浅析减少食品微生物检验的干扰因素.doc

浅析减少食品微生物检验的干扰因素摘要：本文对如何减少食品微生物检验中干扰因索进行了分析关键词：食品微牛•物检验；十扰因素；引言：众所周知，现在是一个知识大爆炸的年代，人类对自身生存环 境的要求越来越高，尤其对食品安全的关注越来越多，也越来越高从事 食品检验的工作人员应该具备相应的知识和操作技能，增强食品安全意 识，能够本着为自己负责，为人类健康负责，具有热爱这一行业的良好态 度下血就工作中如何减少食詁微生物检验的干扰做下分析1 •贯彻无菌操作，防止人为污染1.1拥有健全的无菌实验室及相关管理制度无菌实验室使用前和使用后须用紫外灯（如为室内悬吊紫外灯，应为 30W,距操作平台1米左右）照射至少30mino杀菌后检验前，不得随意打 开无菌室事先将进无菌室操作所用工作服、发网，口罩、拖鞋等必需詁 放进无菌室缓冲间用紫外灯照射杀菌无菌室传递窗内也应紫外照射紫 外灯2周清洁一次，保持紫外线良好穿透力进入无菌室前，注意自身消 毒，用肥皂洗手及腕关节以上部位，用75%酒精喷洒手心手背及腕关节以 上部位，换好衣服，戴好发网和口罩，穿上拖鞋方可进入接种操作1・2准备器材开启紫外灯前，将无法干热和湿热灭菌的器材提前放入传递窗口紫外照射至少30mino吸管、平皿、药匙事先清洗好晾干，放入金属桶内，吸 管尖嘴朝下，实验操作时用手抽取吸管顶端，避免污染尖嘴；平皿倒置叠 放，便于烘干平皿内水分，杀菌效果更好，盖好桶盖，桶盖与桶身通气孔 对齐，放入干燥箱，于160- 170C,干燥l・5-2h,进行杀菌消毒。

干燥灭菌后，放置干燥箱内冷却临用前，把通气孔关闭，取出灭菌 桶，整理好后放到传递窗口每次从传递窗口递拿东西都要及时关闭窗口1・3准备药品及高压锅的使用冃前，多数无菌试验所用药品是脱水干粉状的，按照说明书上相关比 例配置，再分装，分装时注意瓶塞和试管塞用棉塞或带有通气孔的橡胶塞, 不用实木塞和不带通气孔的橡胶塞，否则高压灭菌时，锅内压力变化，使 容器内液体飞溅喷出，严重的造成锅的排气孔和排水管道堵塞，酿成事故 最后用纸包好容器口和塞子，扎紧高压灭菌锅的使用按说明书进行操作，灭菌时间和温度按药品说明书 设置，一般要求121C,高压灭菌15-20mino注意：（1）高压锅使用前添加蒸镭水，至加热管以上2cm左右，太少 会损坏加热管，且不能产生足够的蒸汽进行灭菌，当然也不能太多（2） 锅内物品堆放应有缝隙，否则蒸汽不能通过，影响灭菌；（3）灭菌时间长 短要适宜太短，不很好的杀菌消毒；太长，破坏某些药品成分特性，如 琼脂凝固性可能被破坏，影响药品使用，造成浪费；（4）加热后，及时排 放冷气至圧力降为0,关闭排气阀至达到灭菌所需温度再微微开启排气阀, 此时温度压力不会有很大变化冷气排除很重要，因空气膨胀压大于水蒸 汽膨胀压，水蒸汽中含空气，同压力下，含空气蒸汽温度低于饱和蒸汽温 度，影响灭菌；（5）灭菌结朿后，排气速度不能太猛，否则倒立发酵管内 易产生气泡，甚至锅内压力骤降，容器内药品压力大于锅内压力，产生压 力差而冲出容器，或沾染塞子而发生污染，影响鉴定；(6)高压灭菌后， 排气开盖，将冷却到60C左右的一药品取出，放进传递窗口。

