高中生物19个实验归纳.pdf

第 1 页 共 20 页 实验一：观察 DNA 、RNA 在细胞中的分布（必修一P26） 一实验目的：初步掌握观察DNA和 RNA在细胞中分布的方法 二实验原理 1甲基绿 +DNA 绿色 两种试剂不是单独使用，应混合使用 吡罗红 +RNA 红色 2 8%盐酸：改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色休中的 DNA和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合 0.9%NaCl溶液：保持口腔上皮细胞正常形态 蒸馏水：配制染色剂，冲冼载玻片 三方法步骤 操作步骤注意问题解释 取口腔上皮 细胞制片 载玻片要洁净，滴一滴质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液（生理盐水） 用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁 上轻刮几下取细胞 将载玻片在酒精灯下烘干 防止污迹干扰观察效果 保持细胞原有形态 消毒为防止感染，漱口避免取材失败 杀死并固定装片；烘干时应来回移 动，防止受热不均破裂 水解 将烘干的载玻片放入质量分数为8% 的盐酸（ HCl）溶液中，用30 0C水浴 保温 5min 改变细胞膜的通透性，加速染色剂 进入细胞 促进染色体的DNA 与蛋白质分离而 被染色，细胞为死细胞 冲冼涂片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S 洗去残留在外的盐酸 缓水流：防止细胞被冲走 染色 用吸水线除去多余的水分 滴 2 滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上 染色 5min 吸取染色剂除去多余的染色剂并盖上盖玻片 观察 先低倍镜观察：选择染色均匀、色泽 浅的区域，移至视野 中央，调节清晰 后才换用高倍物镜观察： 使观察效果最佳 现象 细胞核大部分被染成绿色 细胞质大部分被染成红色 细胞核也有小部分被染成红色 细胞质也有小部分被染成绿色 结论 DNA主要集中分布于细胞核中 RNA主要集中分布于细胞质中 在细胞质中也有DNA分布 在细胞核中也有RNA分布 几种液体 的作用 第 2 页 共 20 页 实验二：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修一P18） 一实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 二实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应 。

1还原糖 （如葡萄糖、果糖、麦芽糖）+ 斐林试剂砖红色沉淀 甲液： 0.1g/ml NaOH 溶液 乙液： 0.05g/ml CuSO 4 溶液 实质： 是还原糖（全部单糖、麦芽糖、果糖、乳糖）与新制的Cu ( OH ) 2反应生成砖红 色氧化亚铜（Cu 2O） 2脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色（或被苏丹染液染成红色） 3蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应 蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性 NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu 2+作用，产生紫色反应 ） A液： 0.1g/ml NaOH 溶液 B液： 0.01g/ml CuSO 4 溶液 实质： 在碱性条件下，肽键结构与铜离子反生络合反应，生成紫色络合物 4. 淀粉遇碘变蓝色 三实验材料 1做 还原糖鉴定 实验：应选 含糖高，颜色为白色或近白色的植物组织，如苹果、梨因 为组织的颜色较浅，最好无色，防止颜色干扰且易于观察 2做 脂肪的鉴定 实验：应选富含脂肪的 种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡34 小时（也可用蓖麻种子） 3做 蛋白质的鉴定实验：可用 富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清等 四、实验试剂 斐林试剂、苏丹或苏丹染液、双缩脲试剂、体积分数为50% 的酒精溶液，碘液、蒸 馏水。

