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细菌的接种和注意事项终极第一页，共三十三页优选）细菌的接种和注意事项终极版第二页，共三十三页第三页，共三十三页灭菌接种环灭菌接种环v1.要充分灭菌接种环，以免污染其标本 v2.要适当冷却再取标本，以免带不出标本中的菌种第四页，共三十三页第五页，共三十三页取标本取标本v1.蘸取标本时应适量，以免标本蘸取标本时应适量，以免标本太少漏检太少漏检v2.液体标本，如尿液，应注意混液体标本，如尿液，应注意混匀第六页，共三十三页接种接种1.细菌的接种方法有很多，如平板划线法、斜面接种法、穿刺接种法，等等但我们用的最多的是：平板划线法意义指把混杂在一起的微生物，用接种环在平板培养基表面，通过分区划线，稀释得到较多的独立分布的单个菌落，即将样本在固体培养基表面多次做由点到线稀释而达到分纯的目的第七页，共三十三页一区：所占区域大约是平板面积一区：所占区域大约是平板面积的的1/51/4二区：由一区向二二区：由一区向二区带出三四条平行区带出三四条平行线线三区：由二区引出三四次，但三区：由二区引出三四次，但 三区面积最大三区面积最大第八页，共三十三页第九页，共三十三页vCO2在细菌培养中在细菌培养中的意义的意义第十页，共三十三页。

v1有些细菌在初次分离培养时，需要有些细菌在初次分离培养时，需要5-105-10的的CO2CO2因为因为细菌在生长过程中能够分解培养基中的某些细菌在生长过程中能够分解培养基中的某些含氮物质产生氮，对该菌有杀灭作用，而含氮物质产生氮，对该菌有杀灭作用，而CO2能能中和细菌产生的氮，以减少对细菌的毒性如脑中和细菌产生的氮，以减少对细菌的毒性如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、牛布鲁菌等膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、牛布鲁菌等 v2.为细菌提供碳源，促进细菌的生长如肺炎链球为细菌提供碳源，促进细菌的生长如肺炎链球菌，草绿色链球菌菌，草绿色链球菌在细菌室的培养箱上有一个在细菌室的培养箱上有一个CO2的的开关，为什么要用开关，为什么要用CO2呢？呢？第十一页，共三十三页常见细菌的鉴别及其特点常见细菌的鉴别及其特点第十二页，共三十三页阳性球菌葡萄球菌-金黄色葡萄球菌第十三页，共三十三页金葡特点是人类化脓性感染最常见的病原菌，是人类化脓性感染最常见的病原菌， 可以引起局部感染，也可以引起全身感染可以引起局部感染，也可以引起全身感染血浆凝固酶，阳性血浆凝固酶，阳性血平板上呈黄色菌落，大而凸起，表血平板上呈黄色菌落，大而凸起，表 面光滑，有面光滑，有溶血环。

溶血环G+阳性球菌，葡萄状排列，无芽孢，无荚阳性球菌，葡萄状排列，无芽孢，无荚膜1.2.3.4.第十四页，共三十三页葡萄球菌-表面葡萄球菌第十五页，共三十三页表葡特点正常存在于人体皮肤、黏膜表面，多见正常存在于人体皮肤、黏膜表面，多见于院内感染，如体内异物留置，静脉导于院内感染，如体内异物留置，静脉导管等管等血浆凝固酶，阴性血浆凝固酶，阴性表葡形态同金葡相似，但是为白色、扁平表葡形态同金葡相似，但是为白色、扁平菌落，无溶血环菌落，无溶血环1.2.3.3.第十六页，共三十三页链球菌 常见的链球菌主要有化脓性链球菌、草绿色链常见的链球菌主要有化脓性链球菌、草绿色链球菌、肺炎链球菌球菌、肺炎链球菌 根据抗原结构不同可以把链球菌分为根据抗原结构不同可以把链球菌分为A A、B B、C C、D D等二十个群，但对人类有致病性的大多数属于等二十个群，但对人类有致病性的大多数属于A A群，少量属于群，少量属于B B群第十七页，共三十三页根据在血平板上溶血分为以下三种：根据在血平板上溶血分为以下三种： 甲型（甲型（型）溶血性链球菌，又称草绿色链球型）溶血性链球菌，又称草绿色链球菌，菌落周围有草绿色溶血环，致病力弱，是条件菌，菌落周围有草绿色溶血环，致病力弱，是条件致病菌。

