改后的方案同先前执行的方案一 起归档11 相关SOP编号文件名称微生物实验室管理物品进出微生物检验室微生物检验区的清洁消毒培养基的配制细菌的接种、传代和保存高压灭菌微生物数量的测定12 附件编号附件名称附件1安装确认记录1(微生物室)附件2安装确认记录2 (无菌室)附件3运行确认记录1(微生物室)附件4运行确认记录2 （无菌室）附件5性能确认记录方案结束。