五、方法步骤 （一）可还原糖的鉴定 操 作 方 法注 意 问 题解 释 1. 制备组织样液 （去皮、切块、研磨、过滤） 苹 果或梨组织液必须临时制 备 要取 组织的颜色较浅，最好无 色，易于观察 因苹果多酚氧化酶含量高， 组织液很易被氧化成褐色， 将产生的颜色掩盖 2. 取 1 支试管，向试管内注 入 2mL组织样液 3. 向试管内注入1mL新制的 斐林试剂，振荡（此时呈 现斐林试剂的颜色：浅蓝 色） 应将组成斐林试剂的甲液、乙 液分别配制、储存，使用前才 将甲、乙液等量混匀成斐林试 剂； 切勿将甲液、乙液分别加入苹 斐林试剂很不稳定，易分 解 甲、乙液分别加入时可能无 4. 试管放在盛有50-65 0C 温 水的大烧杯中，加热约2 分 钟 ，观察到溶液颜色：浅蓝 色 棕色砖红色（沉 淀） 最好用试管夹夹住试管上部， 使试管底部不触及烧杯底部， 试管口不朝向实验者 也 可用酒精灯对试管直接加 热 防止试管内的溶液冲出试 管，造成烫伤； 缩短实验时间 留适当样液与反应后溶液做对照，结论：组织样液中含有还原糖 水浴加热 斐林试剂使用时：甲乙液等量混匀后立即使用 双 缩 脲 试使用时： 先加 A 液后加 B 液 第 3 页 共 20 页 （二）脂肪的鉴定 显微镜观察法 操 作 方 法注 意 问 题解 释 花生种子浸泡、去皮、切下一些子 叶薄片， 将薄片放在载玻片的水滴 中，用吸水纸吸去装片中的水。

干种子要浸泡34 小 时，新花生的浸泡时 间可缩短 因为浸泡时间短，不易切片， 浸泡时间过长，组织较软，切 下的薄片不易成形切片要尽 可能薄些，便于观察 取最理想的薄片，放在载玻片中央 在子叶薄片上滴23滴苏丹或苏 丹染液 ，染色 1 分钟 染色时间不宜过长 用吸水纸吸去薄片周围染液，用 50% 酒精洗去浮色，吸去酒精 酒精用于洗去浮色 防止浮色影响对橘黄色脂肪 滴的观察 酒精是脂溶性溶剂，可将花 生细胞中的脂肪颗粒溶解成油 滴 用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上 12 滴蒸馏水，盖上盖玻片 滴上清水可防止盖盖玻片时产 生气泡 低倍镜下找到花生子叶薄片的最 薄处， 可看到细胞中有染成橘黄色 或红色圆形小颗粒 装片不宜久放 时间一长，油滴会溶解在乙醇 中 花生种子匀浆 + 苏丹 III染液橘黄色或 花生种子匀浆 + 苏丹 IV 染液红色 三、蛋白质的鉴定 操 作 方 法注 意 问 题解 释 制备组织样液 （浸泡、去皮研磨、过滤 黄豆浸泡1 至 2 天，容易研磨成浆， 也可购新鲜豆浆以节约实验时间 鉴定：加样液约2ml 于试管中 加入双缩脲试剂A，摇匀 再加入双缩脲试剂B 液 34 滴，摇匀溶液变 紫色 A 液和 B 液也要分开 配制，储存。

鉴定时先加A液后加 B液 CuSO4溶液不能多加 先加 NaOH溶液，提供一个碱性的环 境A、B液混装或同时加入，会导致 Cu 2+变成 Cu ( OH ) 2沉淀，而失效 否则 CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实 颜色 可用蛋清代替豆浆蛋清要先稀释 如果稀释不够， 在实验中蛋清粘在试 管壁， 与双缩脲试剂反应后会粘固在 试管内壁上，使反应不容易彻底，并 且试管也不易洗干净 留适当样液与反应后溶液做对照 附：淀粉的检测和观察 用试管取2ml 待测组织样液，向试 管内滴加 2 滴碘液，观察颜色变化 碘液不要滴太多以免影响颜色观察 第 4 页 共 20 页 实验三：用显微镜观察多种多样的细胞（必修一P7） 一实验目的 （1）使用高倍显微镜观察几种细胞，比较不同细胞的异同点 （2）运用制作临时装片的方法 二实验原理： 利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构，例如： 可以看到 叶绿体、线粒体等细胞器（能看到细胞器，无法看清细胞器结构），从而能够区别 不同的细胞 光学显微镜细胞显微结构图：不能显示细胞器的内部结构 电子显微镜细胞亚显微结构图：能显示细胞器的内部结构 三显微镜的使用：不能直接使用高倍显微镜，一定是先低倍后高倍观察 低倍显微镜的使用：取镜安放对光压片调焦观察 高倍显微镜的使用：在低倍镜下找到目标移装片使观察对象位于视野中央转动 转换器换高倍镜调焦观察 注：移中央：观察对象在哪往哪移；由低倍换高倍镜后一定不能转动粗准焦螺旋（容 易压坏玻片），只需轻轻转动细准焦螺旋微调即可 四相关问题 物镜：有螺纹，镜头越长，放大倍数越大，距离装片的距离越近 目镜：无螺纹，镜头越长，放大倍数越小 总放大倍数目镜放大倍数物镜放大倍数 显微镜放大倍数是指物体的长度与宽度放大倍数 物像大小视野范围看到细胞数目视野亮度物镜与装片距离 低倍镜小大多亮远 高倍镜大小少暗近 为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观 察？ 提示： 如果直接用高倍镜观察，往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。