致病菌 乙型（乙型（型）溶血性链球菌，产生强烈的溶血型）溶血性链球菌，产生强烈的溶血毒素，在血平板上可使菌落周围出现毒素，在血平板上可使菌落周围出现2 24mm4mm的无色的无色透明溶血环透明溶血环 丙型（丙型（r-）链球菌，菌落周围无溶血环，又叫不）链球菌，菌落周围无溶血环，又叫不溶血性链球菌，通常不致病溶血性链球菌，通常不致病 第十八页，共三十三页肺炎链球菌菌落特点菌落特点：在血平板上：在血平板上0.51.5mm,灰白色半透明，灰白色半透明，表面光滑，扁平，周围环绕表面光滑，扁平，周围环绕草绿色溶血环，培养放置草绿色溶血环，培养放置24h以上的菌落，还会因为以上的菌落，还会因为产生自溶酶的作用，而致菌产生自溶酶的作用，而致菌落中央塌陷而边缘隆起，呈落中央塌陷而边缘隆起，呈脐窝状第十九页，共三十三页肺炎链球菌、群、群的区分肺炎链球菌、群、群的区分： pt试验试验抑菌环抑菌环14, 鉴定为肺链鉴定为肺链杆菌肽试验杆菌肽试验群群CAMP试验试验B群群第二十页，共三十三页Opt实验第二十一页，共三十三页杆菌肽实验第二十二页，共三十三页11第二十三页，共三十三页葡萄球菌与链球菌的鉴别：1.涂片涂片革兰染色，葡萄球菌呈葡萄串样，链球菌呈链状。

2M-H试验当染片不能区别时，接种到M-H平板，长成菌落之后，可挑单个菌落做触酶试验，+是葡萄球菌，是链球菌第二十四页，共三十三页肠球菌肠球菌属特点：肠球菌属特点：+，成圆球形或椭圆形，单个，成，成圆球形或椭圆形，单个，成对，或短链，均可对，或短链，均可在血平板上可形成灰白色不透明表面光滑，在血平板上可形成灰白色不透明表面光滑，0.51.0mm大小的菌落，可有溶血现象大小的菌落，可有溶血现象第二十五页，共三十三页以粪肠球菌和屎肠球菌为常见： 阿拉伯糖阿拉伯糖 山梨醇山梨醇屎肠球菌屎肠球菌 阳性阳性 阴性阴性粪肠球菌粪肠球菌 阴性阴性 阳性阳性 第二十六页，共三十三页阴性杆菌大肠杆菌：G-杆菌，有鞭毛、菌毛，无芽胞菌落23mm,圆形凸起，灰白湿润，光滑半透明，边缘整齐某些菌落可产生有透明溶血环第二十七页，共三十三页鲍曼不动杆菌菌落特点：菌落特点：圆形、凸起光滑、边缘整圆形、凸起光滑、边缘整齐不透明、灰白色齐不透明、灰白色有粘性的菌落有粘性的菌落多数菌落不溶血多数菌落不溶血在中国兰上为粉红色菌在中国兰上为粉红色菌落落第二十八页，共三十三页菌落特点菌落特点：较大菌落、凸起、灰白色黏液型、相邻菌落容易发生融合可挑出长丝状细丝肺炎克雷伯杆菌肺炎克雷伯杆菌第二十九页，共三十三页。

变形杆菌迁徙生长迁徙生长菌落特点菌落特点：G-，两边钝圆，有明显的多形性，呈球形或丝状，无芽胞无荚膜，有鞭毛，运动活泼普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株呈迁徙扩散生长，迅速弥漫波纹状薄膜布满整个培养基表面第三十页，共三十三页嗜麦芽假单胞菌菌落特点：菌落特点：G-杆菌，细长略弯杆菌，细长略弯曲不透明，灰黄曲不透明，灰黄色菌落，在血平板色菌落，在血平板上可产生氨味本上可产生氨味本菌氧化酶阴性，与菌氧化酶阴性，与大多数假单胞菌不大多数假单胞菌不同第三十一页，共三十三页在普通琼脂培养基上在普通琼脂培养基上能产生水溶性绿色素，能产生水溶性绿色素，使整个培养基变为绿使整个培养基变为绿色色l菌菌落落灰灰绿绿色色、半半透透明明、大大而而扁扁平平、表表面面湿湿润润、边边缘缘不不齐齐；有有金金属属光光泽泽；有有生生姜姜样样芳芳香香气气味味；菌菌落落周周围围有有宽宽大大的的兰兰绿绿色色透明溶血环透明溶血环铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌第三十二页，共三十三页流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌在巧克力平板上生长，菌落为灰白色，扁平，半透明的小菌落第三十三页，共三十三页。