USP 35 401脂肪和固定油.docx

<401> 脂肪和固定油 （节选）下述定义和通用步骤适用于脂肪、固定油、蜡、树脂、香脂和相似的物质样品制备如果一种油样品显示了浊度是由于分离的硬脂酸，在50C水浴中加热容器直到油变得 澄清，或者如果油加热后仍不能变澄清，使其通过热水套管内的漏斗上干燥滤纸充分混合， 同时称量多次测定所需的多份样品，建议使用有移液滴管的瓶子，或一个称量滴定管如果 在室温时是固体，保持样品熔化，直到取得所需份数的样品比重脂肪或油的比重测定按照比重法<841>熔化温度熔化温度的测定按照Class II物质（见熔距或熔化温度<741>）酸价（游离脂肪酸）药典中脂肪和固定油的酸性可用中和10.0g物质中的游离酸所需0.1N碱的ml数来表 示酸性常常用酸价来表现，即中和1.0g物质中游离酸的氢氧化钾的mg数除非在各论 中另有规定，使用方法 I方法I步骤-除非另有规定，取约10.0g物质，精密称定，溶解在50ml等量乙醇和乙醚的混合 物的烧瓶中（除非另有规定，用0.1N氢氧化钾或0.1N氢氧化钠对中和至酚酞呈中性）如 果待测样品不能溶于冷的溶剂中，用合适的冷凝器连接烧瓶缓慢加热，一边频繁振摇烧瓶 直到样品溶解加入1ml酚酞试液，用0.1N氢氧化钾滴定液或0.1N氢氧化钠滴定液进行 滴定，直到溶液在振摇3秒后仍显淡粉色。

根据适用情况，计算酸价或中和10.0g样品（游 离脂肪酸）所需0.1N碱的体积按下式计算酸价：56.11VxN/W其中，56.11是氢氧化钾的分子量；V是体积，单位ml； N是氢氧化钾或氢氧化钠溶液的当量浓度；W是样品的质量，单位go如果滴定所需的0.1N氢氧化钾VS或氢氧化钠VS 的体积小于2ml，可用稀释的滴定液，或者样品大小可做相应的调整结果可用消耗滴定液 的体积或等量0.1N氢氧化钾或氢氧化钠的体积来表示如果出于保存的目的，油可用二氧化碳饱和，滴定前缓慢回流乙醇-乙醚溶液10mi n在称 量测试样品前，油可通过放置在浅碟在真空干燥器中24h除去二氧化碳方法 II步骤-制备含有等量异丙醇和甲苯的溶剂混合物125ml使用前，加入2ml1%的酚酞溶 液，并用碱进行中和至显淡粉色但是不会褪去精确称量下表中合适量混合均匀的液体样品， 溶解于中性溶剂混合物中如果待测样品不能溶于冷的溶剂中，用合适的冷凝器连接烧瓶缓 慢加热一边剧烈振摇一边用0.1N氢氧化钾VS或0.1N氢氧化钠VS滴定至首次出现与未 混合样品前中性溶剂相同的不会褪去的粉红色酸价0-1样品质量（g）20102.50.50.11-44-1515-74.9>75.0过氧化值过氧化值是1000g物质中含有的过氧化物的量，以活性氧的毫当量数来表示。

[注：此测试 需在取样后立即进行以防止样品氧化 ]步骤-除非另有规定，取约5g样品，精密称定，放入有毛玻璃塞的250ml锥形瓶中加入 30ml冰醋酸和氯仿的混合物（3:2）,振摇溶解，加入0.5ml饱和碘化钾溶液振摇1min, 并加入30ml水用0.01N硫代硫酸钠滴定液进行滴定，一边振摇一边缓慢加入滴定液，直 到黄色几乎消失加入 5ml 淀粉试液，继续滴定，剧烈振摇，直到蓝色消失在相同条件 下，进行空白测定[注:空白测定中使用的滴定液的体积不得超过0.1ml]按下式计算过 氧化值：[1000（VT-VB）N]/W其中，VT和VB分别是实际测定中和空白测定中消耗的0.01N硫代硫酸钠的体积，单位ml； N是硫代硫酸钠的精确的当量浓度；W是测试用样品的质量，单位go不皂化物油或脂肪的项目“不皂化物”，涉及到那些由碱性氢氧化物不能皂化但是在普通的脂肪溶 剂中可溶的物质，以及可溶于此类溶剂中的皂化产物步骤-取油或脂肪样品约5.0g，精密称定，置于250ml锥形瓶中，加入50 ml氢氧化钾 乙醇溶液，该溶液由12g氢氧化钾溶于10ml水并用乙醇稀释至100ml制的，接上合适的 回流冷凝管，置于蒸汽浴中加热回流l h,不断搅拌。

