17总砷测定的标准操作规程-完整版.pdf

1 目的 规范总砷测定的标准操作规程 2 范围 本标准规定了食品中总砷的测定方法 本标准第一、二法适用于各类食品中总砷的测定 3 责任 质量部组织制订、化验室负责实施 4 内容 4.1 依据： GB5009.11-2014 食品安全国家标准食品中总砷及无机砷的测定 4.2 第一法电感耦合等离子体质谱法 4.2.1 原理 样品经酸消化处理后，消解液经过雾化由载气（氩气）导入ICP 炬焰中，经过蒸 发、解离、原子化、电离等过程，大部分转化为带正电荷的正离子，经离子采集 系统进入质谱仪， 质谱仪根据其质荷比进行分离对于一定的质荷比， 质谱积分 面积与进入质谱仪中的离子数成正比，即样品中待测物的浓度与质谱积分面积或 质谱峰高成正比因此可通过测量质谱积分面积或质谱峰高测定样品中砷元素的 浓度 4.2.2 试剂和材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为优级纯，水为GB/T 6682 规定的一级水 4.2.2.1试剂 4.2.2.1.1硝酸（HNO3 ）:MOS级（电子工业专用高纯化学品） 、BV 级 4.2.2.1.2过氧化氢（ H2O2 ） 4.2.2.1.3质谱调谐液： Li 、Y、Ce 、Ti 、Co，推荐使用浓度为10 ng/ml 。

4.2.2.1.4内标储备液： Ge ，浓度为 100 Ug/mL xxxxx 有限公司 总砷测定的标准操作规程 编号 起草人日期 审核人日期 批准人日期 实施日期 第版文件密级 4.2.2.1.5氢氧化钠（ NaOH ） 4.2.2.2试剂配制 4.2.2.2.1硝酸溶液（ 2+98） ：量取 20 mL硝酸，缓缓倒入 980 mL水中，混匀 4.2.2.2.2硫酸溶液（ 1+9） ：量取硫酸 100mL ，缓缓倒入 900 mL 水中，混匀 4.2.2.2.3内标溶液 Ge 或 Y （1.0 ug/mL） ： 取 1.0mL内标溶液 , 用硝酸溶液（2+98） 稀释定容至 100mL 4.2.2.2.4 氢氧化钠溶液（ 100 g/L ） ：称取10 .0g 氢氧化钠，溶于水并用 水稀释至 100 mL 4.2.2.3.标准品 三氧化二砷（ As2O3 ）标准品：纯度 99.5% 4.2.2.4标准溶液配制 4.2.2.4.1砷标准储备液（ 100 mg/L，按 As计） ：准确称取于 100干燥 2h 的 三氧化二砷 0.0132g，加 1 mL氢氧化钠溶液（ 100 g/L ）和少量水溶解，转入 100 mL容量瓶中，加入适量盐酸调整其酸度接近中性，用水稀释至刻度。

4避光保 存，保存期一年或购买经国家认证并授予标准物质证书的标准溶液物质 4.2.2.4.2砷标准使用液（ 1.00 mg/L，按 As 计） ：吸取 1.00 mL 砷标准储备液 （100mg/L）于 100 mL容量瓶中，用硝酸溶液（ 2+98）稀释定容至刻度现用现 配 4.2.3 仪器和设备 注：玻璃器皿及聚四氟乙烯消解内罐均需以硝酸溶液（1+4）浸泡 24 h ，用水 反复冲洗，最后用去离子水冲洗干净 4.2.3.1电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS ） 4.2.3.2微波消解系统 4.2.3.3压力消解器 4.2.3.4 恒温干燥箱（ 50300） 4.2.3.5控温电热板（50200） 4.2.3.6超声水浴箱 4.2.3.7天平：感量为 0.1mg和 1mg 4.2.4 分析步骤 4.2.4.1试样预处理 4.2.4.1.1在采样和制备过程中，应注意不使试样污染 4.2.4.1.2 粮食、豆类等样品去杂物后粉碎均匀，装入洁净聚乙烯瓶中， 密封保 存备用 4.2.4.1.3 蔬菜、水果、鱼类、肉类及蛋类等新鲜样品，洗净晾干，取可食部分 匀浆，装入洁净聚乙烯瓶中，密封，于4冰箱冷藏备用。

