沉降菌碟暴露时间验证方案.docx

沉降菌碟暴露时间验证文件验证项目验证文件验证方案编号 验证报告编号验证证书编号 w 恤一"曰 Igsl，川

3、 验证组织组长：彭伟添组员：陈杰辉，黄玉妍五、菌种及培养基1、菌种金黄色葡萄球菌【CMCC (B) 26003】、铜绿假单胞菌【CMCC (B) 10104】、枯草芽抱 杆菌【CMCC (B) 63501】、生抱梭菌【CMCC (B) 64941】、白色念珠菌【CMCC (F) 98001】2、 培养基营养肉汤培养基、改良马丁培养基、硫乙醇酸盐流体培养基、大豆酪蛋白琼脂培养 基3、 无菌检验仪器及相关设备无菌室、净化工作台、恒温培养箱(30〜35°C)、生化培养箱(23〜28°C)、高压蒸 汽灭菌器、电子天平、电冰箱、电热干燥箱、玻璃器皿六、菌液制备接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养 基中培养 18〜24 小时；接种生抱梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中培养 18〜24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，培养24〜48小时； 上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100cfu的菌悬液菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2 〜 8 C ，可在2 4小时 内使用七、验证方法1、取配制好的沉降碟32个，同时灭菌后，取16个沉降碟，每3个分别接种小于 100 cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌、生抱梭菌、白色念珠菌， 另一个不接种作为空白对照，置30C〜35C培养3天，逐日观察结果。

2、把灭菌后的沉降碟 16 个放置在无菌检查时的超净洁净台上暴露 4 小时后，每 3 个分别接种小于 100 cfu 的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、 白色念珠菌，另一个不接种作为空白对照，置30°C〜35°C培养3天，逐日观察结果八、回收率计算供试品组各的菌回收率（％）二供试品组菌数；样品本底菌数xioo% 验证加菌数九、结果判断1、 暴露前试验组的菌回收率应不低于 70%暴露 4小时后试验组的菌回收率应不低 于 70%2、 若暴露前试验组的菌回收率应不低于 70%，说明加入的培养基能满足微生物生长， 若暴露后试验组的菌回收率应不低于 70%，说明培养皿暴露 4 小时后，培养基仍能满足 微生物生长，3、 若任一次试验中试验组的菌回收率低于 70%，应采用增加培养基，降低暴露时间， 并重新进行方法验证，使试验组菌回收率大于 70%十、验证结果和记录（附后）十一、验证报告（附后）十二、验证证书（附后）沉降碟暴露时间验证报告编号：20 年 月 日至 20 年 月 日，验证小组根据批准的 “YZ-13580-1号”验证方案，对沉降碟的暴露时间进行验证，结果试验组 的菌回收率均符合规定。

通过验证，证明沉降碟的暴露时间可以达到4小时 验证小组：20 年 月 日沉降碟暴露时间验证合格证书编号：经审核，“XXX ”验证方案合理，验证结果符合规定要求，特此发给验 证合格证书，沉降碟的暴露时间可以达到4小时XX药业股份有限公司验证委员会（盖章）20 年 月 日沉降碟暴露时间验证记录细菌数、霉菌和酵母菌数检品名称沉降碟配制部门中心检验室检验依据《中国药典》2010年版附录检验日期：20 年 月 日报告日期 20 年 月 日验证方法取16个沉降碟，每3个分别接种小于100 cfu的金黄色葡萄 球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌、生抱梭菌、白色念珠菌， 另一个不接种作为空白对照，置30°C〜35°C培养3天菌种名称菌种代 数验证加菌数(cfu)样品本底菌 数试验组(样品+ 验证加菌数)回收率(%)金黄色葡萄球菌1金黄色葡萄球菌2金黄色葡萄球菌3铜绿假单胞菌1铜绿假单胞菌2铜绿假单胞菌3枯草芽抱杆菌1枯草芽抱杆菌2枯草芽抱杆菌3生抱梭菌1生抱梭菌2生抱梭菌3白色念珠菌1白色念珠菌2白色念珠菌3供试品组各的菌回收率(％)=供试品组菌数;样品本底菌数X100%检验人：复核人：沉降碟暴露时间验证记录细菌数、霉菌和酵母菌数检品名称沉降碟配制部门中心检验室检验依据《中国药典》2010年版附录检验日期：20 年 月 日报告日期 20 年 月 日验证方法取16个沉降碟，暴露4小时后，每3个分别接种小于100 cfu 的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌、生抱梭菌、白 色念珠菌，另一个不接种作为空白对照，置30°C〜35°C培养3天。

菌种名称菌种代数验证加菌数(cfu)样品本底菌 数试验组(样品+ 验证加菌数)回收率(%)金黄色葡萄球菌1金黄色葡萄球菌2金黄色葡萄球菌3铜绿假单胞菌1铜绿假单胞菌2铜绿假单胞菌3枯草芽抱杆菌1枯草芽抱杆菌2枯草芽抱杆菌3生抱梭菌1生抱梭菌2生抱梭菌3白色念珠菌1白色念珠菌2白色念珠菌3供试品组各的菌回收率(％)=供试品组菌数;样品本底菌数X100%检验人：复核人：。