琼脂类劳品， 放到45C恒温箱中，使之不凝固若棉塞脱掉或容器破损，应取出弃之采用高压灭菌原因：湿热蒸汽有潜热，灭菌效力强；菌体吸收水分， 降低凝固温度；湿热穿透力比干热大1・4采集样品1.4.1准备：根据所取样品类型和状态采取不同取样方法，取样工具 提前灭菌；戴好发网和工作帽，穿上灭菌工作服，手、指甲及腕部清洗后, 用50ppm次氯酸钠浸泡30s,清水冲洗干净，吹干，戴好橡胶手套，手套 口包住衣袖口，用75%酒精喷洒手心手背准备就绪开始取样要求：所取样品具有充分的代表性和一致性；整个过程必须无菌操作1・4・2过程：用经紫外照射，质量完好，干净卫生，未开封的PE袋装 置样品打开卩E袋，用手捏住袋子的外侧由里往外翻，把里面无菌的一 血翻到外血拿取样晶，将样品和袋了一起退出，样品装到袋子里面整个 取样过程，袋子内侧不能触及除样品之外的任何部位，否则污染袋子，影 响样品最后在袋子上做好标记，挤压出袋中的空气，打好结，放入特制 运输箱中，取表面样品一般用涂抹法，现常用涂抹棒，具体操作按照说明书进行 注意：不能上下晃动瓶体，否则打开瓶盖上的塞子后液体会从里面冒出； 塞子打开后不能反复关闭和打开，以防污染；取冋后，如不能及时检验， 应低温保存。

取空气落菌时注意，培养用琼脂耍提前培养24h,选用无菌平皿取 样时门窗要关闭，人员不能随便走动，空气静止沉降5mino标记好所取位 置，对角线的顶点要距离墙壁lm盖好平皿带冋实验室1・5接种样品或转移菌种一个宗旨：标记好名称，选好稀释度，所有操作坚持无菌进行进入 无菌室，待一切准备就绪后，点燃酒精灯，一切操作都要在酒精灯附近进 行1)接种样品时，从吸管桶取出的吸管及试管口都应该用酒精灯进行 灭菌，吸管尖嘴不能碰到除要吸取的样品之外的任何部位，以防污染吸 取菌液或样品时，耍用吸球，不耍用嘴吹吸，避免口腔内的细菌和样品相 互污染；吸管吸取的样液一定要准确；(2)转种细菌验证时，接种环和接 种针都应在接种之前用酒精灯外焰充分灼烧裸漏的金属部位，杀菌之后才 可以接种接种样品和转种细菌最好不要在同一个无菌室内进行操作，应各自拥 有专门的无菌室这样就可以避免二者相互影响1. 6倾倒琼脂将装有琼脂的三角瓶口在火焰上烤一下，倾倒15-20山1左右的琼脂于 平皿内菌液与琼脂尽量混匀，一般顺时针转3下，逆时针转3下，前后 左右晃一下，尽量不要将琼脂晃到平皿壁上，待琼脂凝固后，及时将平皿 倒置，放丁温度合适的恒温培养箱中培养。

1・7药品的存放剩余药品，短时间内再用到的，低温保存，用前要做空白实验这就要求我们在配药之前要算好药品用量，避免浪费和不足，坚持现用现配1.8无菌室的整理及污物的处理1.8.1实验结朿后，用银子夹住无水酒精棉球，点燃后擦拭桌面，或 用2%-3%煤酚皂溶液擦拭地面清理好，关门，打开紫外灯，照射30mino1.8. 2污染的吸管和平皿须经5%的煤酚皂或石炭酸溶液浸泡24h；染 色玻片可直接冲洗，冲洗液要用烧杯或三角烧瓶盛放，再浸泡在5%煤酚皂 24h,煮沸洗涤，冲洗液和泡好的器材及培养物用121C, 30min高压灭菌; 凝集试验用的玻片或平皿需高压灭菌后洗涤；其它被污染的物品也应高压 灭菌后洗涤1・9做好原始记录，善于总结和分析严格按照国家或行业标准进行检测，每一步的结果和样詁名称都应该 做好原始记录，方便总结和查找原因2•结语：食品检验工作者，工作中要保持一颗探究的心态，在检验过 程中不断思考，不断总结，详细查阅相关文献，进一步验证，解决疑问 耍在探究中成长，不断提高自身的良好素质和基木技能时刻端正好态度, 拥有强烈的责任感，正确意识到身上肩负着关乎人类身体健康的重任不 断分析总结减少食品微生物检验的干扰因索。

参考文献[1]郭娟，韩朗有关食品微生物检验注意事项的探讨[J]•科技风杂志，2008, 10 （下）：66.。