4.2.4.2 试样消解 4.2.4.2.1 微波消解法 蔬菜、水果等含水分高的样品，称取2.0 4.0 g （精确至 0.001g）样品于消解 罐中，加入 5 mL硝酸，放置 30min；粮食、肉类、鱼类等样品，称取0.2 0.5g （精确至 0.001g）样品于消解罐中，加入5 mL硝酸，放置 30min，盖好安全阀， 将消解罐放入微波消解系统中， 根据不同类型的样品， 设置适宜的微波消解程序 （见表 1表 3） ， 按相关步骤进行消解， 消解完全后赶酸， 将消化液转移至25 mL 容量瓶或比色管中，用少量水洗涤内罐3 次，合并洗涤液并定容至刻度，混匀 同时作空白试验 表 1. 粮食、蔬菜、水果类试样微波消解参考条件 表 2. 乳制品、肉类、鱼肉类试样微波消解参考条件 步骤功率升温时间 / min 控制（）保持时间 / min 1 1200 W 1 00 % 5 120 6 2 1200 W 100 % 5 160 6 3 1200W 100 % 5 190 20 步骤功率升温时间 / min 控制（）保持时间 / min 1 1200 W 1 00 % 5 120 6 2 1200 W 100 % 5 180 10 3 1200W 100 % 5 190 15 表 3. 油脂、糖类试样微波消解参考条件 4.2.4.2.2高压密闭消解法 称取固体试样 0.20-1.0g （精确至 0.001g） ，湿样 1.0-5.0g （精确至 0.001g）或 取液体试样 2.00ml-5.00ml于消解内罐中，加入5 mL 硝酸浸泡过夜。

盖好内盖 旋紧不锈钢外套， 放入恒温干燥箱， 140-160保持 3-4 小时，自然冷却至室温， 然后缓慢旋松不锈钢外套， 将消解内罐取出， 用少量水冲洗内盖， 放在控温电热 板上与 120赶去棕色气体取出消解内罐，将消化液转移至25 mL容量瓶或比 色管中，用少量水洗涤内罐3 次，合并洗涤液并定容至刻度，混匀同时作空白 试验 4.2.4.3 仪器参考条件 RF功率 1550W ；载气流速 1.14 L/min ；采样深度 7 mm ； 雾化室温度 2 ； Ni 采样锥， Ni 截取锥 质谱干扰主要来源于同量异位素、多原子、双电荷离子等，可采用最优化仪 器条件、干扰校正方程校正或采用碰撞池、动态反应池技术方法消除干扰砷的 干扰校正方程为： 75As=75As77M(3.127) 82M(2.733) 83M(2.757) ； 采用内标校正、 稀释样品等方法校正非质谱干扰砷的m/z 为 75，选 72Ge为内标元素 推荐使用碰撞 / 反应池技术，在没有碰撞 / 反应池技术的情况下使用干扰方程消 除干扰的影响 4.2.4.4. 标准曲线的制作 吸取适量砷标准使用液 （1.00mg/L） ，用硝酸溶液 （2+98）配制砷浓度为 0.00 步骤功率/ % 温度/ 升温时间 / min 保温时间 / min 1 50 50 30 5 2 70 75 30 5 3 80 100 30 5 4 100 140 30 7 5 100 180 30 5 ng/ml 、1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10 ng/mL、50ng/L 和 100ng/L 的标准系列溶液。

当仪器真空度达到要求时， 用调谐液调整仪器灵敏度、氧化物、双电荷、 分 辨率等各项指标， 当仪器各项指标达到测定要求，编辑测定方法、 选择相关消除 干扰方法，引入内标，观测内标灵敏度、脉冲与模拟模式的线性拟合，符合 要求后，将标准系列引入仪器进行相关数据处理，绘制标准曲线、计算回归方 程 4.2.4.5 试样溶液的测定 相同条件下， 将试剂空白、 样品溶液分别引入仪器进行测定根据回归方程计算 出样品中砷元素的浓度 4.2.5 分析结果的表述 试样中砷含量按公式（ 1）计算： （ 1） 式中： X: 试样中砷的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）或毫克每升 (mg/L) ； C: 试样消化液中砷的测定浓度，单位为纳克每毫升（ ng/mL） ； C0: 试样空白消化液中砷的测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL） ； V: 试样消化液总体积，单位为毫升（mL ） ； m: 试样质量，单位为克或毫升 (g 或 mL) ； 1000：换算系数 计算结果保留两位有效数字 4.2.6 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 20% 4.2.7 其他 称样量为1g，定容体积为25ml 时，方法检出限为0.003mg/kg，方法定量限 0.010mg/kg。