冷却至25°C以下，转移入装有聚四氟 乙烯活塞的分液器中，用两份50ml的水对锥形瓶进行润洗，洗液转移至分液器中（活塞上 不能涂油脂）用3份100ml的乙醚进行萃取，合并乙醚萃取物至另一个含有40ml水的分 液器中轻微转动或振摇几分钟分液器［注-剧烈搅动可能会导致难以分离的乳化剂的形成.］ 放置使混合物分层，弃去下面的水相用两份40ml的水对乙醚萃取物进行润洗，弃去下面 的水相用40ml氢氧化钾溶液（3/100）和40ml水洗乙醚混合物重复上述氢氧化钾溶液- 水洗步骤3次用40ml水洗，直到最终的洗脱物加入2滴酚酞试液后不会变红将乙醚萃 取物放入去皮重的烧瓶中，用10ml乙醚润洗分液器，润洗液转入烧瓶中在蒸气浴中蒸发 乙醚，并向残留物中加入6ml丙酮气流除去丙酮，105C干燥残留物，直到两次称量之差 不超过1mg按下式计算不皂化物在油或脂肪样品中的百分比：100（WR/WS）其中，WR是残留物的质量，单位g； WS是待测油或脂肪的质量，单位go将残留物溶于20ml已预先中和至酚酞终点的乙醇中，加入酚酞试液，并用0.1N氢氧 化钠醇滴定液进行滴定，至首次出现粉红色并保持不少于30s如果所需0.1N氢氧化钠醇 滴定液的体积小于0.2ml，液层分离是不完全的；称量的残留物不能被认为是不皂化物，测 试需重复进行。

脂肪酸的组成标准溶液-制备各论中已知含有酯类组成的酯类混合物这一标准溶液可能含有其他成 分［注-酯类混合物的市售产品来自 Nu-Chek-Prep, Inc., PO. Box 295, Elysian, MN 56028b 此测试中典型的Nu-Chek-Prep酯类混合物包括Nu-Chek 17A和Nu-Chek 19A］Nu-Chek 混合物17A有以下组成：百分比脂肪酸酯碳链长度双键数1.0肉豆蔻酸甲酯1404.0棕榈酸甲酯1603.0硬脂酸甲酯1803.0花生酸甲酯2003.0山萮酸甲酯2203.0木蜡酸甲酯24045.0油酸甲酯18115.0亚油酸甲酯1823.0亚麻酸甲酯18320.0芥酸甲酯221Nu-Chek 混合物 19A 有以下组成：百分比脂肪酸酯碳链长度双键数7.0辛酸甲酯805.0甲基癸酸盐10048.0月桂酸甲酯12015.0肉豆蔻酸甲酯1407.0棕榈酸甲酯1603.0硬脂酸甲酯18012.0油酸甲酯1813.0亚油酸甲酯182样品溶液 -［注：如果样品中脂肪酸含有多于 2 个双键，用氮气吹扫以除去空气 ］取约 100mg 样品至 50ml 安装有合适水冷却回流冷凝管和一个磁力搅拌泵的的锥形瓶中。

加入 4ml 0.5N氢氧化钠甲醇溶液（将2g氢氧化钠溶于100ml甲醇中），并回流直到脂肪滴消失（通常5-10分钟）加入5ml溶液中（14g三氟化硼溶于甲醇定容至100ml，搅拌混合均 匀，回流2min）,通过冷凝管加入4ml色谱级正庚烷，回流1min冷却，移去冷凝管，加 入约15ml饱和氯化钠溶液，振摇，放置分层将正庚烷层通过0.1g无水硫酸钠（预先用 色谱级正庚烷洗过）至合适的烧瓶中转移1.0ml该溶液至10ml容量瓶中，用色谱级正庚 烷稀释定容并混匀系统适用性溶液-分别称取约 20mg 硬脂酸、棕榈酸和油酸至安装有合适水冷却回流冷 凝管和一个磁力搅拌泵的的25ml锥形瓶中,按照样品溶液的步骤，从“加入5.0ml溶液……” 开始操作色谱系统（见色谱法＜621＞）-装有火焰离子化检测器的气相色谱仪，保持温度260C， 不分流进样系统，0.53-mmx30m熔融硅胶毛细管柱结合1.0pmG16相层色谱程序为进样 后柱温70°C保持2min,然后以5°C/min的速度升至240°C，保持5min进样口温度保持 在220 C载气为氦气，线速度为50cm/s色谱分析系统适用性溶液，按步骤记录峰响应值：相对保留时间为棕榈酸甲酯 0.87， 硬脂酸甲酯0.99，油酸甲酯1.0；硬脂酸甲酯和油酸甲酯之间的分离度不小于1.5；棕榈酸 和硬脂酸重复进样的峰面积RSD不大于6.0%。

重复进样的棕榈酸对于硬脂酸的峰面积比 率的 RSD 不大于 1.0%步骤-分别进样等量的（约1pl）标准溶液和样品溶液，记录色谱图，通过比较样品溶 液色谱图和标准溶液色谱图中这些峰的保留时间，确定样品溶液色谱图中的脂肪酸酯峰，并 测定样品溶液中所有脂肪酸酯峰的峰面积计算样品溶液中每种脂肪酸酯成分的百分比：100（ A/B）其中，A为每种脂肪酸酯成分的峰响应面积；B为样品色谱图中除了溶剂峰，所有峰面 积的和。