因此，需要 先用低倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察 五：讨论 1. 试归纳所观察到的细胞在结构上的共同点，并描述它们之间的差异，分析产生差异的可能 原因： 答：共同点是：有细胞膜、细胞质和细胞核，植物细胞还有细胞壁可能原因是：这些细胞 的位置和功能不同，其结构与功能相适应，这是个体发育过程中细胞分化产生的差异 2. 低倍镜换为高倍镜后，若看不到或看不清原来的像，可能原因？（ABC ） A、物像不在视野中 B、焦距不在同一平面 C、载玻片放反，盖玻片在下面 D、未换目镜 3. 污点判断： (1 ）污点随载玻片的移动而移动，则位于载玻片上； (2 ）污点不随载玻片移动，换目镜后消失，则位于目镜；换物镜后消失，则位于物镜； (3 ）污点不随载玻片移动，换镜后也不消失，则位于反光镜上 显微镜 镜头 放大倍数 第 5 页 共 20 页 实验四：用高倍镜观察线粒体和叶绿体（必修一P47） 一、实验目的 使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布 二、实验原理 叶肉细胞中的叶绿体：因其本身含有色素，呈绿色故不需染色，呈扁平的椭圆球形或 球形 线粒体 ：本身无色，需染色体才能观察到。

线粒体 +健那绿染液蓝绿色 健那绿染液 是专一性染线粒体的活细胞染料 ，染色后细胞仍然是活的 三、实验材料 观察叶绿体时选用：藓类的叶、黑藻的叶取这些材料的原因是：叶子薄而小，叶绿 体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料若用菠菜叶作实验材 料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉因为表皮细胞不含叶绿体 观察线粒体时选用：人口腔上皮细胞或紫色洋葱鳞片叶内表皮细胞（无色） 四、方法步骤 实 验 步 骤注 意 问 题分 析 观 察 叶 绿 体 1制片：用镊子取一片黑藻的 小叶，放入载玻片的水滴中，盖 上盖玻片 制片和镜检时， 临时装片中 的叶片不能放干了，要随时 保持有水状态 否则细胞或叶绿体失 水收缩， 将影响对叶绿 体形态和分布的观察 2低倍镜下找到叶片细胞 3高倍镜下观察叶绿体的形态 和分布 观 察 线 粒 体 1制作人的口腔上皮细胞临时 装片 在洁净载玻片中央滴一滴 健那绿染液用牙签取口 腔上皮细胞盖盖玻片 健那绿染液是 活细胞 染料（不影响细胞生 命） 2低倍找到口腔上皮细胞后， 换高倍镜观察线粒体 蓝绿色的是线粒体，细胞质 接近无色 专一性染线粒体的 五、讨论 1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？为什么？ 答： 不是。

呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体 的方向，使叶绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤 2、叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系？ 答：叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用如叶绿体在不同光照条件下 改变方向又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照 第 6 页 共 20 页 实验五：通过模拟实验探究膜的透性（必修一 P60“问题探讨”） 一、实验目的：1. 概述扩散作用的含义2说明生物膜的选择透过性3. 尝试模拟实验的 方法 二实验原理： 半透膜(semipermeable membrane)：指一类可以让小分子物质透过而大分子物质不能通过 的薄膜的总称 小分子和大分子的界定依据膜种类的不同而划分范围不同如动物的膀胱膜、 肠衣等，可以让某些物质透过，而另一些物质不能透过；或者（玻璃纸）水分子可以透过， 而蔗糖分子因为比较大，不能透过 可以用半透膜将不同浓度的溶液分隔开，然后通过观察 溶液液面高低。