4.3 第二法氢化物发生原子荧光光谱法 4.3.1 原理 食品试样经湿消解或干灰化法处理后，加入硫脲使五价砷预还原为三价砷，再加 入硼氢化钠或硼氢化钾使还原生成砷化氢，由氩气载入石英原子化器中分解为原 子态砷，在特制砷空心阴极灯的发射光激发下产生原子荧光，其荧光强度在固定 条件下与被测液中的砷浓度成正比，与标准系列比较定量 4.3.2 试剂和材料 注：除非另有说明， 本方法所用试剂均为优级纯， 水为 GB/T 6682 规定的一级水 4.3.2.1试剂 4.3.2.1.1 氢氧化钠（ NaOH ） 4.3.2.1.2氢氧化钾（ KOH ） 4.3.2.1.3硼氢化钾（ KBH4 ） ：分析纯 4.3.2.1.4 硫脲（CH4N2O2S） ：分析纯 4.3.2.1.5盐酸（HCl） 4.3.2.1.6硝酸（HNO3 ） 4.3.2.1.7 硫酸（H2SO4 ） 4.3.2.1.8 高氯酸（ HClO4 ） 4.3.2.1.9 硝酸镁（ Mg(NO3)2.6H2O ） ：分析纯 4.3.2.1.10 氧化镁（ MgO ） ：分析纯 4.3.2 .1.11抗坏血酸（ C6H8O6 ） 4.3.2.2 试剂配制 4.3.2.2 .1 氢氧化钾溶液（ 5g/L ） 。

称取 5.0 g 氢氧化钾，溶于水并稀释至1000 mL 4.3.2.2 .2 硼氢化钾（KBH4 ） 溶液 （20 g/L ） ： 称取硼氢化钾 20.0g， 溶于 1000mL 5g/L 氢氧化钾溶液中，混匀 4.3.2.2 .3硫脲+抗坏血酸溶液 : 称取 10.0 g 硫脲，加约 80mL,水, 加热溶解， 待冷却后加入 10.g 抗坏血酸 , 稀释至 100 mL现用现配 4.3.2.2 .4 氢氧化钠溶液（ 100g/L） 称取 10.0 g 氢氧化钠，溶于水并稀释至 100 mL 4.3.2.2 .5 硝酸镁溶液（ 150 g/L ） ：称取 15.0 g 硝酸镁，溶于水并稀释至100 mL 4.3.2.2 .6 盐酸溶液 (1+1) ：量取 100 mL盐酸，缓缓倒入 100 mL水中，混匀 4.3.2.2 . 7 硫酸溶液（ 1+9） ：量取硫酸 100 mL，缓缓倒入 900mL水中，混 匀 4.3.2.2 .8 硝酸溶液（ 2+98） ：量取硝酸 20 mL，缓缓倒入 980 mL水中，混匀 4.3.2.3标准品 三氧化二砷（ As2O3 ）标准品：纯度 99.5%。

4.3.2.4标准溶液配制 4.3.2.4.1砷标准储备液（ 100 mg/L，按 As 计） ：准确称取于 100干燥 2h 的三 氧化二砷 0.0132g，加 1 mL氢氧化钠溶液 （100 g/L ）和少量水溶解， 转入 100 mL 容量瓶中， 加入适量盐酸调整其酸度接近中性，用水稀释至刻度 4避光保存， 保存期一年或购买经国家认证并授予标准物质证书的标准溶液物质 砷标准使用液（ 1.00 mg/L ，按 As计） ：吸取 1.00 mL 砷标准储备液（ 100mg/L） 于 100 mL容量瓶中，用硝酸溶液（2+98）稀释定容至刻度现用现配 4.3.3 仪器和设备 4.3.3.1 原子荧光光谱仪 4.3.3.2 天平：感量为 0.1mg 和 1mg 4.3.3.3 组织匀浆器。